【技术实现步骤摘要】
一种7
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氨基头孢烷酸生产菌及其制备方法与应用
[0001]本专利技术属于生物
,尤其涉及工程菌构建
,具体涉及一种7
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氨基头孢烷酸生产菌及其制备方法与应用。
技术介绍
[0002]7‑
氨基头孢烷酸(7
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Aminocephalosporanic acid,7
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ACA,结构式如图1所示)是合成头孢类抗生素的重要中间体。目前,7
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ACA由顶头孢霉(Acremonium chrysogenum)的发酵产物头孢菌素C(Cephalosporin C,CPC,结构式如图1所示)裂解而成。主要包括以下两种方法:传统工艺主要以化学法由CPC经羧基保护,酰胺键断裂与脱保护等多步工艺裂解生产7
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ACA。自1962年美国礼来公司成功地采用化学裂解法由CPC生产出7
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ACA以来,化学裂解法得到了深入的研究,已经实现工业化生产。具体操作工艺为:在酯化釜内投入头孢菌素C钠盐和反应溶剂二氯甲烷, ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种合成7
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氨基头孢烷酸的方法,为在酵母菌中引入CPC酰化酶和头孢菌素C合成途径,得到重组菌,发酵所述重组菌,得到7
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氨基头孢烷酸;所述CPC酰化酶,为如下A或B或C:A)序列表中序列2所示;B)序列表中序列1所示;C)所述蛋白为将A或B所示蛋白的氨基酸序列末端添加标签序列且具有CPC酰化酶活性的由A或B衍生的蛋白。2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述酵母菌为酿酒酵母。3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述发酵所在体系中含有单糖;所述头孢菌素C合成途径所需要的酶包括异青霉素N合酶IPNS、异青霉素N差向异构酶IPNE、脱乙酰氧头孢菌素C合成酶扩环酶DAOCS、脱乙酰头孢菌素C合成酶羟化酶DAOCS、脱乙酰头孢菌素C乙酰转移酶、ACV三肽合成酶和磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶。4.CPC酰化酶,为如下A或B或C:A)序列表中序列2所示;B)序列表中序列1所示;C)所述蛋白为将A或B所示蛋白的氨基酸序列末端添加标签序列且具有CPC酰化酶活性的由A或B衍生的蛋白。5.编码权利要求4所述CPC酰化酶的核酸分子。6.含有权利要求4所述CPC...
【专利技术属性】
技术研发人员:孙周通,杨大猛,苏文成,曲戈,张武元,
申请(专利权)人:中国科学院天津工业生物技术研究所,
类型:发明
国别省市:
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