一种人工免疫球蛋白的合成及其在药物方面应用制造技术

本发明专利技术属于生物医药技术领域，具体涉及一种人工免疫球蛋白的合成及其在药物方面应用。本发明专利技术提供的人工免疫球蛋白由PD

【技术实现步骤摘要】
一种人工免疫球蛋白的合成及其在药物方面应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种人工免疫球蛋白的合成及其在药物方面应用。

技术介绍

[0002]新兴的免疫检查点阻断(ICB)治疗，特别是靶向程序性细胞死亡受体1(PD
‑
1)及其配体程序性死亡配体1(PD
‑
L1)的治疗，彻底改变了肿瘤治疗模式，使肿瘤免疫治疗成为人们关注的焦点。尽管现有的阻断PD
‑
L1和PD
‑
1的抗体对多种晚期癌症有巨大的好处，但超过60％的患者未能实现持久缓解，甚至一些患者对这些药物没有反应。在这些情况下，基于抗体的药物在细胞表面构象阻断PD
‑
1或PD
‑
L1，但它们的效力可以被一系列涉及PD
‑
L1的免疫逃逸行为所削弱：1)PD
‑
L1的代偿表达；2)抗体的内吞和随后的降解；3)位于循环核内体上的PD
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L1的重新聚集；4)肿瘤外泌体上过表达的PD
‑
L1对抗PD
‑
L1抗体的中和。
[0003]因此，在肿瘤细胞中，降低包括细胞质、膜和外泌体上PD
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L1的含量，是使PD
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L1作为免疫抑制分子可靠和持久靶向的一个重要因素。此外，基于抗体的ICB治疗还受到了极高的价格、苛刻的储存条件、高免疫原性和由代偿效应和/或抗抗体产生的获得性耐药的困扰。为此解决这些问题，目前已经开发了一些技术和方法，如蛋白质水解靶向嵌合体(PROTACs)、溶酶体靶向嵌合体(LYTACs)和分子胶，试图通过不同的分子属性来降解ICB相关蛋白。通过这些手段，虽然已经在克服基于抗体的ICB治疗的先天性/获得性耐药性和药物障碍方面取得了一些成功，但在以下方面仍然存在重大挑战:1)寻找肿瘤PD
‑
L1降解治疗的潜在受益者；2)准确有效地减少肿瘤部位PD
‑
L1的细胞丰富度。
[0004]为了探索肿瘤PD
‑
L1降解治疗的潜在候选者，可以通过分析包含PD
‑
L1阳性临床样本的TCGA数据包，评估常用的肿瘤靶向分子与肿瘤PD
‑
L1表达的关系，或者对COAD和SKCM抗PD
‑
1耐药PDX小鼠模型的生化分析，从而获得肿瘤PD
‑
L1过表达以及相应的CD8+T细胞免疫抑制情况。进而获知COAD和SKCM是否都是PD
‑
L1降解治疗的潜在候选者。当发现肿瘤酸性微环境(TAME)可能是PD
‑
L1过表达的潜在靶点。PD
‑
L1的表达与负责溶酶体降解的伴侣蛋白HSPA8呈正相关时，假设以TAME为靶点并通过HSPA8介导的溶酶体降解来降解PD
‑
L1是降低SKCM和COAD中整个肿瘤细胞PD
‑
L1含量的有效而准确的方法。
[0005]然而，传统的治疗药物如小分子化合物、多肽或抗体无法完成这一复杂的过程，因为涉及到肿瘤细胞外TAME的反应和肿瘤细胞内PD
‑
L1的降解。作为一种很有前途的药物发现途径，蛋白质药物可以执行复杂的任务，包括催化生化反应和调节信号通路。尽管基因组测序和结构生物学的快速发展已经揭示了越来越多的自然界具有多种功能的蛋白质蓝图，但定制具有特定蛋白质功能的药物在今天仍然是一个巨大的挑战。
[0006]为实现上述研究目标，人们致力于利用化学工程和合成生物学技术来设计具有增强或扩展功能的蛋白质：即通过将天然和/或非天然功能整合到模板蛋白中，利用表位嫁接、序列随机化和定向筛选等方法对现有的天然蛋白进行重新改造。但这一有前景的策略任然存在局限性：不仅会受到模板蛋白数量有限的阻碍，还不能完全利用模板蛋白的拓扑
结构，实现与靶蛋白的整体形状互补。因此，需要一种普遍可行的方法来创造具有明确结构和功能的天然或非天然蛋白质作为候选药物。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的在于提供一种人工免疫球蛋白的合成方法和所合成的物质在药物方面的应用，为了探索肿瘤PD
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L1降解治疗的潜在候选者，本专利技术研究过程分析了一个包含PD
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L1阳性临床样本的TCGA数据包，设计了两个具有特定生物功能作为构建块的具有左旋和右旋多肽模式的多肽折叠体。通过它们之间有序的自组装，构建了一个具有TAME响应能力的类球蛋白蛋白纳米球，它可以将肿瘤PD
‑
L1与HSPA8结合，然后将其递送到溶酶体中进行精确降解。以TAME为靶点并通过HSPA8介导的溶酶体降解来降解PD
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L1是降低SKCM和COAD中整个肿瘤细胞PD
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L1含量的有效而准确的方法。本专利技术获得的球形蛋白质样纳米人工制品被命名为靶向PD
‑
L1的人工免疫球蛋白(IgPβ)
[0008]基于上述目的，本申请通过提供一种人工免疫球蛋白的合成方法和应用该蛋白的药物来解决该领域中的这种需要。
[0009]一方面，本专利技术涉及一种人工免疫球蛋白的合成方法，所述人工免疫球蛋白由PD
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L1
LYS
和PD
‑
L1
LYS
/Plus经过两步温和自组装而成。
[0010]进一步的，本专利技术所述PD
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L1
LYS
和PD
‑
L1
LYS
/Plus采用固相肽合成方法，以荧甲氧基保护的L
‑
或D
‑
氨基酸为原料，经HBTU/HOBT催化缩合反应合成。
[0011]具体的，本专利技术合成路线如下：
[0012]。
[0013]具体的，本专利技术所述PD
‑
L1
LYS
通过无限的金
‑
硫基配位作用自组装成球形折叠体IgPα；将PD
‑
L1
LYS
/Plus
‑
Au(I)前驱体加入到IgPα溶液中，PD
‑
L1
LYS
/Plus将在亲金相互作用的驱动下在IgPα表面自组装形成目标人工免疫球蛋白IgPβ。
[0014]另外一方面，本专利技术提供了一种PD
‑
L1降解的药物，所述药物通过形成PD
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L1/PD
‑
L1
LYS
/HSPA8复合物发挥作用。
[0015]具体的，本专利技术所述PD
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L1
LYS
由三部分组成:
[0016]1)由D
‑
对映体α
‑
氨基酸组成的PD
‑
L1结合基序；
[0017]2)三聚乙二醇连接子；
[0018]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种人工免疫球蛋白的合成方法，其特征在于，所述人工免疫球蛋白由PD
‑
L1
LYS
和PD
‑
L1
LYS
/Plus经过两步温和自组装而成。2.根据权利要求1所述的人工免疫球蛋白的合成方法，其特征在于，所述PD
‑
L1
LYS
和PD
‑
L1
LYS
/Plus采用固相肽合成方法，以荧甲氧基保护的L
‑
或D
‑
氨基酸为原料，经HBTU/HOBT催化缩合反应合成。3.根据权利要求1所述的人工免疫球蛋白的合成方法，其特征在于。4.根据权利要求1所述的人工免疫球蛋白的合成方法，其特征在于，所述PD
‑
L1
LYS
通过无限的金
‑
硫基配位作用自组装成球形折叠体IgPα；将PD
‑
L1
LYS
/Plus
‑
Au(I)前驱体加入到IgPα溶液中，PD
‑
L1
LYS
/Plus将在亲金相互作用的驱动下在I...

【专利技术属性】
技术研发人员：何旺骁，闫瑾，刘丹，
申请(专利权)人：西安交通大学，
类型：发明
国别省市：