一种高纯度山柰酚3-O-(2制造技术

本发明专利技术公开了一种高纯度山柰酚3

【技术实现步骤摘要】
一种高纯度山柰酚3
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阿哌呋喃基)芸香苷的制备方法


[0001]本专利技术涉及植物提取
，特别涉及一种高纯度山柰酚3
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阿哌呋喃基)芸香苷的制备方法。

技术介绍

[0002]耳叶番泻叶(Cassia auriculata L Plant)，又名圆叶番泻叶，为豆科Lesuminosae植物耳叶番泻Cassia auriculataL.的干燥叶，常掺杂于狭叶番泻叶中。番泻叶中的二蒽酮类衍生物番泻苷A、B、C、D的泻下作用及刺激性较其他含蒽醌类的泻药更强，且口服用药毒性很小，临床常用于急性便秘。耳叶番泻叶中二蒽酮类化合物的种类和含量大幅低于番泻叶，掺入过多会影响番泻叶的质量，影响用药的有效性和安全性。所以寻找一种耳叶番泻叶中专属性成分，用于耳叶番泻叶掺伪番泻叶的鉴别具有重要意义。经质谱鉴定，山柰酚3
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阿哌呋喃基)芸香苷(kaempferol 3
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apiofuranosyl)rutinoside)(结构式参见式Ⅰ)为耳叶番泻叶中专属性成分，在番泻叶中不含有，但该化合物无市售对照品。
[0003][0004]关于kaempferol 3r/>‑
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apiofuranosyl)rutinoside的分离纯化技术，目前未见有针对性的分离方法。现有方法一般为传统提取分离方式，且报道较少，往往通过对植物进行广泛提取分离得到该化合物，无目标追踪性，得率极低。较先进的报道之一是采用葡聚糖凝胶柱和半制备液相对其进行分离纯化，其工艺为取0.89kg红瓜Cocciniagrandis(L.)Voigt的叶子，在室温下加入甲醇3.25L，浸渍3天，回收溶剂后得到27.86g粗提取物。取上述粗提物10g，置于Sephadex LH
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20柱(4
×
78cm)上，用甲醇洗脱，得到22个馏分(F1
–
F22)。进一步使用半制备型C18 HPLC SunFire色谱柱(19
×
250mm，5.0μm)对上一步中的所有馏分进行分离，从F9和F10馏分中得到3个化合物，其中之一为Kaempferol3
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O
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β
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D
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apiofuranosyl
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(1
→
2)
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[α
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L
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rhamnopyranosyl
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(1
→
6)]‑
β
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D
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glucopyranoside(即kaempferol 3
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apiofuranosyl)rutinoside，8.3mg)。该方法步骤较繁琐，采用甲醇浸渍，耗时长且易提取不完全；采用葡聚糖凝胶柱分离，有机溶剂用量大、工作量大且耗时长，对目标成分分离没有明确追踪性。此外，该方法提取效率极低，最后得率仅为
0.0026％(得率％＝8.3mg/10g
×
27.86g/0.89kg
×
100％＝0.0026％)。

技术实现思路

[0005]本专利技术为了解决现有的山柰酚3
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阿哌呋喃基)芸香苷分离纯化方法产率较低，且工艺繁琐的问题，提供了一种高纯度山柰酚3
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阿哌呋喃基)芸香苷的制备方法，该方法联合使用制备液相色谱仪与高效液相色谱仪，将kaempferol3
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apiofuranosyl)rutinoside从耳叶番泻叶提取液中分离出来，并且每步回收率高达80％以上，最终得到的kaempferol 3
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apiofuranosyl)rutinoside纯度较高。
[0006]本专利技术是采用以下技术方案得以实现的。
[0007]一种高纯度山柰酚3
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阿哌呋喃基)芸香苷的制备方法，包括以下步骤：
[0008]S1.药材提取：将耳叶番泻叶加入20
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25倍量的甲醇溶液，超声处理20
‑
40分钟，过滤得到提取液，重复多次合并提取液，减压回收溶剂，得到固体提取物，将所得固体提取物用10
‑
15倍量甲醇溶液溶解，得到提取液；
[0009]S2.一次制备：将步骤S1得到的提取液进行液相色谱，液相色谱条件为：安捷伦制备液相色谱仪FL
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L100G，色谱柱为Agilent ZORBAX SB
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C18(250
×
9.4mm,5μm)，以乙腈
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1％冰乙酸为流动相，流速为2.0ml/分钟，柱温为25℃，检测波长为270nm，收集10
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11分钟流出液，得一次制备洗脱液；
[0010]S3.二次制备：将步骤S2得到的洗脱液回收溶剂得到固体提取物，再用5
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10倍量甲醇溶解固体提取物，将所得溶液进行液相色谱，液相色谱条件为：岛津高效液相色谱仪LC
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20AD，色谱柱为Thermo ODS HYPERSIL Dim(50
×
4.6mm,5μm)，以乙腈
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1％冰乙酸为流动相，流速为1.5ml/分钟，柱温为40℃，检测波长为270nm，收集5
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7分钟流出液，得二次制备洗脱液；
[0011]S4.将步骤S3得到的洗脱液回收溶剂后减压干燥，得到山柰酚3
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阿哌呋喃基)芸香苷提取物。
[0012]进一步的，步骤S1中，甲醇溶液的浓度为50％
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80％。
[0013]进一步的，步骤S1中，甲醇提取次数为2
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3次。
[0014]进一步的，步骤S2中，乙腈
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1％冰本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高纯度山柰酚3
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阿哌呋喃基)芸香苷的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：S1.药材提取：将耳叶番泻叶加入20
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25倍量的甲醇溶液，超声处理20
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40分钟，过滤得到提取液，重复多次合并提取液，减压回收溶剂，得到固体提取物，将所得固体提取物用10
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15倍量甲醇溶液溶解，得到提取液；S2.一次制备：将步骤S1得到的提取液进行液相色谱，液相色谱条件为：安捷伦制备液相色谱仪FL
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L100G，色谱柱为AgilentZORBAXSB
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C18(250
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9.4mm,5μm)，以乙腈
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1％冰乙酸为流动相，流速为2.0ml/分钟，柱温为25℃，检测波长为270nm，收集10
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11分钟流出液，得一次制备洗脱液；S3.二次制备：将步骤S2得到的洗脱液回收溶剂得到固体提取物，再用5
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10倍量甲醇溶解固体提取物，将所得溶液进行液相色谱，液相色谱条件为：岛津高效液相色谱仪LC
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20AD，色谱柱为ThermoODSHYPERSILDim(50
×
4.6mm,5μm)，以乙腈
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1％冰乙酸为流动相，流速为1.5ml/分钟，柱温为40℃，检测波长为270nm，收集5
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7分钟流出液，得二次制备洗脱液；S4.将步骤S3得到的洗脱液回收溶剂后减压干燥，得到山柰酚3
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阿哌呋喃基)芸香苷提取物。2.根据权利要求1所述的一种高纯度山柰酚3
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阿哌呋喃基)芸香苷的制备方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：车爽，关鑫，郑新元，周军，曲佳，
申请(专利权)人：天津市药品检验研究院，
类型：发明
国别省市：