一种淫羊藿提取物的制备方法及其淫羊藿提取物和应用技术

本发明专利技术公开了一种淫羊藿提取物的制备方法及其淫羊藿提取物和应用，该制备方法包括如下步骤：淫羊藿在溶剂中超声提取，提取后收集有机相和水相，有机相减压浓缩后干燥得到淫羊藿提取物A；水相加入水饱和的正丁醇萃取，萃取后收集正丁醇相，减压浓缩后干燥得到正丁醇相淫羊藿提取物B；提取物A酶解后得到淫羊藿酶解物；提取物B酸解后得到淫羊藿酸解物；将酶解产物和酸解产物混合均匀得到淫羊藿提取物C。本发明专利技术制备的提取物A主要含淫羊藿苷、提取物B主要含朝藿定C；酶解物中淫羊藿次苷Ⅱ得率为40.19

【技术实现步骤摘要】
一种淫羊藿提取物的制备方法及其淫羊藿提取物和应用


[0001]本专利技术属于医药
，尤其是涉及一种淫羊藿提取物的制备方法及其淫羊藿提取物和应用。

技术介绍

[0002]阴茎勃起功能障碍(ED)是常见的性功能障碍之一，具体表现为阴茎不能正常勃起或维持充足的时间。目前，临床上对于勃起功能障碍大多采用西药治疗，如环磷酸鸟苷(cGMP)特异的5型磷酸二酯酶(PDE5)选择性抑制剂
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枸橼酸西地那非。但其对PDE6选择性不高，易造成视物模糊、蓝/绿视、复视、色盲等视觉异常(王剑钧,史亦丽.西地那非的不良反应与安全性监测[J].临床药物治疗杂志,2007(02):54
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57.)。
[0003]辛钟成(辛钟成,淫羊藿苷防治勃起功能障碍的药理药效及作用机理.北京市,北京大学第一医院,2011
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05
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01.)指出通过髂内动脉结扎和睾丸摘除构建ED大鼠模型，并连续灌服淫羊藿苷，可使ICP、iNOS、eNOS水平均明显提高，阴茎海绵体平滑肌/肌原纤维比例改善，表明淫羊藿苷可有效治疗ED。同时文章研究了淫羊藿苷对PDE1
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PDE11酶抑制效果，结果显示对PDE5具有选择性抑制作用，能够和cGMP竞争性与PDE5的酶蛋白功能区域相结合，特异性阻断PDE5对cGMP的降解作用，证明其与西地那非的作用机制类似。并且淫羊藿次苷Ⅱ呈剂量依赖性的提高大鼠阴茎勃起功能，作用效果强于淫羊藿苷。
[0004]大量专利和文献对淫羊藿苷的代谢产物进行了相关研究，如CN107964555B公开了一种利用绿色木霉，实现淫羊藿次苷Ⅱ的生物富集的方法。并在随后验证其在勃起功能障碍(CN108392487A)、防治生殖功能障碍(CN105079013B)、防治肾脏疾病(CN105079014B)中的应用。CN102417504A公开了一种S
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淫羊藿素化合物、合成方法及用途，以淫羊藿苷为原料，经柚苷酶处理后得到脱水淫羊藿素，并接上一个可在体内羧酸酯酶的作用下，释放出硫化氢的基团，在其双重作用下，可有效治疗ED。(Dell'Agli M.J Nat Prod.2008Sep；71(9):1513
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7)指出淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅱ、脱水淫羊藿素、西地那非对PDE5A1的IC50值分别为5.9μM、0.16μM、2.2μM、0.075μM，表明淫羊藿次苷Ⅱ、脱水淫羊藿素针对PDE5酶的抑制效果均强于淫羊藿苷。以上文献均表明淫羊藿苷的代谢产物如淫羊藿次苷Ⅱ、脱水淫羊藿素相比淫羊藿苷而言具有更高的活性。
[0005]目前已有不少专利公开了以淫羊藿苷为原料制备淫羊藿次苷Ⅱ、全合成制备脱水淫羊藿素的方法。如CN106148454B公开了一种将淫羊藿苷在果胶酶的作用下酶解，并在后续通过两次结晶的方法得到淫羊藿次苷Ⅱ纯品；CN106755214B公开了一种以淫羊藿苷为原料，双相酶水解获取淫羊藿次苷Ⅱ的方法；CN109776559B公开了一种全合成制备脱水淫羊藿素的方法。但目前尚未有专利公开从淫羊藿中提取分离得到朝藿定C和淫羊藿苷，并进一步分别处理后得到脱水淫羊藿素和淫羊藿次苷Ⅱ，从而最大限度的利用淫羊藿中有效成分的方法。

技术实现思路

[0006]专利技术目的：针对现有技术仅针对淫羊藿中淫羊藿苷及其代谢产物进行相关研究，而忽略了朝藿定C这一含量更为丰富，也可开发成治疗ED药物的组分。本专利技术的制备方法可实现淫羊藿苷和朝藿定C的相对富集，并对其分别进行进一步处理得到活性更高的淫羊藿次苷Ⅱ和脱水淫羊藿素，以更充分的发挥淫羊藿在抗疲劳、治疗ED领域的应用。
[0007]本专利技术还提出一种淫羊藿提取物和应用。
[0008]技术方案：为了实现上述目的，本专利技术所述一种淫羊藿提取物的制备方法，包括如下步骤：
[0009](1)以淫羊藿为原料，打粉，过筛，混匀，作为待提粉；
[0010](2)将步骤(1)所得的淫羊藿待提粉投入含水、乙酸乙酯的提取溶剂中，超声提取；
[0011](3)将步骤(2)所得的提取液静置分层，分取乙酸乙酯相和水相；
[0012](4)将步骤(3)所得乙酸乙酯相减压浓缩后干燥，得到淫羊藿提取物A；
[0013](5)将步骤(3)所得的水相加入水饱和的正丁醇中萃取，收集正丁醇相，减压浓缩后干燥，得到淫羊藿提取物B；
[0014](6)将步骤(4)所得提取物A投入含水解酶的溶剂中酶解，混悬液离心后收集沉淀并干燥得到淫羊藿酶解物；
[0015](7)将步骤(5)所得提取物B投入酸溶液中酸解，酸解后调pH至中性，混悬液离心后收集沉淀并干燥得到淫羊藿酸解物；
[0016](8)将步骤(6)和步骤(7)所得的淫羊藿酶解物和酸解物混合均匀，即得淫羊藿提取物C。
[0017]其中，步骤(1)所述过筛的筛分粒径为80
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100目。
[0018]其中，步骤(2)所述提取溶剂为水和乙酸乙酯体积比1：1
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1：3ml/ml的混合溶剂，待提粉与提取溶剂料液比为1：12
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1：40g/mL，超声提取提取时间为30
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90min，超声功率为100
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200W。
[0019]其中，步骤(5)所述的水相与水饱和的正丁醇的体积比为1：1
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1：3ml/ml，萃取时间为5
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30min，萃取次数为1
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3次。
[0020]其中，步骤(6)所述的水解酶包括纤维素酶、柚苷酶或者蜗牛酶，所述溶剂为磷酸盐缓冲液，酶用量为溶剂质量的0.5％
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1.5％，酶解温度为30℃
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50℃，酶解时间为30min
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2h，提取物A与含水解酶的溶剂料液比为1：10
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1：20g/mL。
[0021]作为优选，所述水解酶为蜗牛酶。
[0022]其中，步骤(7)所述酸溶液为硫酸、硝酸或者盐酸，浓度为1mol/L
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3mol/L，酸解温度为70℃
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80℃，酸解时间为30min
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2h,提取物B与酸解溶剂料液比为1：10
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1：20g/mL。
[0023]本专利技术所述的淫羊藿提取物的制备方法所制备的淫羊藿提取物。
[0024]其中，所述淫羊藿提取物中本淫羊藿提取物A含淫羊藿苷75.31
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127.59mg/g、提取物B含朝藿定C229.52
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267.23mg/g、酶解物中淫羊藿次苷Ⅱ得率为40.19
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86.25％、酸解物中脱水淫羊藿素得率为61.27
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77.51％。
[0025]本专利技术所述的淫羊藿提取物在制备抗疲劳、治疗勃起功能障碍药物中的应用。
[0026]本专利技术中朝藿定C、淫羊藿苷、淫羊藿次苷Ⅱ和脱本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种淫羊藿提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)以淫羊藿为原料，打粉，过筛，混匀，作为待提粉；(2)将步骤(1)所得的淫羊藿待提粉投入含水、乙酸乙酯的提取溶剂中，超声提取；(3)将步骤(2)所得的提取液静置分层，分取乙酸乙酯相和水相；(4)将步骤(3)所得乙酸乙酯相减压浓缩后干燥，得到淫羊藿提取物A；(5)将步骤(3)所得的水相加入水饱和的正丁醇中萃取，收集正丁醇相，减压浓缩后干燥，得到淫羊藿提取物B；(6)将步骤(4)所得提取物A投入含水解酶的溶剂中酶解，混悬液离心后收集沉淀并干燥得到淫羊藿酶解物；(7)将步骤(5)所得提取物B投入酸溶液中酸解，酸解后调pH至中性，混悬液离心后收集沉淀并干燥得到淫羊藿酸解物；(8)将步骤(6)和步骤(7)所得的淫羊藿酶解物和酸解物混合均匀，即得淫羊藿提取物C。2.根据权利要求1所述的淫羊藿提取物的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述过筛的筛分粒径为80
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100目。3.根据权利要求1所述的淫羊藿提取物的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述提取溶剂为水和乙酸乙酯体积比1：1
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1：3的混合溶剂，待提粉与提取溶剂料液比为1：12
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1：40g/mL，超声提取的提取时间为30
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90min，超声功率为100
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200W。4.根据权利要求1所述的淫羊藿提取物的制备方法，其特征在于，步骤(5)所述的水相与水饱和的正丁醇的体积比为1：1
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1：3，萃取时间为5
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【专利技术属性】
技术研发人员：李斯文，李珏泉，李玉婷，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：