紫龙金片的高效液相色谱指纹图谱的构建方法及应用技术

本发明专利技术提供一种紫龙金片的高效液相色谱指纹图谱的构建方法及应用，该方法包括供试品溶液的制备、相应对照品溶液以及相应对照药材溶液的制备、构建参照指纹图谱和供试品溶液指纹图谱，确定紫龙金片所含不同药材的特征峰，并进行了特征图谱方法学的验证。本发明专利技术通过大量实验筛选出最佳的流动相组成、梯度洗脱程序、色谱柱、检测波长、检测柱温以及检测流速等分析条件。经特征图谱方法学的验证，本发明专利技术提供的方法，可以全面、客观以及准确地检测和评价紫龙金片的药品质量，可以从源头上保证紫龙金片的安全性和有效性，保证临床疗效。保证临床疗效。保证临床疗效。

【技术实现步骤摘要】
紫龙金片的高效液相色谱指纹图谱的构建方法及应用


[0001]本专利技术涉及中药鉴别
，尤其是涉及一种紫龙金片的高效液相色谱指纹图谱的构建方法及应用。

技术介绍

[0002]紫龙金片是天津中新药业集团股份有限公司隆顺榕制药厂生产的独家品种，质量标准收载于《中国药典》2010年版一部。药典标准中仅有三项鉴别及一项含量测定，无法涵盖紫龙金片中八味药材中众多成分的检测。
[0003]有鉴于此，特提出本专利技术。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的之一在于提供一种紫龙金片的高效液相色谱指纹图谱的构建方法，能够全面、客观以及准确地检测和评价紫龙金片的药品质量。
[0005]本专利技术的目的之二在于本专利技术提供的方法在评价紫龙金片的药品质量方面的应用。
[0006]为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：
[0007]第一方面，本专利技术提供了一种紫龙金片的高效液相色谱指纹图谱的构建方法，包括以下步骤：
[0008]a)提供供试品溶液和参照物溶液；
[0009]参照物包括丹酚酸B和丹参酮ⅡA对照品，以及丹参、半枝莲和蛇莓对照药材；
[0010]b)采用高效液相色谱法对供试品溶液和参照物溶液进行分析，构建高效液相色谱指纹图谱；
[0011]其中，高效液相色谱条件包括：
[0012]色谱柱：Waters Symmetry C
18
色谱柱；
[0013]柱温为20～30℃；
[0014]流动相：流动相A为0.05％～0.15％磷酸和85％～95％的乙腈溶液，流动相B为0.05％～0.15％的磷酸溶液；
[0015]梯度洗脱程序为，按体积百分数计：
[0016]0～7min，A：12
→
17％、B：88
→
83％；
[0017]7～12min，A：17％、B：83％；
[0018]12～24min，A：17
→
22％、B：83
→
78％；
[0019]24～33min，A：22
→
27％、B：78
→
73％；
[0020]33～44min，A：27
→
32％、B：73
→
68％；
[0021]44～51min，A：32
→
77％、B：68
→
23％；
[0022]51～75min，A：77
→
92％、B：23
→
8％；
[0023]流速为0.75～1.0ml/min；
[0024]检测波长为230～320nm。
[0025]优选地，所述紫龙金片的高效液相色谱指纹图谱中包括如下7个共有峰：
[0026]共有峰中峰1来源于蛇莓；峰2+峰3来源于半枝莲；峰4为丹酚酸B峰；峰5+峰6来源于丹参；峰7为丹参酮ⅡA峰。
[0027]优选地，所述各共有峰的相对保留时间变化范围为
±
5％。
[0028]优选地，在所述参照物的高效液相色谱指纹图谱中，以丹酚酸B为参照峰S，计算紫龙金片的各特征峰与S峰的相对保留时间，所述相对保留时间在规定值的
±
5％之内；
[0029]进一步的，所述规定值为：
[0030]26.2
‑
峰1、30.1
‑
峰2、43.5
‑
峰3、45.1
‑
峰4(S)、63.2
‑
峰5、63.0
‑
峰6、69.1
‑
峰7。
[0031]优选地，所述柱温22～28℃，流速0.80～1.0ml/min，检测波长250～310nm；
[0032]进一步的，柱温25℃，流速0.90ml/min，检测波长270nm。
[0033]所述供试品溶液的制备过程，包括以下步骤：
[0034]有机溶剂溶解紫龙金片，加热回流，冷却，有机溶剂补足损失的重量，滤过，得到供试品溶液；
[0035]优选地，所述有机溶剂为甲醇。
[0036]所述对照品溶液的制备过程，包括以下步骤：
[0037]提供含丹酚酸B和丹参酮ⅡA的对照品溶液；
[0038]优选地，甲醇溶解丹酚酸B和丹参酮ⅡA。
[0039]所述对照药材溶液的制备过程，包括以下步骤：
[0040]分别提供丹参、半枝莲和蛇莓制成的干膏粉，利用有机溶剂溶解，加热回流，冷却，有机溶剂补足损失的重量，滤过，得到对照药材溶液；
[0041]优选地，所述有机溶剂为甲醇。
[0042]优选地，所述构建对照品和对照药材的高效液相色谱指纹图谱的过程，包括：建立对照品色谱图、建立丹参对照药材色谱图、建立丹参阴性对照色谱图、建立蛇莓药材色谱图、建立蛇莓阴性对照色谱图、建立半枝莲药材色谱图以及建立半枝莲阴性对照色谱图。
[0043]第二方面，本专利技术提供的方法在评价紫龙金片的药品质量方面的应用。
[0044]与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：
[0045]本专利技术提供的指纹图谱检测方法，经特征图谱方法学验证，可以全面、客观以及准确地检测和评价紫龙金片的药品质量，可以从源头上保证紫龙金片的安全性和有效性，保证临床疗效。
附图说明
[0046]为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0047]图1为本专利技术实施例1提供的紫龙金片部分色谱峰的归属图；
[0048]图2为本专利技术实施例1提供的供试品色谱图；
[0049]图3为本专利技术实施例1提供的混合对照品色谱图；
[0050]图4为本专利技术实施例1提供的丹参对照药材色谱图；
[0051]图5为本专利技术实施例1提供的丹参阴性对照色谱图；
[0052]图6为本专利技术实施例1提供的蛇莓药材色谱图；
[0053]图7为本专利技术实施例1提供的蛇莓阴性对照色谱图；
[0054]图8为本专利技术实施例1提供的半枝莲药材色谱图；
[0055]图9为本专利技术实施例1提供的半枝莲阴性对照色谱图；
[0056]图10为本专利技术试验例1提供的紫龙金片主要特征峰；
[0057]图11为本专利技术试验例2提供的流动相系统为乙腈
‑
0.1％磷酸溶液时的色谱图；
[0058]图12为本专利技术试验例2提供的流动相系统为甲醇
‑
0.1％磷酸溶液时的色谱图；
[0059]图13为本专利技术试验例2提供的流动相系统为乙腈
‑
20mmol/L磷酸二氢钾(pH＝3.2)溶液时的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种紫龙金片的高效液相色谱指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：a)提供供试品溶液和参照物溶液；参照物包括丹酚酸B和丹参酮ⅡA对照品，以及丹参、半枝莲和蛇莓对照药材；b)采用高效液相色谱法对供试品溶液和参照物溶液进行分析，构建高效液相色谱指纹图谱；其中，高效液相色谱条件包括：色谱柱：Waters Symmetry C
18
色谱柱；柱温：20～30℃；流动相：按体积百分数计，流动相A为0.05％～0.15％磷酸和85％～95％乙腈溶液，流动相B为0.05％～0.15％磷酸溶液；按体积百分数计，梯度洗脱程序为：0～7min，A：12
→
17％、B：88
→
83％；7～12min，A：17％、B：83％；12～24min，A：17
→
22％、B：83
→
78％；24～33min，A：22
→
27％、B：78
→
73％；33～44min，A：27
→
32％、B：73
→
68％；44～51min，A：32
→
77％、B：68
→
23％；51～75min，A：77
→
92％、B：23
→
8％；流速：0.75～1.0ml/min；检测波长：230～320nm。2.根据权利要求1所述的高效液相色谱指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述紫龙金片的高效液相色谱指纹图谱中包括如下7个共有峰：峰1来源于蛇莓；峰2和峰3来源于半枝莲；峰4为丹酚酸B峰；峰5和峰6来源于丹参；峰7为丹参酮ⅡA峰。3.根据权利要求2所述的高效液相色谱指纹图谱的构建方法，其特征在于，所述紫龙金片的高效液相色谱中各共有峰的相对保留时间变化范围为
±
5％。4.根据权利要求3所述的高效液相色谱指纹图谱的构建方法，其特征在于，在所述参照物的高效液相色谱指纹图...

【专利技术属性】
技术研发人员：周建宇，李萍，周军，赵晨，刘伟，陈云霞，侯建松，
申请(专利权)人：天津市药品检验研究院，
类型：发明
国别省市：