一种手性镇痛类多肽药物的纯化方法技术

本发明专利技术提供了一种手性镇痛类多肽药物的纯化方法，包括以下步骤：S1)将手性镇痛类多肽药物粗品与甲醇混合溶解，然后加入TFA水溶液稀释，过滤，得到手性镇痛类多肽药物初纯溶液；S2)将手性镇痛类多肽药物初纯溶液通过反相色谱法纯化后获得手性镇痛类多肽药物精纯溶液；所述反相色谱法中，采用十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，甲酸水溶液或乙酸水溶液为A相，甲醇或乙腈为B相；进行梯度洗脱；S3)将手性镇痛类多肽药物精纯溶液通过HPLC法转盐，得到镇痛类多肽药物盐溶液；所述盐溶液经减压浓缩、干燥后得到镇痛类多肽药物纯品。本发明专利技术通过工艺步骤和参数的合理优化，开创性的解决了制备高纯度的手性镇痛类多肽药物的纯化技术难点。度的手性镇痛类多肽药物的纯化技术难点。

【技术实现步骤摘要】
一种手性镇痛类多肽药物的纯化方法


[0001]本专利技术涉及药物分离纯化
，尤其涉及一种手性镇痛类多肽药物的纯化方法。

技术介绍

[0002]阿片样物质受体是一类主要的G蛋白偶联受体，是内源性阿片肽以及阿片类药物结合靶点，广泛存在于中枢神经系统和外周神经系统。阿片受体激活后对神经系统免疫以及内分泌系统具有调节作用，是目前最强且常用的中枢镇痛药。内源性阿片肽是哺乳动物体内天然生成的阿片样活性物质，目前已知的内源性阿片肽大致分为脑啡肽、内啡肽、强啡肽和新啡肽几类。中枢神经系统中存在其相应的阿片受体，即μ、δ和κ受体。μ受体镇痛活性最强，成瘾性也最强，是产生副作用的主要原因。δ受体成瘾性小，镇痛作用也不明显。κ受体(KOR)镇痛活性介于前两者之间。多肽类KOR激动剂能在不进入中枢的情况下在外周发挥镇痛作用，不会导致呼吸抑制和便秘等毒副作用，且成瘾性更低，因此具有药物成瘾治疗的潜力。
[0003]专利CN111233974B报道了一系列具有优异的激动活性的新型KOR激动剂，包括结构如式I
‑
1所示的化合物(化学名：[(S)
‑1‑
(D
‑
苯丙氨酰
‑
D
‑
苯丙氨酰
‑
D
‑
亮氨酰
‑
D
‑
赖氨酰)吡咯烷
‑3‑
基]硼酸盐酸盐)。化合物I
‑
1的粗品中含有多种工艺杂质、降解杂质以及最难分离的手性异构体杂质(式I
>‑
2，化学名：[(R)
‑1‑
(D
‑
苯丙氨酰
‑
D
‑
苯丙氨酰
‑
D
‑
亮氨酰
‑
D
‑
赖氨酰)吡咯烷
‑3‑
基]硼酸盐酸盐)，这些异构体杂质与主成分的极性差异特别小，理化性质极其类似，给检测分析、分离纯化带来了极大的挑战，能否有效获得符合临床所需以及药物研究所需质量的样品是对分离纯化的巨大挑战。因此，开发一种简便高效、收率良好的纯化工艺解决产品质量、收率、成本以及操作便利性等问题顺利保障创新药物开发的临床以及后续所需极为迫切。
[0004]
技术实现思路

[0005]有鉴于此，本专利技术要解决的技术问题在于提供一种手性镇痛类多肽药物I
‑
1的纯化方法，具有较高的收率和纯度。
[0006]为达到上述目的，本专利技术提供了一种手性镇痛类多肽药物I
‑
1的纯化方法，包括以下步骤：
[0007]S1)将手性镇痛类多肽药物粗品与甲醇混合溶解，然后加入TFA水溶液稀释，过滤，得到手性镇痛类多肽药物初纯溶液；
[0008]S2)将手性镇痛类多肽药物初纯溶液通过反相色谱法纯化后获得手性镇痛类多肽药物精纯溶液；所述反相色谱法中，采用十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，甲酸水溶液为A相，甲醇为B相；进行梯度洗脱；
[0009]S3)将手性镇痛类多肽药物精纯溶液通过HPLC法转盐，得到镇痛类多肽药物盐溶液；所述盐溶液经减压浓缩、干燥后得到镇痛类多肽药物纯品。
[0010]本领域技术人员公知：多肽的结构差异极大，手性较多，工艺杂质与各种降解杂质均极难控制，虽然在分析检测中有可能可以有效分离相关杂质，但分析检测由于其色谱条件苛刻，上样量极小，色谱填料粒径极细，成本极高，设备仪器相应要求极高，故其分析方法几乎不可能在工业级纯化制备中实现放大生产。本专利技术通过大量的纯化实验摸索开发了一种独属于该手性镇痛类多肽药物的纯化制备工艺，解决了工业纯化制备的瓶颈与难点。
[0011]本专利技术采用反相色谱纯化和转盐，解决了手性杂质对产物的质量影响，解决了镇痛类多肽药物高温降解和氧化降解的几率。
[0012]本专利技术中，所述手性镇痛类多肽药物粗品由液相合成法或固相合成法合成。
[0013]本专利技术中，所述手性镇痛类多肽药物粗品中包括其手性杂质。
[0014]在本专利技术的一些具体实施例中，所述手性镇痛类多肽药物粗品包括[(S)
‑1‑
(D
‑
苯
丙氨酰
‑
D
‑
苯丙氨酰
‑
D
‑
亮氨酰
‑
D
‑
赖氨酰)吡咯烷
‑3‑
基]硼酸盐酸盐(式I
‑
1所示)和[(R)
‑1‑
(D
‑
苯丙氨酰
‑
D
‑
苯丙氨酰
‑
D
‑
亮氨酰
‑
D
‑
赖氨酰)吡咯烷
‑3‑
基]硼酸盐酸盐(式I
‑
2所示)。
[0015]首先，所述手性镇痛类多肽药物粗品加入甲醇中溶解。
[0016]本专利技术优选的，所述手性镇痛类多肽药物粗品与甲醇的质量体积比为1:9～12(g：ml)。
[0017]然后加入TFA水溶液稀释，过滤，得到手性镇痛类多肽药物初纯溶液。
[0018]本专利技术优选的，所述TFA水溶液的浓度为0.1％～0.3％，更优选为0.3％。
[0019]本专利技术优选的，所述TFA水溶液与手性镇痛类多肽药物粗品的体积质量比为1～1.5：2(ml：g)。
[0020]本专利技术优选的，加入TFA水溶液稀释后，所述手性镇痛类多肽药物在溶液中的浓度为3mg/ml～9mg/ml，更优选为6mg/ml。
[0021]然后进行反相色谱法纯化。
[0022]所述反相色谱法采用十八烷基硅烷键合硅胶为固定相。
[0023]所述十八烷基硅烷键合硅胶的粒径优选为10um，孔径优选为
[0024]所述流动相A相优选为甲酸水溶液或乙酸水溶液。
[0025]所述甲酸水溶液或乙酸水溶液的浓度优选为0.1％～0.2％。
[0026]所述流动相B相优选为甲醇或乙腈，进一步优选为甲醇。
[0027]本专利技术优选的，所述步骤S2)的梯度洗脱具体为：
[0028]B相在5min内维持5％梯度，B相由5.1min至50min由5％升至55％梯度，并维持B相55％梯度至少10min，所述A相为0.15％甲酸水溶液。
[0029]上述反相色谱法主要解决了非对映异构体杂质，且能够有效控制其他工艺杂质，同时对极易出现的水解、氧化杂质进行了有效控制。
[0030]本专利技术优选的，所述HPLC法转盐具体为：
[0031]使用无机盐和强酸组成的缓冲体系通过反相色谱交换转盐。
[0032]所述无机盐优选为氯化铵或其他氯化物，如氯化钠、氯化钾等。
[0033]所述强酸优选为盐酸。
[0034]进一步优选的，所述HPLC法中，流动相A1相为氯化铵水溶液(盐酸调节pH值为3.5)，A2相为盐酸水溶液，进一步优本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种手性镇痛类多肽药物的纯化方法，包括以下步骤：S1)将手性镇痛类多肽药物粗品与甲醇混合溶解，然后加入TFA水溶液稀释，过滤，得到手性镇痛类多肽药物初纯溶液；S2)将手性镇痛类多肽药物初纯溶液通过反相色谱法纯化后获得手性镇痛类多肽药物精纯溶液；所述反相色谱法中，采用十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，甲酸水溶液或乙酸水溶液为A相，甲醇或乙腈为B相；进行梯度洗脱；S3)将手性镇痛类多肽药物精纯溶液通过HPLC法转盐，得到镇痛类多肽药物盐溶液；所述盐溶液经减压浓缩、干燥后得到镇痛类多肽药物纯品。2.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，所述手性镇痛类多肽药物粗品与甲醇的质量体积比为1:9～12(g：ml)；所述TFA水溶液的浓度为0.1％～0.3％；所述TFA水溶液与手性镇痛类多肽药物粗品的体积质量比为1～1.5：2(ml：g)；加入TFA水溶液稀释后，所述手性镇痛类多肽药物在溶液中的浓度为3mg/ml～9mg/ml。3.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，所述甲酸水溶液或乙酸水溶液的浓度为0.1％～0.2％。4.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，所述步骤S2)的梯度洗脱具体为：B相在5min内维持5％梯度，B相由5.1min至50min由5％升至55％梯度，并维持B相55％梯度至少10min，所述A相为0.15％甲酸水溶液。5.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，所述HPLC法转盐具体为：使用无机盐和强酸组成的缓冲体系通过反相色谱交换转盐。6.根据权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，所述HPLC法中，流动相A1相为氯化铵水溶液，A2相为盐酸水溶液，B相为乙腈或甲醇；所述HPLC法转盐的梯度设置为，A1相在60min内维持95％梯度，A2相由60...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗磊，胡沙，袁瑜，刘宏，孟广鹏，
申请(专利权)人：成都诺和晟泰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：