嵌合抗原受体间隔物制造技术

本公开涉及嵌合抗原受体(CAR)，所述嵌合抗原受体包含免疫球蛋白(Ig)衍生的间隔物，例如铰链或环区、其片段或其组合。Ig衍生的间隔物赋予CAR改进的性质，例如，相对于具有不来源于铰链区及其片段、恒定区的环区及其片段、及其组合的间隔物的CAR，细胞因子释放增加。还提供了表达包含Ig衍生的间隔物区的CAR的细胞和使用CAR治疗疾病或病症例如癌症的方法。公开的Ig衍生的间隔物中的一些是来自例如IgA1、IgA2、IgD、IgE、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4或IgM的片段。在一些方面，公开的Ig衍生的间隔物来源于非人免疫球蛋白，例如小鼠免疫球蛋白，诸如IgG2A。公开的其他Ig衍生的间隔物是包含若干个连接的Ig铰链或其片段的模块化构建体。个连接的Ig铰链或其片段的模块化构建体。个连接的Ig铰链或其片段的模块化构建体。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】嵌合抗原受体间隔物
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]此PCT申请要求2020年5月12日提交的美国临时申请号63/023,751的优先权权益，所述临时申请以引用方式整体并入本文。
[0003]对以电子方式提交的序列表的引用
[0004]与本申请一起提交的以ASCII文本文件(名称：4385_016PC01_Seqlisting_ST25.txt；大小：2,351,479字节；和创建日期：2021年5月12日)以电子方式提交的序列表的内容以引用方式整体并入本文。


[0005]本公开提供了嵌合抗原受体(CAR)，其包含来源于免疫球蛋白铰链区或恒定区的间隔物。

技术介绍

[0006]使用表达嵌合抗原受体(CAR)的T细胞的过继免疫疗法是一种很有前途的癌症治疗方法，因为这些细胞可以以不依赖人白细胞抗原(HLA)的方式直接识别和杀死表达抗原的肿瘤细胞。然而，除了仔细选择靶肿瘤相关抗原之外，这种治疗方法还高度依赖于CAR的最佳分子设计。
[0007]因此，需要允许系统优化CAR中的细胞外间隔物以最大限度地增强CAR T细胞功效的方法。

技术实现思路

[0008]本公开提供了一种编码CAR的多核苷酸，所述CAR包含(i)抗原结合结构域，其与靶细胞上表达的肿瘤抗原上的表位结合；(ii)跨膜结构域；(iii)细胞内结构域；和(iv)CAR间隔物，其位于抗原结合结构域和跨膜结构域之间，包含来源于人免疫球蛋白铰链和/或恒定区的氨基酸序列或其功能片段，其中(a)间隔物的长度为约150个氨基酸至约125个氨基酸；并且表位和靶细胞膜表面的距离小于约(b)间隔物的长度为约125个氨基酸至约100个氨基酸；并且表位和靶细胞膜表面的距离小于约(c)间隔物的长度为约100个氨基酸至约75个氨基酸；并且表位和靶细胞膜表面的距离小于约(d)间隔物的长度为约75个氨基酸至约36个氨基酸；并且表位和靶细胞膜表面的距离小于约(e)间隔物的长度为约35个氨基酸至约21个氨基酸；并且表位和靶细胞膜表面的距离为约至约(f)间隔物的长度为约20个氨基酸至约16个氨基酸；并且表位和靶细胞膜表面的距离为约至约(g)间隔物的长度为约15个氨基酸至约11个氨基酸；并且表位和靶细胞膜表面的距离为约至约或(h)间隔物的长度为约10个氨基酸至约5个氨基酸；并且表位和靶细胞膜表面的距离大于约
[0009]本公开还提供了一种编码CAR的多核苷酸，所述CAR包含(i)抗原结合结构域，其与靶细胞上表达的肿瘤抗原上的表位结合；(ii)跨膜结构域；(iii)细胞内结构域；和(iv)CAR间隔物，其位于抗原结合结构域和跨膜结构域之间，包含来源于人免疫球蛋白铰链和/或恒定区的氨基酸序列或其功能片段，其中(a)间隔物的长度为约至约并且表位和靶细胞膜表面的距离小于约(b)间隔物的长度为约至约并且表位和靶细胞膜表面的距离小于约(c)间隔物的长度为约至约并且表位和靶细胞膜表面的距离小于约(d)间隔物的长度为约至约并且表位和靶细胞膜表面的距离小于约(e)间隔物的长度为约(e)间隔物的长度为约至约并且表位和靶细胞膜表面的距离为约至约(f)间隔物的长度为约至约并且表位和靶细胞膜表面的距离为约至约；(g)间隔物的长度为约至约并且表位和靶细胞膜表面的距离为约至约或(h)间隔物的长度为约至约并且表位和靶细胞膜表面的距离大于约
[0010]在一些方面，(a)表位与靶细胞膜表面之间的距离小于约并且间隔物的长度为125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149或150个氨基酸；(b)表位与靶细胞膜表面之间的距离小于约并且间隔物的长度为100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124或125个氨基酸；(c)表位与靶细胞膜表面之间的距离小于约并且间隔物的长度为75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100个氨基酸；(d)表位与靶细胞膜表面之间的距离小于约并且间隔物的长度为36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74或75个氨基酸；(e)表位与靶细胞膜表面之间的距离为约至约并且间隔物的长度为21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34或35个氨基酸；(f)表位与靶细胞膜表面之间的距离为约至约并且间隔物的长度为16、17、18、19或20个氨基酸；(g)表位与靶细胞膜表面之间的距离为约至约并且间隔物的长度为11、12、13、14或15个氨基酸；或(h)表位与靶细胞膜表面之间的距离大于约并且间隔物的长度为5、6、7、8、9或10个氨基酸。
[0011]在一些方面，(a)表位和靶细胞膜表面之间的距离小于约并且间隔物的长度为约约约、约、约约约约或约(b)表位和靶细胞膜表面之间的距离小于约并且间隔物的长度为约约约约约约约约或约或约(c)表位和靶细胞膜表面之间的距离小于约并且间隔物的长度为约约约约约约约约或约(d)表位和靶细
胞膜表面之间的距离小于约并且间隔物的长度为约约约约约约约约约约约、约约约或约(e)表位和靶细胞膜表面之间的距离为约至约并且间隔物的长度为约约约约约约约约或约(f)表位和靶细胞膜表面之间的距离为约至约并且间隔物的长度为约约约和约(g)表位和靶细胞膜表面之间的距离为约至约并且间隔物的长度为约并且间隔物的长度为约约约或约或(h)表位和靶细胞膜表面之间的距离大于约并且间隔物的长度为约约约或约
[0012]本公开还提供了一种编码CAR的多核苷酸，所述CAR包含(i)抗原结合结构域，其与靶细胞上表达的肿瘤抗原上的表位结合；(ii)跨膜结构域；(iii)细胞内结构域；和(iv)CAR间隔物，其位于抗原结合结构域和跨膜结构域之间，包含来源于人免疫球蛋白铰链和/或恒定区的氨基酸序列或其功能片段，其中间隔物包含式C
N
‑
(X1PRX2P)
m
‑
[L
‑
(X1PRX2P)]n
‑
C
C
的氨基酸序列，其中(a)间隔物位于CAR的配体结合结构域和跨膜结构域之间；(b)间隔物具有至少15个氨基酸的长度；(c)m为选自0或1的整数；(d)n为1至20的整数；(e)L为接头多肽序列；(f)C
N
为任选的N末端加帽序列；(g)C
C
为任选的C末端加帽序列；以及(h)X1和X2独立地选自半胱氨酸、甘氨酸、丙氨酸或丝本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种编码嵌合抗原受体(CAR)的多核苷酸，所述CAR包括(i)抗原结合结构域，其与靶细胞上表达的肿瘤抗原上的表位结合；(ii)跨膜结构域；(iii)细胞内结构域；和，(iv)CAR间隔物，其位于所述抗原结合结构域和所述跨膜结构域之间，包含来源于人免疫球蛋白铰链和/或恒定区的氨基酸序列或其功能片段，其中(a)所述间隔物的长度为约150个氨基酸至约125个氨基酸；并且所述表位与所述靶细胞膜的表面之间的距离小于约(b)所述间隔物的长度为约125个氨基酸至约100个氨基酸；并且所述表位与所述靶细胞膜的表面之间的距离小于约(c)所述间隔物的长度为约100个氨基酸至约75个氨基酸；并且所述表位与所述靶细胞膜的表面之间的距离小于约(d)所述间隔物的长度为约75个氨基酸至约36个氨基酸；并且所述表位与所述靶细胞膜的表面之间的距离小于约(e)所述间隔物的长度为约35个氨基酸至约21个氨基酸；并且所述表位与所述靶细胞膜的表面之间的距离为约至约(f)所述间隔物的长度为约20个氨基酸至约16个氨基酸；并且所述表位与所述靶细胞膜的表面之间的距离为约至约(g)所述间隔物的长度为约15个氨基酸至约11个氨基酸；并且所述表位与所述靶细胞膜的表面之间的距离为约至约或(h)所述间隔物的长度为约10个氨基酸至约5个氨基酸；并且所述表位与所述靶细胞膜的表面之间的距离大于约2.一种编码CAR的多核苷酸，所述CAR包含(i)抗原结合结构域，其与靶细胞上表达的肿瘤抗原上的表位结合；(ii)跨膜结构域；(iii)细胞内结构域；和，(iv)CAR间隔物，其位于所述抗原结合结构域和所述跨膜结构域之间，包含来源于人免疫球蛋白铰链和/或恒定区的氨基酸序列或其功能片段，其中(a)所述间隔物的长度为约至约并且所述表位与所述靶细胞膜的表面之间的距离小于约(b)所述间隔物的长度为约至约并且所述表位与所述靶细胞膜的表面之间的距离小于约(c)所述间隔物的长度为约至约并且所述表位与所述靶细胞膜的表面
之间的距离小于约(d)所述间隔物的长度为约至约并且所述表位与所述靶细胞膜的表面之间的距离小于约(e)所述间隔物的长度为约至约并且所述表位与所述靶细胞膜的表面之间的距离为约至约(f)所述间隔物的长度为约至约并且所述表位与所述靶细胞膜的表面之间的距离为约至约(g)所述间隔物的长度为约至约并且所述表位与所述靶细胞膜的表面之间的距离为约至约或(h)所述间隔物的长度为约至约并且所述表位与所述靶细胞膜的表面之间的距离大于约3.如权利要求1所述的多核苷酸，其中(a)所述表位和所述靶细胞膜的表面之间的距离小于约并且所述间隔物的长度为125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149或150个氨基酸；(b)所述表位和所述靶细胞膜的表面之间的距离小于约并且所述间隔物的长度为100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124或125个氨基酸；(c)所述表位和所述靶细胞膜的表面之间的距离小于约并且所述间隔物的长度为75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99或100个氨基酸；(d)所述表位和所述靶细胞膜的表面之间的距离小于约并且所述间隔物的长度为36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74或75个氨基酸；(e)所述表位和所述靶细胞膜的表面之间的距离为约至约并且所述间隔物的长度为21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34或35个氨基酸；(f)所述表位和所述靶细胞膜的表面之间的距离为约至约并且所述间隔物的长度为16、17、18、19或20个氨基酸；(g)所述表位和所述靶细胞膜的表面之间的距离为约至约并且所述间隔物的长度为11、12、13、14或15个氨基酸；或(h)所述表位和所述靶细胞膜的表面之间的距离大于约并且所述间隔物的长度为5、6、7、8、9或10个氨基酸。4.如权利要求2所述的多核苷酸，其中
(a)所述表位和所述靶细胞膜的表面之间的距离小于约并且所述间隔物的长度为约约约约约约约约或约(b)所述表位和所述靶细胞膜的表面之间的距离小于约并且所述间隔物的长度为约约约约约约约约或约(c)所述表位和所述靶细胞膜的表面之间的距离小于约并且所述间隔物的长度为约约约约约约约约或约(d)所述表位和所述靶细胞膜的表面之间的距离小于约并且所述间隔物的长度为约约约约约约约约约约约约约约或约(e)所述表位和所述靶细胞膜的表面之间的距离为约至约并且所述间隔物的长度为约约约约约约约约或约(f)所述表位和所述靶细胞膜的表面之间的距离为约至约并且所述间隔物的长度为约约约和约(g)所述表位和所述靶细胞膜的表面之间的距离为约至约并且所述间隔物的长度为约约约或约或(h)所述表位和所述靶细胞膜的表面之间的距离大于约并且所述间隔物的长度为约约约或约5.一种编码CAR的多核苷酸，所述CAR包含(i)抗原结合结构域，其与靶细胞上表达的肿瘤抗原上的表位结合；(ii)跨膜结构域；(iii)细胞内结构域；和，(iv)CAR间隔物，其位于所述抗原结合结构域和所述跨膜结构域之间，包含来源于人免疫球蛋白铰链和/或恒定区的氨基酸序列或其功能片段，其中所述间隔物包含下式的氨基酸序列C
N
‑
(X1PRX2P)
m
‑
[L
‑
(X1PRX2P)]
n
‑
C
C
其中(i)所述间隔物位于所述CAR的所述配体结合结构域和所述跨膜结构域之间；(ii)所述间隔物的长度为至少15个氨基酸；(iii)m为选自0或1的整数；(iv)n是1至20的整数；(v)L是接头多肽序列；(vi)C
N
是任选的N末端加帽序列；(vii)C
C
是任选的C末端加帽序列；以及(viii)X1和X2独立地选自半胱氨酸、甘氨酸、丙氨酸或丝氨酸。
6.如权利要求5所述的多核苷酸，其中所述间隔物包含两个、三个、四个、五个或六个X1PRX2P基序。7.如权利要求5所述的多核苷酸，其中X1PRX2P包含至少一个半胱氨酸。8.如权利要求6所述的多核苷酸，其中X1PRX2P是SEQ IDNO:4749(CPRCP)。9.如权利要求5所述的多核苷酸，其中所述L包含SEQ IDNO:4223的多肽或其片段或变体。10.如权利要求5所述的多核苷酸，其中当n>1时，所有L是相同的。11.如权利要求5所述的多核苷酸，其中当n>1时，至少一个L与其他L不同。12.如权利要求5所述的多核苷酸，其中所述C
N
包含SEQ ID NO:4088的多肽或其片段或变体。13.如权利要求5所述的多核苷酸，其中所述C
C
包含SEQ ID NO:4533的多肽或其片段或变体。14.如权利要求11所述的多核苷酸，其中所述CAR间隔物包含下式的序列(CPRCP)
o
(EPKSCDTPPPCPRCP)
p
，其中o是0或1的整数，并且p是1、2或3的整数，其中CPRCP是SEQ ID NO:4740中列出的序列，并且EPKSCDTPPPCPRCP是SEQ ID NO:4477中列出的序列。15.如权利要求14所述的多核苷酸，其中所述CAR间隔物包含与选自由SEQ ID NO:2813、2903、2983、3358、3728和4477组成的组的序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％序列同一性的氨基酸序列。16.如权利要求15所述的多核苷酸，其中所述CAR间隔物包含C
C
加帽序列，所述C
C
加帽序列包含SEQ ID NO:4533的多肽的子序列或其片段或变体。17.如权利要求16所述的多核苷酸，其中SEQ ID NO:5的多肽的所述子序列是所述N末端AP。18.如权利要求17所述的多核苷酸，其中所述CAR间隔物包含与选自由SEQ ID NO:4833、4834、4835、4836、4837和4838组成的组的序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％序列同一性的氨基酸序列。19.如权利要求15至18中任一项所述的多核苷酸，其中所述CAR间隔物包含C
N
加帽序列，所述C
N
加帽序列包含SEQ ID NO:4088的多肽的子序列或其片段或变体。20.如权利要求19所述的多核苷酸，其中所述CAR间隔物包含与SEQ ID NO:4833的氨基酸序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％序列同一性的氨基酸序列。21.一种编码CAR的多核苷酸，所述CAR包含(i)抗原结合结构域，其与靶细胞上表达的肿瘤抗原上的表位结合；(ii)跨膜结构域；(iii)细胞内结构域；和，(iv)CAR间隔物，其位于所述抗原结合结构域和所述跨膜结构域之间，包含来源于人免疫球蛋白铰链区的氨基酸序列或其功能片段，
其中所述间隔物包含SEQ ID NO:4841的氨基酸序列。22.一种编码CAR的多核苷酸，所述CAR包含(i)抗原结合结构域，其与靶细胞上表达的肿瘤抗原上的表位结合；(ii)跨膜结构域；(iii)细胞内结构域；和，(iv)CAR间隔物，其位于所述抗原结合结构域和所述跨膜结构域之间，包含来源于人免疫球蛋白铰链区的氨基酸序列或其功能片段，其中所述间隔物包含与SEQ ID NO:4839具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％序列同一性的氨基酸序列。23.一种编码CAR的多核苷酸，所述CAR包含(i)抗原结合结构域，其与靶细胞上表达的肿瘤抗原上的表位结合；(ii)跨膜结构域；(iii)细胞内结构域；和，(iv)CAR间隔物，其位于所述抗原结合结构域和所述跨膜结构域之间，包含来源于人免疫球蛋白铰链区的氨基酸序列或其功能片段，其中所述间隔物包含下式的氨基酸序列(EX3KX4X5X6X7DTX8X9X
10
TCPRCP)q SEQ ID NO:4812其中q是1和10之间的整数，并且其中：X3为L或P；X4为T或S；X5为P或C；X6为L或不存在；X7为G或不存在；X8为T或P；X9为H或P；并且X
10
为T或P。24.一种编码CAR的多核苷酸，所述CAR包含(i)抗原结合结构域，其与靶细胞上表达的肿瘤抗原上的表位结合；(ii)跨膜结构域；(iii)细胞内结构域；和，(iv)CAR间隔物，其位于所述抗原结合结构域和所述跨膜结构域之间，包含来源于人免疫球蛋白铰链区的氨基酸序列或其功能片段，其中所述间隔物包含SEQ ID NO:4466的至少一个氨基酸序列A和/或SEQ ID NO:4477的至少一个氨基酸序列B，其中所述CAR间隔物的所述氨基酸序列对应于式A、B、AB、ABB、ABBB、ABBBB、ABBBBB、AA、AAA、AAAA、AAAAA、BB、BBB、BBBB或BBBBB。25.一种编码CAR的多核苷酸，所述CAR包含(i)抗原结合结构域，其与靶细胞上表达的肿瘤抗原上的表位结合；(ii)跨膜结构域；(iii)细胞内结构域；和，(iv)CAR间隔物，其位于所述抗原结合结构域和所述跨膜结构域之间，包含来源于人免疫球蛋白铰链和/或恒定区的氨基酸序列或其功能片段，其中所述间隔物包含选自表11中的序列的氨基酸序列或与表11中的序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％序列同一性的氨基酸序列。26.如权利要求5至25中任一项所述的多核苷酸，其中所述间隔物还包含：包含1、2、3、4
或5个IgG3 CH1 C末端结构域氨基酸的N末端子序列和/或包含1、2、3、4或5个IgG3 CH2 N末端结构域氨基酸的C末端子序列。27.如权利要求26所述的多核苷酸，其中所述包含1、2、3、4或5个IgG3 CH1 C末端结构域氨基酸的N末端子序列和/或所述包含1、2、3、4或5个IgG3 CH2 N末端结构域氨基酸的C末端子序列包含选自表12中的序列的氨基酸序列。28.一种编码CAR的多核苷酸，所述CAR包含(i)抗原结合结构域，其与靶细胞上表达的肿瘤抗原上的表位结合；(ii)跨膜结构域；(iii)细胞内结构域；和，(iv)CAR间隔物，其位于所述抗原结合结构域和所述跨膜结构域之间，包含来源于人免疫球蛋白铰链和/或恒定区的氨基酸序列或其功能片段，其中所述间隔物包含有包含SEQ ID NO:1的至少五个、六个或七个连续氨基酸的氨基酸序列。29.如权利要求28所述的多核苷酸，其中所述间隔物包含与选自由SEQ ID NO:2015、1889、1768和4852及其任何组合组成的组的序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％序列同一性的氨基酸序列。30.一种编码CAR的多核苷酸，所述CAR包含(i)抗原结合结构域，其与靶细胞上表达的肿瘤抗原上的表位结合；(ii)跨膜结构域；(iii)细胞内结构域；和，(iv)CAR间隔物，其位于所述抗原结合结构域和所述跨膜结构域之间，包含来源于人免疫球蛋白铰链和/或恒定区的氨基酸序列或其功能片段，其中所述间隔物包含选自表1中的序列的氨基酸序列或与表1中的序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％序列同一性的氨基酸序列。31.如权利要求28至30中任一项所述的多核苷酸，其中所述CAR间隔物还包含(i)包含1、2、3、4或5个IgD CH1 C末端结构域氨基酸的N末端子序列和/或(ii)包含1、2、3、4或5个IgD CH2 N末端结构域氨基酸的C末端子序列。32.如权利要求31所述的多核苷酸，其中所述IgD CH1和CH2序列C末端结构域氨基酸和/或IgD CH1和CH2序列N末端结构域氨基酸包含选自表2中的序列的氨基酸序列。33.一种编码CAR的多核苷酸，所述CAR包含(i)抗原结合结构域，其与靶细胞上表达的肿瘤抗原上的表位结合；(ii)跨膜结构域；(iii)细胞内结构域；和，(iv)CAR间隔物，其位于所述抗原结合结构域和所述跨膜结构域之间，包含来源于人免疫球蛋白铰链和/或恒定区的氨基酸序列或其功能片段，其中所述间隔物包含有包含SEQ ID NO:2560的至少五个、六个或七个连续氨基酸的氨基酸序列。
34.如权利要求33所述的多核苷酸，其中所述间隔物包含选自表3中的序列的氨基酸序列或与表3中的序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％序列同一性的氨基酸序列。35.如权利要求33所述的多核苷酸，其中所述间隔物包含与选自由SEQ ID NO:4847、4845、4846、2560和4844及其任何组合组成的组的序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％序列同一性的氨基酸序列。36.如权利要求33至35中任一项所述的多核苷酸，其中所述间隔物还包含：包含1、2、3、4或5个IgA1 CH1 C末端结构域氨基酸的N末端子序列和/或包含1、2、3、4或5个IgA1 CH2 N末端结构域氨基酸的C末端子序列。37.如权利要求36所述的多核苷酸，其中所述包含1、2、3、4或5个IgA1 CH1 C末端结构域氨基酸的N末端子序列和/或所述包含1、2、3、4或5个IgA1 CH2 N末端结构域氨基酸的C末端子序列包含选自表4中的序列的氨基酸序列。38.一种编码CAR的多核苷酸，所述CAR包含(i)抗原结合结构域，其与靶细胞上表达的肿瘤抗原上的表位结合；(ii)跨膜结构域；(iii)细胞内结构域；和，(iv)CAR间隔物，其位于所述抗原结合结构域和所述跨膜结构域之间，包含来源于人免疫球蛋白铰链和/或恒定区的氨基酸序列或其功能片段，其中所述间隔物包含有包含SEQ ID NO:4848的至少五个、六个或七个连续氨基酸的氨基酸序列。39.如权利要求38所述的多核苷酸，其中所述间隔物包含与选自由SEQ ID NO:4523、4850、2713、4524和4525及其任何组合组成的组的序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％序列同一性的氨基酸序列。40.如权利要求38或39所述的多核苷酸，其中所述间隔物包含选自表5中的序列的氨基酸序列或与表5中的序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％序列同一性的氨基酸序列。41.如权利要求38至40中任一项所述的多核苷酸，其中所述间隔物还包含：包含1、2、3、4或5个IgA2 CH1 C末端结构域氨基酸的N末端子序列和/或包含1、2、3、4或5个IgA2 CH2 N末端结构域氨基酸的C末端子序列。42.如权利要求41所述的多核苷酸，其中所述包含1、2、3、4或5个IgA2 CH1 C末端结构域氨基酸的N末端子序列和/或所述包含1、2、3、4或5个IgA2 CH2 N末端结构域氨基酸的C末端子序列包含选自表6中的序列的氨基酸序列。43.一种编码CAR的多核苷酸，所述CAR包含(i)抗原结合结构域，其与靶细胞上表达的肿瘤抗原上的表位结合；(ii)跨膜结构域；
(iii)细胞内结构域；和，(iv)CAR间隔物，其位于所述抗原结合结构域和所述跨膜结构域之间，包含来源于人免疫球蛋白铰链和/或恒定区的氨基酸序列或其功能片段，其中所述间隔物包含有包含SEQ ID NO:2723或SEQ ID NO:4843的至少五个、六个或七个连续氨基酸的氨基酸序列。44.如权利要求43所述的多核苷酸，其中所述间隔物包含与选自由SEQ ID NO:4839、4840和4843及其任何组合组成的组的序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％序列同一性的氨基酸序列。45.如权利要求43或44所述的多核苷酸，其中所述间隔物包含选自表7中的序列的氨基酸序列或与表7中的序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％序列同一性的氨基酸序列。46.如权利要求43至45所述的多核苷酸，其中所述间隔物还包含：包含1、2、3、4或5个IgG1 CH1 C末端结构域氨基酸的N末端子序列和/或包含1、2、3、4或5个IgG1 CH2 N末端结构域氨基酸的C末端子序列。47.如权利要求46所述的多核苷酸，其中所述包含1、2、3、4或5个IgG1 CH1 C末端结构域氨基酸的N末端子序列和/或所述包含1、2、3、4或5个IgG1 CH2 N末端结构域氨基酸的C末端子序列包含选自表8中的序列的氨基酸序列。48.一种编码CAR的多核苷酸，所述CAR包含(i)抗原结合结构域，其与靶细胞上表达的肿瘤抗原上的表位结合；(ii)跨膜结构域；(iii)细胞内结构域；和，(iv)CAR间隔物，其位于所述抗原结合结构域和所述跨膜结构域之间，包含来源于人免疫球蛋白铰链和/或恒定区的氨基酸序列或其功能片段，其中所述间隔物包含有包含SEQ ID NO:2768或SEQ ID NO:4842的至少五个、六个或七个连续氨基酸的氨基酸序列。49.如权利要求48所述的多核苷酸，其中所述间隔物包含与SEQ ID NO:4842具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％序列同一性的氨基酸序列。50.如权利要求48或49所述的多核苷酸，其中所述间隔物包含选自表9A中的序列的氨基酸序列或与表9A中的序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％序列同一性的氨基酸序列。51.如权利要求47或48所述的多核苷酸，其中所述间隔物还包含：包含1、2、3、4或5个IgG2 CH1 C末端结构域氨基酸的N末端子序列和/或包含1、2、3、4或5个IgG2 CH2 N末端结构域氨基酸的C末端子序列。52.如权利要求51所述的多核苷酸，其中所述包含1、2、3、4或5个IgG2 CH1 C末端结构域氨基酸的N末端子序列和/或所述包含1、2、3、4或5个IgG2 CH2 N末端结构域氨基酸的C末
端子序列包含选自表10A中的序列的氨基酸序列。53.一种编码CAR的多核苷酸，所述CAR包含(i)抗原结合结构域，其与靶细胞上表达的肿瘤抗原上的表位结合；(ii)跨膜结构域；(iii)细胞内结构域；和，(iv)CAR间隔物，其位于所述抗原结合结构域和所述跨膜结构域之间，包含来源于人免疫球蛋白铰链和/或恒定区的氨基酸序列或其功能片段，其中所述间隔物包含有包含SEQ ID NO:4926的至少五个、六个或七个连续氨基酸的氨基酸序列。54.如权利要求53所述的多核苷酸，其中所述间隔物包含与选自由SEQ ID NO:4830、4831和4832及其任何组合组成的组的序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％序列同一性的氨基酸序列。55.如权利要求53或54所述的多核苷酸，其中所述间隔物包含选自表9B中的序列的氨基酸序列或与表9B中的序列具有至少约70％、至少约75％、至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％序列同一性的氨基酸序列。56.如权利要求53至55所述的多核苷酸，其中所述间隔物还包含：包含1、2、3、4或5个IgG2 CH1 C末端结构域氨基酸的N末端子序列和/或包含1、2、3、4或5个IgG2 CH2 N末端结构域氨基酸的C末端子序列。57.如权利要求56所述的多核苷酸，其中所述包含1、2、3、4或5个IgG2 CH1 C末端结构域氨基酸的N末端子序列和/或所述包含1、2、3、4或5个IgG2 CH2 N末端结构域氨基酸的C末端子序列包含选自表10B中的序列的氨基酸序列。58.一种编码CAR的多核苷酸，所述CAR包含(i)抗原结合结构域，其与靶细胞上表达的肿瘤抗原上的表位结合；(ii)跨膜结构域；(iii)细...

【专利技术属性】
技术研发人员：M，
申请(专利权)人：莱尔免疫制药公司，
类型：发明
国别省市：