用于培养细胞的方法技术

本公开提供了在包含至少约

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于培养细胞的方法
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求
2021
年2月
25
日提交的美国临时申请号
63/153,905、2021
年2月
25
日提交的
63/153,920、2021
年3月
23
日提交的
63/165,021、2021
年3月
23
日提交的
63/165,042、2021
年3月
29
日提交的
63/167,606、2021
年3月
29
日提交的
63/167,608、2021
年4月
28
日提交的
63/181,224、2021
年
10
月
28
日提交的
63/273,141
的优先权和权益；其各自以引用的方式整体并入本文
。


[0003]本公开涉及培养细胞
(
例如，多能细胞
、
多潜能细胞和
/
或免疫细胞
(
例如，
T
细胞和
/
或
NK
细胞
))
的方法
。
在一些方面，本文所公开的方法促进培养物中较低分化的细胞和
/
或未分化的细胞的富集
。
使用本文所公开的方法培养的细胞可用于各种细胞疗法，包括但不限于嵌合抗原受体
(CAR)T
细胞疗法和
TCR T
细胞疗法，包括针对新抗原的
T
细胞疗法
。

技术介绍

[0004]癌症免疫疗法依赖于利用
T
细胞
(
感染和患病细胞的免疫系统的主要杀伤细胞
)
攻击和杀伤肿瘤细胞
。
然而，免疫疗法存在重要的障碍物：
T
细胞的杀伤能力可能减弱，这种现象通常被称为
T
细胞的耗竭或终末分化
。
免疫检查点阻断
、
离体扩增的肿瘤浸润淋巴细胞
(TIL)
疗法
、
嵌合抗原受体
(CAR)T
细胞疗法和
T
细胞受体工程化
(TCR)
的
T
细胞疗法是利用从患者分离的功能活性
T
细胞并且需要高度功能性
T
细胞以便有效的治疗
。
这些
T
细胞被工程化并离体扩增以识别靶癌细胞上的抗原
。T
细胞疗法在治愈实体癌方面并不始终有效，部分是因为
T
细胞随着时间推移会丧失它们增殖或杀伤的能力
。
[0005]克服
T
细胞耗竭的一种方式是选择性地施用具有较低分化状态的
T
细胞
。
例如，
T
记忆干细胞
(T
SCM
)
与较高分化的
T
中央记忆
(T
CM
)
或
T
效应记忆
(T
EM
)
细胞相比在施用后在患者中持续更长的时间段，并且
T
SCM
比较高分化的细胞对肿瘤大小引起更显著和延长的作用
。
然而，许多过继细胞疗法
(ACT)
细胞制剂包含处于各种分化状态的免疫细胞的不明确的混合物，其在根除实体瘤方面是无效的
。
为了治愈，需要具有增强的自我更新干
/
效应子特性的
T
细胞产物
。
因此，本领域仍然需要从分离的
T
细胞混合群体中有效富集较低分化和
/
或初始
T
细胞的方法
。

技术实现思路

[0006]本公开的某些方面涉及离体或体外培养免疫细胞和
/
或干细胞的方法，所述方法包括将免疫细胞和
/
或干细胞置于包含浓度高于
40mM
的钾离子的培养基中，其中培养基不是高渗的
。
本公开的某些方面涉及制备免疫细胞群和
/
或干细胞群的方法，所述方法包括将免疫细胞和
/
或干细胞置于包含浓度高于
40mM
的钾离子的培养基中，其中培养基不是高渗的
。
[0007]在一些方面，培养基还包含一种或多种细胞因子
。
在一些方面，一种或多种细胞因
子包括白介素
‑
2(IL
‑
2)、
白介素
‑
7(IL
‑
7)、
白介素
‑
21(IL
‑
21)、
白介素
‑
15(IL
‑
15)
或它们的任何组合
。
[0008]本公开的某些方面涉及离体或体外增加未分化或较低分化细胞的数量或百分比的方法，所述方法包括在包含浓度高于
40mM
的钾离子的培养基中培养免疫细胞和
/
或干细胞，其中所述培养基包含
IL
‑2，但不包含
IL
‑7和
IL
‑
15。
在一些方面，培养后的免疫细胞和
/
或干细胞与在包含
IL
‑
2、IL
‑7和
IL
‑
15
的培养基中培养的免疫细胞和
/
或干细胞相比包含更高数量和
/
或百分比的未分化或较低分化的免疫细胞和
/
或干细胞
。
[0009]本公开的某些方面涉及离体或体外增加未分化或较低分化的免疫细胞和
/
或干细胞的数量和
/
或百分比的方法，该方法包括将免疫细胞和
/
或干细胞置于包含浓度高于
40mM
的钾离子的培养基中，其中该培养基包含
IL
‑7和
IL
‑
21。
[0010]本公开的某些方面涉及离体或体外增加未分化或较低分化的免疫细胞和
/
或干细胞的数量或百分比的方法，该方法包括将免疫细胞和
/
或干细胞置于包含浓度高于
40mM
的钾离子的培养基中，其中该培养基包含
IL
‑
15
和
IL
‑
21
或其中该培养基包含
IL
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.
一种离体或体外培养免疫细胞和
/
或干细胞的方法，所述方法包括将免疫细胞和
/
或干细胞置于包含浓度高于
40mM
的钾离子的培养基中，其中所述培养基不是高渗的
。2.
一种制备免疫细胞群和
/
或干细胞群的方法，所述方法包括将免疫细胞和
/
或干细胞置于包含浓度高于
40mM
的钾离子的培养基中，其中所述培养基不是高渗的
。3.
如权利要求1或2所述的方法，其中所述培养基还包含一种或多种细胞因子
。4.
如权利要求3所述的方法，其中所述一种或多种细胞因子包括白介素
‑
2(IL
‑
2)、
白介素
21、
白介素
‑
15(IL
‑
15)
或它们的任何组合
。5.
一种离体或体外增加未分化或较低分化细胞的数量或百分比的方法，所述方法包括在包含浓度高于
40mM
的钾离子的培养基中培养免疫细胞和
/
或干细胞，其中所述培养基包含
IL
‑2，但不包含
IL
‑7和
IL
‑
15。6.
如权利要求6所述的方法，其中所述培养后的所述免疫细胞和
/
或干细胞与在包含
IL
‑
2、IL
‑7和
IL
‑
15
的培养基中培养的免疫细胞和
/
或干细胞相比包含更高数量和
/
或百分比的未分化或较低分化的免疫细胞和
/
或干细胞
。7.
一种离体或体外增加未分化或较低分化的免疫细胞和
/
或干细胞的数量和
/
或百分比的方法，所述方法包括将免疫细胞和
/
或干细胞置于包含浓度高于
40mM
的钾离子的培养基中，其中所述培养基包含
IL
‑7和
IL
‑
21。8.
一种离体或体外增加未分化或较低分化的免疫细胞和
/
或干细胞的数量或百分比的方法，所述方法包括将所述免疫细胞和
/
或干细胞置于包含浓度高于
40mM
的钾离子的培养基中，其中所述培养基包含
IL
‑
15
和
IL
‑
21。9.
如权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述细胞包括免疫细胞
。10.
如权利要求8所述的方法，其中所述免疫细胞包括
T
细胞
、TIL、NK
细胞
、TIL、Treg
和或它们的组合
。11.
如权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述细胞包括干细胞
。12.
如权利要求1至
11
中任一项所述的方法，其中所述细胞表达嵌合抗原受体
(CAR)。13.
如权利要求1至
11
中任一项所述的方法，其中所述细胞表达
T
细胞受体
(TCR)。14.
如权利要求1至
13
中任一项所述的方法，其中所述培养基是低渗的
。15.
如权利要求1至
14
中任一项所述的方法，其中所述培养基还包含钠离子
、
钙离子
、
葡萄糖和
/
或它们的任何组合
。16.
如权利要求1至
15
中任一项所述的方法，其中所述培养基还包含细胞扩增剂
。17.
如权利要求
16
所述的方法，其中所述细胞扩增剂包括
GSK3B
抑制剂
、ACLY
抑制剂
、PI3K
抑制剂
、AKT
抑制剂或它们的任何组合
。18.
如权利要求
17
所述的方法，其中所述
PI3K
抑制剂选自
LY294002、
匹替利司
、CAL101、IC87114
或它们的任何组合
。19.
如权利要求
17
所述的方法，其中所述
AKT
抑制剂选自
MK2206、A443654、AKTi
‑
VIII
或它们的任何组合
。20.
如权利要求1至
19
中任一项所述的方法，其中与起始细胞群相比，所述培养基能够在最终细胞产物中：
a.
增加较低分化和
/
或未分化细胞的数量和
/
或百分比；
b.
提高转导效率；
c.
增加干样免疫细胞；
d.
增加体内活力；
e.
增加细胞潜能；
f.
防止细胞耗竭；或
g.
它们的任何组合
。21.
如权利要求1至
20
中任一项所述的方法，其中所述钾离子的浓度为至少约
45mM、
至少约
50mM、
至少约
55mM、
至少约
60mM、
至少约
65mM、
至少约
70mM、
约
75mM、
约
80mM、
约
85mM、
约
90mM、
约
95mM、
或约
100mM。22.
如权利要求1至
21
中任一项所述的方法，其中所述钾离子的浓度为约
45mM
至约
110mM、
约
45mM
至约
100mM、
约
45mM
至约
90mM、
约
45mM
至约
80mM、
约
45mM
至约
70mM、
约
45mM
至约
60mM、
约
45mM
至约
50mM、
约
50mM
至约
110mM、
约
50mM
至约
100mM、
约
50mM
至约
90mM、
约
50mM
至约
80mM、
约
50mM
至约
70mM、
约
60mM
至约
110mM、
约
60mM
至约
100mM、
约
60mM
至约
90mM、
约
60mM
至约
80mM、
约
60mM
至约
70mM、
约
70mM
至约
100mM、
约
70mM
至约
90mM、
约
70mM
至约
80mM、
约
80mM
至约
110mM、
约
80mM
至约
100mM、
约
80mM
至约
90mM、
约
90mM
至约
110mM、
约
90mM
至约
100mM、
或约
100mM
至约
110mM。23.
如权利要求1至
22
中任一项所述的方法，其中所述钾离子的浓度为约
50mM
至约
90mM。24.
如权利要求1至
23
中任一项所述的方法，其中所述钾离子的浓度为约
50mM
至约
80mM。25.
如权利要求1至
24
中任一项所述的方法，其中所述培养基具有低于约
280mOsm/L
的渗透压摩尔浓度
。26.
如权利要求1至
25
中任一项所述的方法，其中所述培养基具有在约
100mOsm/L
至约
280mOsm/L、
约
125mOsm/L
至约
280mOsm/L、
约
150mOsm/L
至约
280mOsm/L、
约
175mOsm/L
至约
280mOsm/L、
约
200mOsm/L
至约
280mOsm/L、
约
210mOsm/L
至约
280mOsm/L、
约
220mOsm/L
至约
280mOsm/L、
约
225mOsm/L
至约
280mOsm/L、
约
230mOsm/L
至约
280mOsm/L、
约
235mOsm/L
至约
280mOsm/L、
约
240mOsm/L
至约
280mOsm/L、
约
245mOsm/L
至约
280mOsm/L、
约
250mOsm/L
至约
280mOsm/L、
约
255mOsm/L
至约
280mOsm/L、
约
260mOsm/L
至约
280mOsm/L、
约
265mOsm/L
至约
280mOsm/L、
约
270mOsm/L
至约
280mOsm/L、
或约
275mOsm/L
至约
280mOsm/L
之间的渗透压摩尔浓度
。27.
如权利要求1至
26
中任一项所述的方法，其中所述培养基具有约
100mOsm/L
至约
280mOsm/L、
约
125mOsm/L、
约
150mOsm/L、
约
175mOsm/L、
约
200mOsm/L、
约
210mOsm/L、
约
220mOsm/L、
约
225mOsm/L、
约
230mOsm/L、
约
235mOsm/L、
约
240mOsm/L、
约
245mOsm/L、
约
250mOsm/L、
约
255mOsm/L、
约
260mOsm/L、
约
265mOsm/L、
约
270mOsm/L、
或约
275mOsm/L
的渗透压摩尔浓度
。28.
如权利要求1至
27
中任一项所述的方法，其中所述培养基具有约
250
的渗透压摩尔浓度
。29.
如权利要求1至
28
中任一项所述的方法，其中所述培养基具有约
255
的渗透压摩尔浓度
。30.
如权利要求1至
29
中任一项所述的方法，其中所述培养基具有约
260
的渗透压摩尔
浓度
。31.
如权利要求1至
24
中任一项所述的方法，其中所述培养基是等渗的
。32.
如权利要求
31
所述的方法，其中所述培养基具有约
280mOsm/L
至约
285mOsm/L、
约
280mOsm/L
至约
290mOsm/L、
约
280mOsm/L
至约
295mOsm/L、
约
280mOsm/L
至约
300mOsm/L、
约
280mOsm/L
至约
305mOsm/L、
约
280mOsm/L
至约
310mOsm/L、
约
280mOsm/L
至约
315mOsm/L、
或约
280mOsm/L
至小于
320mOsm/L
的渗透压摩尔浓度
。33.
如权利要求
31
或
32
所述的方法，其中所述培养基具有约
285mOsm/L、
约
290mOsm/L、
约
295mOsm/L、
约
300mOsm/L、
约
305mOsm/L、
约
310mOsm/L
或约
315mOsm/L
的渗透压摩尔浓度
。34.
如权利要求1至
33
中任一项所述的方法，其中所述培养基还包含钠离子
。35.
如权利要求
34
所述的方法，其中所述钠离子的浓度为从约
25mM
至约
100mM。36.
如权利要求
34
或
35
所述的方法，其中所述钠离子的浓度为从约
30mM
至约
40mM、
约
30mM
至约
50mM、
约
30mM
至约
60mM、
约
30mM
至约
70mM、
约
30mM
至约
80mM、
约
40mM
至约
50mM、
约
40mM
至约
60mM、
约
40mM
至约
70mM、
约
40mM
至约
80mM、
约
50mM
至约
55mM、
约
50mM
至约
60mM、
约
50mM
至约
65mM、
约
50mM
至约
70mM、
约
50mM
至约
75mM、
约
50mM
至约
80mM、
约
55mM
至约
60mM、
约
55mM
至约
65mM、
约
55mM
至约
70mM、
约
55mM
至约
75mM、
约
55mM
至约
80mM、
约
60mM
至约
65mM、
约
60mM
至约
70mM、
约
60mM
至约
75mM、
约
60mM
至约
80mM、
约
70mM
至约
75mM、
约
70mM
至约
80mM、
或约
75mM
至约
80mM。37.
如权利要求
34
至
36
中任一项所述的方法，其中所述钠离子的浓度为约
30mM、
约
35mM、
约
40mM、
约
45mM、
约
50mM、
约
55mM、
约
60mM、
约
65mM、
约
70mM、
约
75mM、
或约
80mM。38.
如权利要求
34
至
37
中任一项所述的方法，其中所述钠离子的浓度为约
55mM。39.
如权利要求
34
至
38
中任一项所述的方法，其中所述钠离子的浓度为约
60mM。40.
如权利要求
34
至
39
中任一项所述的方法，其中所述钠离子的浓度为约
65mM。41.
如权利要求1至
40
中任一项所述的方法，其中所述培养基还包含葡萄糖
。42.
如权利要求
41
所述的方法，其中所述葡萄糖的浓度大于约
10mM。43.
如权利要求
41
或
42
所述的方法，其中所述葡萄糖的浓度为从约
10mM
至约
25mM、
约
10mM
至约
20mM、
约
15mM
至约
25mM、
约
15mM
至约
20mM、
约
15mM
至约
19mM、
约
15mM
至约
18mM、
约
15mM
至约
17mM、
约
15mM
至约
16mM、
约
16mM
至约
20mM、
约
16mM
至约
19mM、
约
16mM
至约
18mM、
约
16mM
至约
17mM、
约
17mM
至约
20mM、
约
17mM
至约
19mM、
或约
17mM
至约
18mM。44.
如权利要求
41
至
43
中任一项所述的方法，其中所述葡萄糖的浓度为约
10mM、
约
11mM、
约
12mM、
约
13mM、
约
14mM、
约
15mM、
约
16mM、
约
17mM、
约
18mM、
约
19mM、
约
20mM、
约
21mM、
约
22mM、
约
23mM、
约
24mM、
或约
25mM。45.
如权利要求
41
至
44
中任一项所述的方法，其中所述葡萄糖的浓度为约
15.4mM、
约
15.9mM、
约
16.3mM、
约
16.8mM、
约
17.2mM、
或约
17.7mM。46.
如权利要求1至
45
中任一项所述的方法，其中所述培养基还包含钙离子
。47.
如权利要求
46
所述的方法，其中所述钙离子的浓度大于约
0.4mM。48.
如权利要求
46
或
47
所述的方法，其中所述钙离子的浓度为从约
0.4mM
至约
2.5mM、
约
0.5mM
至约
2.0mM、
约
1.0mM
至约
2.0mM、
约
1.1mM
至约
2.0mM、
约
1.2mM
至约
2.0mM、
约
1.3mM
至约
2.0mM、
约
1.4mM
至约
2.0mM、
约
1.5mM
至约
2.0mM、
约
1.6mM
至约
2.0mM、
约
1.7mM
至约
2.0mM、
约
1.8mM
至约
2.0mM、
约
1.2
至约
1.3mM、
约
1.2
至约
1.4mM、
约
1.2
至约
1.5mM、
约
1.2
至约
1.6mM、
约
1.2
至约
1.7mM、
约
1.2
至约
1.8mM、
约
1.3
至约
1.4mM、
约
1.3
至约
1.5mM、
约
1.3
至约
1.6mM、
约
1.3
至约
1.7mM、
约
1.3
至约
1.8mM、
约
1.4
至约
1.5mM、
约
1.4
至约
1.6mM、
约
1.4
至约
1.7mM、
约
1.4
至约
1.8mM、
约
1.5
至约
1.6mM、
约
1.5
至约
1.7mM、
约
1.5
至约
1.8mM、
约
1.6
至约
1.7mM、
约
1.6
至约
1.8mM、
或约
1.7
至约
1.8mM。49.
如权利要求
46
至
48
中任一项所述的方法，其中所述钙离子的浓度为约
1.0mM、
约
1.1mM、
约
1.2mM、
约
1.3mM、
约
1.4mM、
约
1.5mM、
约
1.6mM、
约
1.7mM、
约
1.8mM、
约
1.9mM、
或约
2.0mM。50.
如权利要求1至
49
中任一项所述的方法，其中所述培养基包含约
50mM
钾离子和
(i)
约
80.5mM
钠离子；
(ii)
约
17.7mM
葡萄糖；
(iii)
约
1.8mM
钙离子；或
(iv)(i)
‑
(iii)
的任何组合
。51.
如权利要求
50
所述的方法，其中所述培养基具有约
254.7mOsmol
的渗透压摩尔浓度
。52.
如权利要求1至
49
中任一项所述的方法，其中所述培养基包含约
55mM
钾离子和
(i)
约
76mM
钠离子；
(ii)
约
17.2mM
葡萄糖；
(iii)
约
1.7mM
钙离子；或
(iv)(i)
‑
(iii)
的任何组合
。53.
如权利要求
52
所述的方法，其中所述培养基具有约
255.2mOsmol
的渗透压摩尔浓度
。54.
如权利要求1至
49
中任一项所述的方法，其中所述培养基包含约
60mM
钾离子和
(i)
约
72.2mM
钠离子；
(ii)
约
16.8mM
葡萄糖；
(iii)
约
1.6mM
钙离子；或
(iv)(i)
‑
(iii)
的任何组合
。55.
如权利要求
54
所述的方法，其中所述培养基具有约
257.2mOsmol
的渗透压摩尔浓度
。56.
如权利要求1至
49
中任一项所述的方法，其中所述培养基包含约
65mM
钾离子和
(i)
约
67.6mM
钠离子；
(ii)
约
16.3mM
葡萄糖；
(iii)
约
1.5mM
钙离子；或
(iv)(i)
‑
(iii)
的任何组合
。57.
如权利要求
56
所述的方法，其中所述培养基具有约
257.5mOsmol
的渗透压摩尔浓度
。58.
如权利要求1至
49
中任一项所述的方法，其中所述培养基包含约
70mM
钾离子和
(i)
约
63.9mM
钠离子；
(ii)
约
15.9mM
葡萄糖；
(iii)
约
1.4mM
钙离子；或
(iv)(i)
‑
(iii)
的任何组合
。59.
如权利要求
58
所述的方法，其中所述培养基具有约
259.7mOsmol
的渗透压摩尔浓度
。60.
如权利要求1至
49
中任一项所述的方法，其中所述培养基包含约
75mM
钾离子和
(i)
约
59.3mM
钠离子；
(ii)
约
15.4mM
葡萄糖；
(iii)
约
1.3mM
钙离子；或
(iv)(i)
‑
(iii)
的任何组合
。61.
如权利要求
60
所述的方法，其中所述培养基具有约
260mOsmol
的渗透压摩尔浓度
。62.
如权利要求1至
49
中任一项所述的方法，其中所述培养基包含约
80mM
钾离子和
(i)
约
55.6mM
钠离子；
(ii)
约
15mM
葡萄糖；
(iii)
约
1.2mM
钙离子；或
(iv)(i)
‑
(iii)
的任何组合
。63.
如权利要求
62
所述的方法，其中所述培养基具有约
262.26mOsmol
的渗透压摩尔浓度
。64.
如权利要求9至
55
中任一项所述的方法，其中在培养后所述免疫细胞是
CD3+、CD45RO
‑
、CCR7+、CD45RA+、CD62L+CD27+、CD28+、
或
TCF7+
或它们的任何组合
。65.
如权利要求4至6和9至
64
中任一项所述的方法，其中所述
IL
‑2的浓度为从约
0.1ng/mL
至约
20ng/mL、
约
1ng/mL
至约
20ng/mL、
约
1ng/mL
至约
15ng/mL、
约
1ng/mL
至约
14ng/mL、
约
1ng/mL
至约
13ng/mL、
约
1ng/mL
至约
12ng/mL、
约
1ng/mL
至约
11ng/mL、
约
1ng/mL
至约
10ng/mL、
约
1ng/mL
至约
9ng/mL、
约
1ng/mL
至约
8ng/mL、
约
1ng/mL
至约
7ng/mL、
约
1ng/mL
至约
6ng/mL、
约
1ng/mL
至约
5ng/mL、
约
1ng/mL
至约
4ng/mL、
约
1ng/mL
至约
3ng/mL、
约
1ng/mL
至约
2ng/mL、
约
5ng/mL
至约
15ng/mL、
约
5ng/mL
至约
10ng/mL、
约
10ng/mL
至约
20ng/mL、
约
10ng/mL
至约
15ng/mL、
或约
15ng/mL
至约
20ng/mL。66.
如权利要求
65
所述的方法，其中所述
IL
‑2的浓度为约
0.1ng/mL、
约
0.5ng/mL、
约
1ng/mL、
约
2ng/mL、
约
3ng/mL、
约
4ng/mL、
约
5ng/mL、
约
6ng/mL、
约
7ng/mL、
约
8ng/mL、
约
9ng/mL、
约
10ng/mL、
约
11ng/mL、
约
12ng/mL、
约
13ng/mL、
约
14ng/mL、
约
15ng/mL、
约
16ng/mL、
约
17ng/mL、
约
18ng/mL、
约
19ng/mL
或约
20ng/mL。67.
如权利要求
65
或
66
所述的方法，其中所述
IL
‑2的浓度为约
1.0ng/mL。68.
如权利要求
65
或
66
所述的方法，其中所述
IL
‑2的浓度为约
10ng/mL。69.
如权利要求
4、7
和8至
68
中任一项所述的方法，其中所述
IL
‑
21
的浓度为从约
0.1ng/mL
至约
20ng/mL、
约
1ng/mL
至约
20ng/mL、
约
1ng/mL
至约
15ng/mL、
约
1ng/mL
至约
14ng/mL、
约
1ng/mL
至约
13ng/mL、
约
1ng/mL
至约
12ng/mL、
约
1ng/mL
至约
11ng/mL、
约
1ng/mL
至约
10ng/mL、
约
1ng/mL
至约
9ng/mL、
约
1ng/mL
至约
8ng/mL、
约
1ng/mL
至约
7ng/mL、
约
1ng/mL
至约
6ng/mL、
约
1ng/mL
至约
5ng/mL、
约
1ng/mL
至约
4ng/mL、
约
1ng/mL
至约
3ng/mL、
约
1ng/mL
至约
2ng/mL、
约
5ng/mL
至约
15ng/mL、
约
5ng/mL
至约
10ng/mL、
约
10ng/mL
至约
20ng/mL、
约
10ng/mL
至约
15ng/mL、
或约
15ng/mL
至约
20ng/mL。70.
如权利要求
69
所述的方法，其中所述
IL
‑
21
的浓度为约
0.1ng/mL、
约
0.5ng/mL、
约
1ng/mL、
约
2ng/mL、
约
3ng/mL、
约
4ng/mL、
约
5ng/mL、
约
6ng/mL、
约
7ng/mL、
约
8ng/mL、
约
9ng/mL、
约
10ng/mL、
约
11ng/mL、
约
12ng/mL、
约
13ng/mL、
约
14ng/mL、
约
15ng/mL、
约
16ng/mL、
约
17ng/mL、
约
18ng/mL、
约
19ng/mL
或约
20ng/mL。71.
如权利要求
69
或
70
所述的方法，其中所述
IL
‑
21
的浓度为约
1.0ng/mL。72.
如权利要求
69
或
70
所述的方法，其中所述
IL
‑
21
的浓度为约
10ng/mL。73.
如权利要求5至7和9至
72
中任一项所述的方法，其中所述
IL
‑7的浓度为从约
0.1ng/mL
至约
20ng/mL、
约
1ng/mL
至约
20ng/mL、
约
1ng/mL
至约
15ng/mL、
约
1ng/mL
至约
14ng/mL、
约
1ng/mL
至约
13ng/mL、
约
1ng/mL
至约
12ng/mL、
约
1ng/mL
至约
11ng/mL、
约
1ng/mL
至约
10ng/mL、
约
1ng/mL
至约
9ng/mL、
约
1ng/mL
至约
8ng/mL、
约
1ng/mL
至约
7ng/mL、
约
1ng/mL
至约
6ng/mL、
约
1ng/mL
至约
5ng/mL、
约
1ng/mL
至约
4ng/mL、
约
1ng/mL
至约
3ng/mL、
约
1ng/mL
至约
2ng/mL、
约
5ng/mL
至约
15ng/mL、
约
5ng/mL
至约
10ng/mL、
约
10ng/mL
至约
20ng/mL、
约
10ng/mL
至约
15ng/mL、
或约
15ng/mL
至约
20ng/mL。74.
如权利要求
73
所述的方法，其中所述
IL
‑7的浓度为约
0.1ng/mL、
约
0.5ng/mL、
约
1ng/mL、
约
2ng/mL、
约
3ng/mL、
约
4ng/mL、
约
5ng/mL、
约
6ng/mL、
约
7ng/mL、
约
8ng/mL、
约
9ng/mL、
约
10ng/mL、
约
11ng/mL、
约
12ng/mL、
约
13ng/mL、
约
14ng/mL、
约
15ng/mL、
约
16ng/mL、
约
17ng/mL、
约
18ng/mL、
约
19ng/mL
或约
20ng/mL。75.
如权利要求
73
或
74
所述的方法，其中所述
IL
‑7的浓度为约
1.0ng/mL。76.
如权利要求
73
或
74
所述的方法，其中所述
IL
‑7的浓度为约
10ng/mL。77.
如权利要求4‑6和8至
76
中任一项所述的方法，其中所述
IL
‑
15
的浓度为从约
0.1ng/mL
至约
20ng/mL、
约
1ng/mL
至约
20ng/mL、
约
1ng/mL
至约
15ng/mL、
约
1ng/mL
至约
14ng/mL、
约
1ng/mL
至约
13ng/mL、
约
1ng/mL
至约
12ng/mL、
约
1ng/mL
至约
11ng/mL、
约
1ng/mL
至约
10ng/mL、
约
1ng/mL
至约
9ng/mL、
约
1ng/mL
至约
8ng/mL、
约
1ng/mL
至约
7ng/mL、
约
1ng/mL
至约
6ng/mL、
约
1ng/mL
至约
5ng/mL、
约
1ng/mL
至约
4ng/mL、
约
1ng/mL
至约
3ng/mL、
约
1ng/mL
至约
2ng/mL、
约
5ng/mL
至约
15ng/mL、
约
5ng/mL
至约
10ng/mL、
约
10ng/mL
至约
20ng/mL、
约
10ng/mL
至约
15ng/mL、
或约
15ng/mL
至约
20ng/mL。78.
如权利要求
77
所述的方法，其中所述
IL
‑
15
的浓度为约
0.1ng/mL、
约
0.5ng/mL、
约
1ng/mL、
约
2ng/mL、

【专利技术属性】
技术研发人员：S，
申请(专利权)人：莱尔免疫制药公司，
类型：发明
国别省市：