乙型冠状病毒的预防和治疗制造技术

公开了一种包含免疫学有效量的多核苷酸的疫苗，所述多核苷酸包含编码靶向单元、二聚化单元和抗原单元的核苷酸序列，其中所述抗原单元包含至少一个乙型冠状病毒表位。因为所述抗原靶向抗原呈递细胞并且所述抗原在体内产生，该疫苗能够以较低/较少的剂量诱导快速而强烈的免疫应答，是大流行病和流行病的理想选择。择。择。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】乙型冠状病毒的预防和治疗


[0001]本专利技术涉及针对乙型冠状病毒(betacoronavirus)的治疗性和预防性疫苗，例如针对冠状病毒病2019(COVID
‑
19)的疫苗。
[0002]专利技术概述
[0003]本专利技术涉及包含疫苗体(vaccibody)构建体的疫苗，因为抗原靶向抗原呈递细胞并且抗原优选地在体内产生，该疫苗体构建体与常规疫苗相比可以以较低/较少的剂量诱导快速而强烈的免疫应答，是对抗大流行病(pandemics)和流行病(epidemics)的理想选择。该疫苗体构建体经设计通过以下而诱导抗原效应：刺突蛋白的全长或部分；或所选择的T细胞表位，例如在不同乙型冠状病毒(如SARS
‑
CoV和SARS
‑
CoV2)之间保守的那些；或通过它们的组合。
[0004]通过用例如抗泛HLA II类(anti
‑
pan HLA class II)或MIP
‑
1α在体内靶向这些抗原表位，会通过B细胞和/或T细胞引发免疫应答，从而使疫苗可用于预防性情形和治疗性情形。
附图说明
[0005]图1：
[0006]SARS
‑
CoV
‑
2的全长刺突蛋白(SEQ ID NO:230)
[0007]图2：
[0008]A:SARS
‑
CoV
‑
2的刺突蛋白RBD的示例性序列(SEQ ID NO:231)
[0009]B：实施例的VB10.COV2构建体中使用的SARS
‑
CoV
‑
2武汉株的刺突蛋白的RBD序列(SEQ ID NO：802)
[0010]C：实施例的VB10.COV2构建体中使用的SARS
‑
CoV
‑
2南非变种B.1.351的刺突蛋白的RBD序列((SEQ ID NO：803)
[0011]D：实施例的VB10.COV2构建体中使用的SARS
‑
CoV
‑
2英国变种B.1.1.7的刺突蛋白的RBD序列(SEQ ID NO：804)
[0012]实施例的VB10.COV2构建体中使用的SARS
‑
CoV
‑
2加利福尼亚变种B.1.427的刺突蛋白的RBD序列((SEQ ID NO：805)
[0013]图3：
[0014]SARS
‑
CoV
‑
2和SARS
‑
CoV的刺突蛋白的HR2结构域(SEQ ID NO:232)
[0015]图4：
[0016]hMIP1α的信号肽和成熟肽(LD78b)、来自IgG3的人铰链区1、来自IgG3的人铰链区4、甘氨酸
‑
丝氨酸接头、人IgG3的CH3结构域和甘氨酸
‑
亮氨酸接头的氨基酸序列(SEQ ID NO:233)。
[0017]该序列由“|”分开以帮助区分该序列的各个部分
[0018]图5：
[0019]C
‑
C基序趋化因子3样1前体，包括信号肽(氨基酸1
‑
23)和成熟肽(hMIP1α/LD78β，
氨基酸24
‑
93)(SEQ ID NO：234)
[0020]图6：
[0021]信号肽(SEQ ID NO:235)
[0022]图7：
[0023]信号肽(SEQ ID NO:236)
[0024]图8：
[0025]VB2040的抗原单元的氨基酸序列(SEQ ID NO:237)
[0026]图9：
[0027]VB2041的抗原单元的氨基酸序列(SEQ ID NO:238)
[0028]图10：
[0029]VB2042的抗原单元的氨基酸序列(SEQ ID NO:239)
[0030]图11：
[0031]VB2043的抗原单元的氨基酸序列(SEQ ID NO:240)
[0032]图12：
[0033]VB2044的抗原单元的氨基酸序列(SEQ ID NO:241)
[0034]图13：
[0035]VB2045的抗原单元的氨基酸序列(SEQ ID NO:242)
[0036]图14：
[0037]VB2046的抗原单元的氨基酸序列(SEQ ID NO:243)
[0038]图15：
[0039]VB2047的抗原单元的氨基酸序列(SEQ ID NO:244)
[0040]图16：
[0041]VB2048的抗原单元的氨基酸序列(SEQ ID NO:245)。
[0042]图17：
[0043]VB2049的抗原单元的氨基酸序列(SEQ ID NO:246)
[0044]图18：
[0045]VB2050的抗原单元的氨基酸序列(SEQ ID NO:247)
[0046]图19：
[0047]VB2051的抗原单元的氨基酸序列(SEQ ID NO:248)
[0048]图20：
[0049]SARS
‑
CoV
‑
2和SARS
‑
CoV的刺突蛋白的可选的HR2结构域(SEQ ID NO:249)
[0050]图21：
[0051]VB2053的抗原单元的氨基酸序列(SEQ ID NO:250)
[0052]图22：
[0053]VB2054的抗原单元的氨基酸序列(SEQ ID NO:251)
[0054]图23：
[0055]A.VB2049的核苷酸序列(SEQ ID NO:252)
[0056]B.VB2049的氨基酸序列(SEQ ID NO:253)
[0057]该核苷酸序列编码VB2049蛋白，以及其靶向单元hMIP
‑
1α，包含h1和h4和hIgG3的
CH3结构域的二聚化单元，和短RBD结构域。
[0058]图24：
[0059]A.VB2060的核苷酸序列(SEQ ID NO:254)
[0060]B.VB2060的氨基酸序列(SEQ ID NO:255)
[0061]该核苷酸序列编码VB2060蛋白，以及其靶向单元hMIP
‑
1α，包含h1和h4和hIgG3的CH3结构域的二聚化单元，和长RBD结构域。
[0062]图25：
[0063]A.VB2065的核苷酸序列(SEQ ID NO:256)
[0064]B.VB2065的氨基酸序列(SEQ ID NO:257)
[0065]大写的核苷酸序列编码VB2065蛋白，以及其靶向单元hMIP
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种疫苗，其包含免疫学有效量的以下物质和药学上可接受的载体：(i)多核苷酸，其包含编码靶向单元、二聚化单元和抗原单元的核苷酸序列，其中所述抗原单元包含至少一个乙型冠状病毒表位；或(ii)由(i)中定义的多核苷酸编码的多肽，或(iii)由(i)中定义的多核苷酸编码的两个多肽组成的二聚体蛋白。2.根据权利要求1所述的疫苗，其中所述至少一个乙型冠状病毒表位是乙型冠状病毒的全长病毒表面蛋白或其部分。3.根据权利要求2所述的疫苗，其中所述病毒表面蛋白选自包膜蛋白、刺突蛋白、膜蛋白和血凝素酯酶。4.根据权利要求2至3中任一项所述的疫苗，其中所述至少一个乙型冠状病毒表位包含刺突蛋白或是刺突蛋白。5.根据权利要求2至4中任一项所述的疫苗，其中所述至少一个乙型冠状病毒表位包含全长刺突蛋白或是全长刺突蛋白。6.根据权利要求5所述的疫苗，其中所述至少一个乙型冠状病毒表位包含与SEQ ID NO：275的243至1437的氨基酸序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列或由其组成，例如至少75％，例如至少77％，例如至少80％，例如至少85％，例如至少90％，例如至少91％，例如至少92％，例如至少93％，例如至少94％，例如至少95％，例如至少96％，例如至少97％，例如至少98％或例如至少99％序列同一性或例如100％序列同一性。7.根据权利要求2至4中任一项所述的疫苗，其中所述至少一个乙型冠状病毒表位包含刺突蛋白的一部分或是刺突蛋白的一部分。8.根据权利要求7所述的疫苗，其中所述刺突蛋白的一部分是选自受体结合域(RBD)、七肽重复1(HR1)结构域和七肽重复2(HR2)结构域中的一种。9.根据权利要求8所述的疫苗，其中所述至少一个乙型冠状病毒表位包含RBD或RBD的一部分，或者是RBD或RBD的一部分。10.根据权利要求9所述的疫苗，其中所述至少一个乙型冠状病毒表位包含与SEQ ID NO:231或SEQ ID NO:802或SEQ ID NO:803或SEQ ID NO:804或SEQ ID NO:805的氨基酸序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列或由其组成，例如至少75％，例如至少77％，例如至少80％，例如至少85％，例如至少90％，例如至少91％，例如至少92％，例如至少93％，例如至少94％，例如至少95％，例如至少96％，例如至少97％，例如至少98％或例如至少99％序列同一性或例如100％序列同一性。11.根据权利要求9所述的疫苗，其中所述至少一个乙型冠状病毒表位包含与SEQ ID NO：255的243至465的氨基酸序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列或由其组成，例如至少75％，例如至少77％，例如至少80％，例如至少85％，例如至少90％，例如至少91％，例如至少92％，例如至少93％，例如至少94％，例如至少95％，例如至少96％，例如至少97％，例如至少98％或例如至少99％序列同一性或例如100％序列同一性。12.根据权利要求9所述的疫苗，其中所述至少一个乙型冠状病毒表位包含与SEQ ID NO:246的氨基酸序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列或由其组成，例如至少75％，例如至少77％，例如至少80％，例如至少85％，例如至少90％，例如至少91％，例如至少92％，例如至少93％，例如至少94％，例如至少95％，例如至少96％，例如至少97％，例如至
少98％或例如至少99％序列同一性或例如100％序列同一性。13.根据权利要求9至12中任一项所述的疫苗，其中所述抗原单元包含RBD或其部分的多个拷贝，这些拷贝的氨基酸序列相同或不同。14.根据权利要求2至13中任一项所述的疫苗，其中所述至少一个乙型冠状病毒表位是包含在所述病毒表面蛋白或其部分中的B细胞表位。15.根据权利要求2至14中任一项所述的疫苗，其中所述抗原单元包含在所述病毒表面蛋白或其部分中包含的多个B细胞表位。16.根据权利要求1所述的疫苗，其中所述至少一个乙型冠状病毒表位是T细胞表位。17.根据权利要求16所述的疫苗，其中所述抗原单元包含多个T细胞表位。18.根据权利要求16至17中任一项所述的疫苗，其中所述T细胞表位在乙型冠状病毒的不同属和/或种和/或毒株之间，优选在SARS
‑
Cov2和SARS
‑
CoV之间是保守的。19.根据权利要求16至18中任一项所述的疫苗，其中所述T细胞表位的长度为7至约200个氨基酸，优选为7至100个氨基酸，或者所述T细胞表位为适合由HLA I/II类等位基因呈递的长度，优选长度为7至30个氨基酸，更优选长度为8至15个氨基酸。20.根据权利要求16至19中任一项所述的疫苗，其中所述T细胞表位已知具有免疫原性或基于预测的与HLA I/II类等位基因结合的能力来选择。21.根据权利要求16至20中任一项所述的疫苗，其中所述T细胞表位选自具有SEQ ID NO：1至SEQ ID NO：444中任一项的氨基酸序列的表位。22.根据权利要求16至20中任一项所述的疫苗，其中所述T细胞表位选自以下列表：RSFIEDLLFNKVTLA、MTYRRLISMMGFKMNYQVNGYPNMF、LMIERFVSLAIDAYP、RAMPNMLRIMASLVL、MVYMPASWVMRIMTW、FLNRFTTTLNDFNLVAM、SSVELKHFFFAQDGNAAI、HFAIGLALYYPSARIVYTACSHAAV、YFIKGLNNLNRGMVL、YLNTLTLAVPYNMRV、AQFAPSASAFFGMSRI、EIVDTVSALVYDNKL、SSGDATTAYANSVFNICQAVTANVNALL、HVISTSHKLVLSVNPYV、MLSDTLKNLSDRVVFVLWAHGFEL、TANPKTPKYKFVRIQPGQTF、ASIKNFKSVLYYQNNVFM、FVNEFYAYLRKHFSMM、RVWTLMNVLTLVYKV、FAYANRNRFLYIIKL和LVKPSFYVYSRVKNL。23.根据权利要求16至20中任一项所述的疫苗，其中所述T细胞表位选自以下列表：RAMPNMLRIMASLVL、HVISTSHKLVLSVNPYV和LVKPSFYVYSRVKNL。24.根据权利要求16至23中任一项所述的疫苗，其中所述抗原单元进一步包含至少一个乙型冠状病毒表位，所述表位是乙型冠状病毒的全长病毒表面蛋白或其部分。25.根据权利要求24所述的疫苗，其中所述病毒表面蛋白选自包膜蛋白、刺突蛋白、膜蛋白和血凝素酯酶。26.根据权利要求24至25中任一项所述的疫苗，其中所述至少一个乙型冠状病毒表位包含刺突蛋白或是刺突蛋白。27.根据权利要求24至26中任一项所述的疫苗，其中所述至少一个乙型冠状病毒表位包含全长刺突蛋白或是全长刺突蛋白。28.根据权利要求27所述的疫苗，其中所述至少一个乙型冠状病毒表位包含与SEQ ID NO：275的243至1437的氨基酸序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列或由其组成，例如至少75％，例如至少77％，例如至少80％，例如至少85％，例如至少90％，例如至少91％，例如至少92％，例如至少93％，例如至少94％，例如至少95％，例如至少96％，例如至少
97％，例如至少98％或例如至少99％序列同一性或例如100％序列同一性。29.根据权利要求24至26中任一项所述的疫苗，其中所述至少一个乙型冠状病毒表位包含刺突蛋白的一部分或是刺突蛋白的一部分。30.根据权利要求29所述的疫苗，其中所述至少一个乙型冠状病毒表位包含RBD或其一部分或者是RBD或其一部分。31.根据权利要求30所述的疫苗，其中所述至少一个乙型冠状病毒表位包含与SEQ ID NO:231或SEQ ID NO:802或SEQ ID NO:803或SEQ ID NO:804或SEQ ID NO:805的氨基酸序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列或由其组成，例如至少75％，例如至少77％，例如至少80％，例如至少85％，例如至少90％，例如至少91％，例如至少92％，例如至少93％，例如至少94％，例如至少95％，例如至少96％，例如至少97％，例如至少98％或例如至少99％序列同一性或例如100％序列同一性。32.根据权利要求30所述的疫苗，其中所述至少一个乙型冠状病毒表位包含与SEQ ID NO：255的243至465的氨基酸序列具有至少70％序列同一性的氨基酸序列或由其组成，例如至少75％，...

【专利技术属性】
技术研发人员：阿涅特，
申请(专利权)人：耐考德治疗股份有限公司，
类型：发明
国别省市：