禽呼肠孤病毒株QYH2020-QD、病毒液及制备方法、应用技术

本发明专利技术提供了一种禽呼肠孤病毒株QYH2020

【技术实现步骤摘要】
禽呼肠孤病毒株QYH2020
‑
QD、病毒液及制备方法、应用


[0001]本专利技术涉及微生物
，尤其涉及一种禽呼肠孤病毒株QYH2020
‑
QD、病毒液及制备方法、应用。

技术介绍

[0002]呼肠孤病毒是具分节段的双链RNA基因组的一类病毒，分布广，病毒粒呈球形，大小在60
‑
80纳米之间的20面体结构。禽呼肠孤病毒可引起禽的多种疾病，包括病毒性关节炎、矮小综合征、呼吸道疾病、肠道疾病和吸收不良综合征。同时，禽呼肠孤病毒的感染也会增加其他疾病的感染几率，直接影响禽类，尤其是肉鸡和蛋鸡的经济效益，给养禽业带来巨大的经济损失。
[0003]我国禽呼肠孤病毒的相关疫苗较为单一。随着病毒变异等因素发生，禽呼肠孤病毒相关疫病的防治困难逐年增加。

技术实现思路

[0004]本专利技术自主分离得到禽呼肠孤病毒株QYH2020
‑
QD，所述禽呼肠孤病毒株QYH2020
‑
QD具有高病毒滴度和优良的免疫原性。将所述禽呼肠孤病毒株QYH2020
‑
QD用于禽用疫苗，免疫后抗体水平高、持续时间长，禽群保护率高；可以有效防治禽呼肠孤病毒感染，为养禽企业的禽呼肠孤病毒相关疫病防治奠定基础。
[0005]本专利技术提供了一种禽呼肠孤病毒株QYH2020
‑
QD，所述禽呼肠孤病毒株QYH2020
‑
QD保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.45270。
[0006]本专利技术提供了一种病毒液，所述病毒液含有所述禽呼肠孤病毒株QYH2020
‑
QD。
[0007]优选的，所述病毒液中的病毒含量≥10
7.5
TCID
50
/0.1ml。
[0008]本专利技术提供了所述病毒液的制备方法，包括如下步骤：
[0009]S1、将所述禽呼肠孤病毒株QYH2020
‑
QD接种鸡肝癌细胞(LMH)，液体培养基中培养，得到培养液；
[0010]S2、对步骤S1所述培养液除杂，得到所述病毒液。
[0011]优选的，步骤S1所述培养的温度为36
‑
38℃，CO2含量为4％
‑
6％，时间为48
‑
72h。
[0012]优选的，步骤S2所述除杂依次包括冻融和离心的步骤；所述离心后，收取的上清液即为所述病毒液。
[0013]本专利技术提供了所述禽呼肠孤病毒株QYH2020
‑
QD或者所述病毒液在制备禽用疫苗中的应用。
[0014]优选的，所述禽用疫苗包括禽呼肠孤病毒灭活疫苗。
[0015]本专利技术还提供了一种禽呼肠孤病毒灭活疫苗，所述禽呼肠孤病毒灭活疫苗的有效抗原成分包括所述禽呼肠孤病毒毒株QYH2020
‑
QD。
[0016]优选的，所述禽呼肠孤病毒灭活疫苗包括31
‑
32份所述病毒液，62
‑
63份矿物油、0.6
‑
0.7份硬脂酸铝、3
‑
3.5份司本80和1.5
‑
2份吐温80。
[0017]有益效果：
[0018]本专利技术提供了一种禽呼肠孤病毒株QYH2020
‑
QD，所述禽呼肠孤病毒株QYH2020
‑
QD保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.45270。所述禽呼肠孤病毒株QYH2020
‑
QD具有高病毒滴度和优良的免疫原性。将所述禽呼肠孤病毒株QYH2020
‑
QD用于禽用疫苗，免疫后抗体水平高、持续时间长，禽群保护率高；可以有效防治禽呼肠孤病毒感染，为养禽企业的禽呼肠孤病毒相关疫病防治奠定基础。
[0019]生物保藏说明：
[0020]禽呼肠孤病毒Avian orthoreovirus，于2022年09月15日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为：CGMCC No.45270。
具体实施方式
[0021]本专利技术提供了一种禽呼肠孤病毒株QYH2020
‑
QD，所述禽呼肠孤病毒株QYH2020
‑
QD保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.45270。所述禽呼肠孤病毒在LMH细胞中增殖速度快，毒价高，禽呼肠孤病毒达到10
7.5
‑
10
8.0
TCID
50
/0.1ml，免疫原性好，对家禽和环境均安全。
[0022]本专利技术提供了一种病毒液，所述病毒液含有所述禽呼肠孤病毒株QYH2020
‑
QD；优选的，所述病毒液中的病毒含量≥10
7.5
TCID
50
/0.1ml。
[0023]本专利技术提供了所述病毒液的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：S1、将所述禽呼肠孤病毒株QYH2020
‑
QD接种鸡肝癌细胞(LMH)，液体培养基中培养，得到培养液；S2、对步骤S1所述培养液除杂，得到所述病毒液。
[0024]在本专利技术中，步骤S1所述培养的温度为36
‑
38℃，优选为37℃，CO2含量为4％
‑
6％，优选为5％，时间为48
‑
72h，优选为60
‑
65h。步骤S1所述培养基优选为1％的FBS培养基。本专利技术对所述培养基的来源不作特别限定，本领域常规市售符合要求的产品均可。步骤S2所述离心的参数优选为3000rpm，5min。所述离心后，收取的上清液即为所述病毒液。
[0025]在本专利技术更优选的具体实施方式中，所述禽呼肠孤病毒株QYH2020
‑
QD的培养条件为：接种于长势良好的单层LMH细胞上，使用1％FBS培养基，37℃，5％CO2培养48
‑
72h，观察细胞病变，当80
‑
90％以上的细胞出现变圆、崩解等典型细胞病变时，收获病毒液。
[0026]本专利技术提供了所述禽呼肠孤病毒毒株QYH2020
‑
QD或者所述病毒液在制备禽用疫苗中的应用。所述禽用疫苗的类型优选包括禽呼肠孤病毒灭活疫苗。所述禽呼肠孤病毒灭活疫苗的有效抗原成分包括所述禽呼肠孤病毒毒株QYH2020
‑
QD。
[0027]优选的，所述禽呼肠孤病毒灭活疫苗还包括矿物油、硬质酸钠、司本80和吐温80。在本专利技术中，所述病毒液的用量优选为31
‑
32份，更优选为31.67份；所述矿物油的用量优选为62
‑
63份，更优选为62.7份；所述硬脂本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.禽呼肠孤病毒株QYH2020
‑
QD，其特征在于，所述禽呼肠孤病毒株QYH2020
‑
QD保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.45270。2.病毒液，其特征在于，所述病毒液含有权利要求1所述禽呼肠孤病毒株QYH2020
‑
QD。3.根据权利要求2所述的病毒液，其特征在于，所述病毒液中的病毒含量≥10
7.5
TCID
50
/0.1ml。4.权利要求2或3所述病毒液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、将所述禽呼肠孤病毒株QYH2020
‑
QD接种LMH细胞，液体培养基中培养，得到培养液；S2、对步骤S1所述培养液除杂，得到所述病毒液。5.根据权利要求4所述病毒液的制备方法，其特征在于，步骤S1所述培养的温度为36
‑
38℃，CO2含量为4％
‑
6％，...

【专利技术属性】
技术研发人员：李跃，王增福，吴宗学，史张艳，赵成全，程海波，李海鹰，倪娇，孙雪，黄跃强，
申请(专利权)人：乾元浩生物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：