一种抗RBD抗体及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种抗RBD抗体及其应用。本发明专利技术提供的抗RBD抗体能够特异性地与SARS

【技术实现步骤摘要】
一种抗RBD抗体及其应用


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种抗RBD抗体及其应用。

技术介绍

[0002]自SARS
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2被发现以来，全世界范围内已有20多个变异株，截至2022年1月7日，WHO定义了5个关切变异株(variant of concern，VOC)，即阿尔法(α)、贝塔(β)、伽马(γ)、德尔塔(δ)和奥密克戎(ο)。2022年5月，世卫组织表示，已有128个国家和地区报告发现了奥密克戎变异株。在德尔塔变异毒株中突变的氨基酸残基数量为18个，而在新毒株奥密克戎中则有43个。这些变异多样化，且大部分位于与人体细胞相互作用的区域。由于病毒变异率高，传播范围广，大量的疫苗和药物也在大量研发，疫苗和抗体药物出现耐药以及脱靶风险提高，这也给新型抗体药物以及疫苗研发提出更高要求，也提供了更多机遇。
[0003]新冠病毒具有四个结构蛋白，结构蛋白介导病毒粒子的组装与感染。N蛋白组成了基因组外的核衣壳，随后在外层还有膜蛋白(M)，刺突蛋白(S)，包膜蛋白(E)所组成的病毒囊膜结构。
[0004]SARS
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2的S蛋白为病毒表面的一类标志性跨膜蛋白，是由3个相同的亚基通过非共价键的方式结合形成的同源三聚体，其相对分子质量为141178，含有1273个氨基酸。S蛋白主要由信号肽、N端结构域、受体结合结构域(RBD)、融合肽段、七肽重复序列(heptad repeat，HR)1、HR2、跨膜结构域、胞质结构域等构成，同时具有S1/S2与S2两个切割位点。S蛋白的氨基酸顺序。相关研究显示，HR1和HR2会在S1的RBD与靶细胞的ACE2结合后，形成融合核心(6
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HB)，提高病毒融合和感染的效率。
[0005]SARS
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2的细胞受体血管紧张素转换酶2(angiotensin
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converting enzyme2，ACE2)是肾素
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血管紧张素系统的主要活性肽。目前认为，在SARS
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2感染中，ACE2为病毒进入细胞的主要受体。ACE2作为含锌羧肽酶的Ⅰ型跨膜蛋白，多表达于肾脏、心脏和男性生殖系统，同时也在肺、小肠和肝脏等组织中表达。刺突蛋白在病毒入侵过程中起着主要的作用，并且S蛋白为主要免疫原。该蛋白会刺激机体产生大量抗体，这些抗体会结合到S蛋白表面，阻断病毒与宿主识别，抑制病毒蛋白剪切变构，从而抑制病毒入侵。
[0006]因此开发抑制新型冠状病毒S蛋白识别宿主(阻断RBD与ACE2蛋白结合抗体)可有效抑制病毒入侵。本专利技术提供了一种全新的抗RBD的抗体，可有效抑制病毒入侵，与病毒结合活性好，针对广谱变异病毒均有良好的阻断和中和活性。

技术实现思路

[0007]为了解决市面上没有针对奥密克戎病毒具有良好阻断活性的抗体，本专利技术提供了一种抗RBD抗体，可有效抑制病毒入侵，与病毒结合活性好，针对广谱变异病毒均有良好的阻断和中和活性。
[0008]本专利技术提供了分离的单克隆人抗体或其抗原结合部分，其在刺突蛋白或其片段，例如胞外域，或更具体地，刺突蛋白的受体结合结构域处特异性结合冠状病毒如SARS
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2，(i)防止或阻断冠状病毒如SARS
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2进入宿主细胞，和/或(ii)诱导补体介导的冠状病毒如SARS
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2失活和/或吞噬作用。本专利技术的抗体还可以结合在受感染宿主细胞上展示的冠状病毒如SARS
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2的刺突蛋白，诱导补体依赖性细胞毒性(CDC)、抗体依赖性细胞吞噬作用(ADCP)、抗体依赖性细胞介导的病毒抑制作用(ADCVI)和/或抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)以消除受感染的细胞。本专利技术的抗体可包被在冠状病毒如SARS
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2或展示冠状病毒刺突蛋白的感染细胞上形成免疫复合物，该免疫复合物可被抗原呈递细胞如树突状细胞识别，诱导体液和细胞抗病毒免疫反应。
[0009]该抗体或其抗原结合部分可用于体外检测冠状病毒如SARS
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2，以及治疗或预防由冠状病毒引起的疾病。
[0010]因此，本专利技术提供了一种抗RBD的单克隆抗体或其抗原结合部分，其特异性结合冠状病毒的刺突蛋白或其片段，所述抗体或其抗原结合部分包含重链可变区和轻链可变区，其中
[0011](a)所述重链可变区包含HCDR1、HCDR2和HCDR3，所述HCDR1包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列或所示氨基酸序列包含至多三个氨基酸突变的变体；所述HCDR2包含SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列或所示氨基酸序列包含至多三个氨基酸突变的变体；所述HCDR3包含SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列或所示氨基酸序列包含至多三个氨基酸突变的变体；和/或
[0012](b)所述轻链可变区包含LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述LCDR1包含SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列或所示氨基酸序列包含至多三个氨基酸突变的变体；所述LCDR2包含SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列或所示氨基酸序列包含至多三个氨基酸突变的变体；所述LCDR3包含SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列或所示氨基酸序列包含至多三个氨基酸突变的变体。
[0013]在某些实施方案中，HCDR1、HCDR2和HCDR3分别包含SEQ ID NO:1、2、3所示的氨基酸序列或所示氨基酸序列分别包含至多三个氨基酸突变的变体；以及LCDR1、LCDR2和LCDR3分别包含SEQ ID NO:4、5、6所示的氨基酸序列或所示氨基酸序列分别包含至多三个氨基酸突变的变体。
[0014]在某些实施方案中，所述重链可变区包含与SEQ ID NO:7、13、16所示氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列。
[0015]在某些实施方案中，所述轻链可变区包含与SEQ ID NO:8、14所示氨基酸序列具有至少80％同一性的氨基酸序列。
[0016]在某些实施方案中，所述重链可变区和所述轻链可变区具有与SEQ ID NO:7、13、16和SEQ ID NO:8、14所示的氨基酸序列分别包含至少80％同一性的氨基酸序列。
[0017]在某些实施方案中，所述单克隆抗体或其抗原结合部分包含重链恒定区和/或轻链恒定区。
[0018]在某些实施方案中，重链恒定区是IgG、IgA、IgD、IgE和IgM恒定区。
[0019]在某些实施方案中，重链恒定区是IgG1、IgG2(例如IgG2a)、IgG3或IgG4恒定区。
[0020]在某些实施方案中，本专利技术的抗体或抗原结合部分可以是抗体片段，例如Fab、F本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种分离的单克隆抗体或其抗原结合部分，其特异性结合冠状病毒的刺突蛋白或其片段，所述抗体或其抗原结合部分包含重链可变区和轻链可变区，其特征在于，(a)所述重链可变区包含HCDR1、HCDR2和HCDR3，所述HCDR1包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列或所示氨基酸序列包含至多三个氨基酸突变的变体；所述HCDR2包含SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列或所示氨基酸序列包含至多三个氨基酸突变的变体；所述HCDR3包含SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列或所示氨基酸序列包含至多三个氨基酸突变的变体；和/或(b)所述轻链可变区包含LCDR1、LCDR2和LCDR3，所述LCDR1包含SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列或所示氨基酸序列包含至多三个氨基酸突变的变体；所述LCDR2包含SEQ ID NO:5所示的氨基酸序列或所示氨基酸序列包含至多三个氨基酸突变的变体；所述LCDR3包含SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列或所示氨基酸序列包含至多三个氨基酸突变的变体。2.根据权利要求1所述的抗体或其抗原结合部分，其中HCDR1、HCDR2和HCDR3分别包含SEQ ID NO:1、2、3所示的氨基酸序列或所示氨基酸序列分别包含至多三个氨基酸突变的变体；以及LCDR1、LCDR2和LCDR3分别包含SEQ ID NO:4、5、6所示的氨基酸序列或...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨化冰，殷刘松，姜晓玲，
申请(专利权)人：盛禾中国生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：