酞嗪异噁唑类药物中有关物质的检测方法技术

本申请涉及一种酞嗪异噁唑类药物中有关物质的检测方法，包括如下步骤：取所述PA4的对照品，以第一溶剂溶解，制备对照品溶液；取待测样品，以第二溶剂溶解，制备待测样品溶液；将所述对照品溶液和待测样品溶液进行高效液相色谱检测，所述高效液相色谱检测的条件包括：流动相A为体积浓度0.08%~0.12%的磷酸水溶液，流动相B为乙腈，进行梯度洗脱。上述检测方法通过采用合适的条件对原料药进行高效液相色谱检测，能够有效分离原料药以及各杂质，进而实现原料药有关物质的检测，对原料药的生产质量控制和研究具有重要意义。制和研究具有重要意义。制和研究具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
酞嗪异噁唑类药物中有关物质的检测方法


[0001]本申请涉及质量检测
，特别是涉及一种酞嗪异噁唑类药物中有关物质的检测方法。

技术介绍

[0002]酞嗪异噁唑类药物，举例可如中国专利申请CN110256440A公开的N
‑
异丙基
‑6‑
(((3
‑
(5
‑
(甲氧基甲基)异噁唑
‑3‑
基)
‑
[1,2,4]三唑[3,4
‑
a]酞嗪
‑6‑
基)氧)甲基)烟酰胺（结构如下式（1）所示）。
[0003]ꢀꢀꢀꢀ
（1）研究证实，此类化合物具有较好的含α5的GABAA受体(α5
‑
GABAA受体)的调控作用。α5
‑
GABAA受体在哺乳动物大脑的海马组织中具有特异性分布，对其进行调控可治疗疼痛，特别是神经性病理疼痛（NPP）。
[0004]在原料药合成路线的工业化生产中，不可避免地残留有机杂质，包括原料、中间体和副产物等，统称为“有关物质”，有关物质的存在会影响成品的质量，甚至可能影响药物的药效和毒性。目前，N
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异丙基
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(((3
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(5
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(甲氧基甲基)异噁唑
‑3‑
基)
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[1,2,4]三唑[3,4
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a]酞嗪
‑6‑
基)氧)甲基)烟酰胺的原料药合成路线可参见中国专利申请CN114773352A，具体如下所示：
[0005]在上述原料药合成路线的工业化生产中，不可避免地残留有机杂质，包括原料、中间体和副产物等，统称为“有关物质”，有关物质的存在会影响成品的质量。因此，在原料药中需要对有关物质进行严格控制。通常而言，需严格控制原料药中杂质总含量应小于1.0％，单个杂质含量应小于0.1％。基于此，有必要提供一种针对酞嗪异噁唑类药物中有关物质的检测方法。

技术实现思路

[0006]基于此，本申请提供一种针对酞嗪异噁唑类药物中有关物质的检测方法。
[0007]具体技术方案如下一种酞嗪异噁唑类药物中有关物质的检测方法，所述酞嗪异噁唑类药物具有如下式（1）所示结构特征：
ꢀꢀꢀꢀ
（1）所述有关物质包括PA4和PA8
‑
1中的一种或两种，结构如下所示：
[0008]所述检测方法包括如下步骤：取所述PA4的对照品，以第一溶剂溶解，制备对照品溶液；取待测样品，以第二溶剂溶解，制备待测样品溶液；将所述对照品溶液和待测样品溶液进行高效液相色谱检测，所述高效液相色谱检测的条件包括：流动相A为体积浓度0.08%~0.12%的磷酸水溶液，流动相B为乙腈，进行梯度洗脱，所述梯度洗脱包括如下洗脱程序：0min~0.5min，保持所述流动相A的体积百分比为100%；0.5min~6min，所述流动相A的体积百分比由100%下降至65%；6min~8min，所述流动相A的体积百分比由65%下降至50%；8min~9min，保持所述流动相A的体积百分比为50%。
[0009]在其中一个实施例中，所述高效液相色谱检测采用的色谱柱为RP C18色谱柱。
[0010]在其中一个实施例中，所述高效液相色谱检测采用的进样量为3μL~5μL。
[0011]在其中一个实施例中，所述高效液相色谱检测的条件还包括如下（1）~（3）项中的一种或多种：（1）流速：0.8mL/min~1.2mL/min；（2）柱温：25℃~35℃；（3）检测波长：260nm~275nm。
[0012]在其中一个实施例中，所述检测方法还包括构建标准曲线的步骤，以及根据所述待测样品溶液的高效液相色谱检测所得色谱图和所述标准曲线进行含量计算的步骤；其中，所述PA4的标准曲线为：y=11576.7830x+136.4620；所述PA8
‑
1的标准曲线为：y = 9372.6675x +58.8720；所述酞嗪异噁唑类药物的标准曲线为：y =16979.9541x+1218.3103。
[0013]在其中一个实施例中，所述构建标准曲线的步骤包括：取所述有关物质或酞嗪异噁唑类药物的对照品，以第一溶剂溶解，制成不同浓度的标准品溶液；将所述不同浓度的标准品溶液进行所述高效液相色谱检测，根据检测结果构建各标准曲线。
[0014]在其中一个实施例中，所述不同浓度的标准品溶液的浓度分布为0.1~11g/mL。
[0015]在其中一个实施例中，所述第一溶剂为体积浓度45%~55%的乙腈水溶液。
[0016]在其中一个实施例中，所述第二溶剂为体积浓度45%~55%的乙腈水溶液。
[0017]在其中一个实施例中，所述有关物质为PA4和PA8
‑
1。
[0018]上述酞嗪异噁唑类药物中有关物质的检测方法，通过采用合适的条件对原料药进
行高效液相色谱检测，能够有效分离原料药以及各杂质，进而实现原料药有关物质的检测，对原料药的生产质量控制和研究具有重要意义。
附图说明
[0019]图1为实施例1中PA4对照品溶液和待测样品溶液的高效液相色谱检测结果图，其中，（a）PA4对照品溶液色谱图，（b）待测样品溶液色谱图；图2为各对照品的标准曲线图；图3为杂质分离的专属性考察结果图；图4为不同进样量条件下杂质分离的考察结果图，其中，（a）10
µ
L，（b）20
µ
L；图5为不同色谱柱条件下杂质分离的考察结果图；图6为不同洗脱程序条件下杂质分离的考察结果图。
具体实施方式
[0020]以下结合具体实施例对本申请的酞嗪异噁唑类药物中有关物质的检测方法作进一步详细的说明。本申请可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施方式。相反地，提供这些实施方式的目的是使对本申请公开内容理解更加透彻全面。
[0021]除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本申请的
的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本申请的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本申请。
[0022]本文所使用的术语“和/或”、“或/和”、“及/或”的可选范围包括两个或两个以上相关所列项目中任一个项目，也包括相关所列项目的任意的和所有的组合，所述任意的和所有的组合包括任意的两个相关所列项目、任意的更多个相关所列项目、或者全部相关所列项目的组合。
[0023]本文中，“一种或多种”指所列项目的任一种、任两种或任两种以上。
[0024]本申请中，第一”、“第二”等仅起到非穷举式的列举描述目的，应当理解并不构成对数量的封闭式限定。
[0025]本申请中，以开放式描述的技术特征中，包括所列举特征组成的封闭式技术方案，也包括包含所列举特征的开放式技术方案。
[0026]本申请中，涉及到数值区间，如无特别说明，上述数本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种酞嗪异噁唑类药物中有关物质的检测方法，其特征在于，所述酞嗪异噁唑类药物具有如下式（1）所示结构特征：
ꢀꢀꢀꢀꢀ
（1）所述有关物质包括PA4和PA8
‑
1中的一种或两种，结构如下所示：所述检测方法包括如下步骤：取所述PA4的对照品，以第一溶剂溶解，制备对照品溶液；取待测样品，以第二溶剂溶解，制备待测样品溶液；将所述对照品溶液和待测样品溶液进行高效液相色谱检测，所述高效液相色谱检测的条件包括：流动相A为体积浓度0.08%~0.12%的磷酸水溶液，流动相B为乙腈，进行梯度洗脱，所述梯度洗脱包括如下洗脱程序：0min~0.5min，保持所述流动相A的体积百分比为100%；0.5min~6min，所述流动相A的体积百分比由100%下降至65%；6min~8min，所述流动相A的体积百分比由65%下降至50%；8min~9min，保持所述流动相A的体积百分比为50%。2.根据权利要求1所述的酞嗪异噁唑类药物中有关物质的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱检测采用的色谱柱为RP C18色谱柱。3.根据权利要求1所述的酞嗪异噁唑类药物中有关物质的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱检测采用的进样量为3μL~5μL。4.根据权利要求1所述的酞嗪异噁唑类药物中有关物质的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱检测的条件还包括如下（1）~（3）项中的一种或多种：（1）流速：0.8mL/min~1.2mL/min；（2）柱温：25℃~35℃；（3）检测...

【专利技术属性】
技术研发人员：高昂，
申请(专利权)人：上海赛默罗生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：