一种亚麻苦苷酶突变体及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种亚麻苦苷酶突变体及其应用，属于酶工程技术领域。所述突变体的氨基酸序列为以下(a)～(d)的任意一项或任意两项或任意三项或四项的的组合：(a)如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的第263位的赖氨酸突变为脯氨酸；(b)如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的第53位的苏氨酸突变为苯丙氨酸；(c)如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的第366位的丝氨酸突变为精氨酸；(d)如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的第335位的缬氨酸突变为半胱氨酸，第339位的苯丙氨酸突变为半胱氨酸。本发明专利技术结合酶的分子设计和定点突变获得热稳定性和活性都显著提升的突变体，与野生型相比，突变体对生氰糖苷的降解效率显著提高，本发明专利技术为提高木薯食品以及含氰苷食品的食用安全性奠定基础。及含氰苷食品的食用安全性奠定基础。及含氰苷食品的食用安全性奠定基础。

【技术实现步骤摘要】
一种亚麻苦苷酶突变体及其应用


[0001]本专利技术涉及酶工程
，具体涉及一种亚麻苦苷酶突变体及其应用。

技术介绍

[0002]木薯(学名:Manihot esculenta)是大戟科、木薯属的可食用块根，是全球性的粮食作物。木薯中含有一类糖苷类植物次生代谢产物，称为生氰糖苷，亦称氰苷。研究表明，生氰糖苷具有生殖毒性、发育毒性和神经毒性等，并可能导致高剂量急性死亡，在食用木薯的人群中观察到痉挛性截瘫和热带共济失调性神经病。世界卫生组织报道，氰化物的膳食暴露风险主要来源于木薯。
[0003]木薯中的生氰糖苷有亚麻苦苷和百脉根苷，其中亚麻苦苷占据了木薯总氰苷的90％。亚麻苦苷酶(linamarase)特异性水解亚麻苦苷是去除木薯氰化物的关键步骤。前期研究结果表明，生氰糖苷化合物比较稳定，在加工中较难发生热降解，生氰糖苷的高效降解主要依赖于亚麻苦苷酶的水解作用。而在加工过程中往往伴随着木薯内源性亚麻苦苷酶的失活，导致生氰糖苷过高残留(Zhong Y,et al.Effect of ultrasonic pretreatment on e本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种亚麻苦苷酶突变体，其特征在于，所述突变体的氨基酸序列为以下(a)～(d)的任意一项或任意两项或任意三项或四项的组合：(a)如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的第263位的赖氨酸突变为脯氨酸；(b)如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的第53位的苏氨酸突变为苯丙氨酸；(c)如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的第366位的丝氨酸突变为精氨酸；(d)如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的第335位的缬氨酸突变为半胱氨酸，第339位的苯丙氨酸突变为半胱氨酸。2.一种重组表达载体，其特征在于，所述重组表达载体包括原始表达质粒以及插入在原始表达质粒多克隆位点中的编码如权利要求1所述的亚麻苦苷酶突变体的核苷酸序列。3.如权利要求2所述的重组表达载体，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：陆柏益，钟永恒，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：