一种植物乳杆菌冻干菌粉的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种植物乳杆菌冻干菌粉的制备方法，属于微生物技术领域。本发明专利技术通过特定的冻干工艺加工成活菌菌粉，并优化了菌粉的冻干过程，在保证菌粉收率的同时提高了菌粉中的菌活得率，使冻干存活率达到83.64％

【技术实现步骤摘要】
一种植物乳杆菌冻干菌粉的制备方法


[0001]本专利技术涉及一种植物乳杆菌冻干菌粉的制备方法，属于生物


技术介绍

[0002]植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)是乳酸菌的一种，革兰氏染色阳性、厌氧或兼性厌氧、无芽孢、耐酸、耐胆盐，最适生长温度为30～37℃，常见于乳制品、肉类、蔬菜以及果汁中的乳酸菌，能通过胃肠并定植于肠道发挥有益作用。植物乳杆菌无论是在食品发酵，还是工业乳酸发酵以及医疗保健等领域中均有着广泛的应用。但是植物乳杆菌活菌较难长期保存，因此，利用冷冻干燥技术生产活菌制剂是多种保藏方法中较为理想的一种。
[0003]冷冻干燥于低温下进行去除水分的干燥操作，在此过程中，植物乳杆菌菌体的细胞不可避免的会遭受损伤或破坏，从而导致细胞数目的下降，菌粉降低，限制了植物乳杆菌菌粉在功能性食品中的应用。因此，在冻干过程中加入冻干保护剂，能够有效减少冷冻干燥过程中冰晶对于植物乳杆菌菌体的损伤，保护菌细胞不会受到损伤，提高植物乳杆菌的存活率，对制备出高菌活的植物乳杆菌菌粉以及保持保藏、运输、销售过程中植物乳杆菌的活菌数都有着很重要的意义。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种能够解决植物乳杆菌菌粉在冻干过程中存在的冻干存活率低，活菌数少的问题，显著提高植物乳杆菌冻干存活率及菌粉活菌数的复合保护剂及其制备方法。
[0005]本专利技术提供了一种植物乳杆菌冻干菌粉的制备方法，包括如下步骤：
[0006](1)培养植物乳杆菌，收集菌泥；<br/>[0007](2)将步骤(1)收集的菌泥加入冻干保护剂中，菌泥与冻干保护剂按质量比为1：0.5
‑
2.5；所述冻干保护剂由3.0
‑
5.0％wt可溶性大豆多糖、5.0
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8.0％wt半乳甘露聚糖、5.0
‑
10.0％wt水苏糖、0.5
‑
1.5％wt谷氨酸钠、70.0
‑
85.0％wt蒸馏水组成；
[0008](3)将步骤(2)混合后的菌悬液冷冻干燥，得到所述植物乳杆菌菌粉。
[0009]在一种实施方式中，所述步骤(1)是将植物乳杆菌在MRS培养基培养。
[0010]在一种实施方式中，所述步骤(1)是将植物乳杆菌菌液在在4℃，8000
‑
10000rpm离心10
‑
15min，洗涤后再次离心，收集菌泥。
[0011]在一种实施方式中，所述步骤(2)采用由0.015
‑
0.025mol/L Na2HPO4、0.015
‑
0.025mol/LKH2PO4组成的磷酸盐缓冲液调节冻干保护剂溶液的pH至6.5
‑
7.5，采用115℃灭菌15min后得到无菌冻干保护剂，待无菌冻干保护剂降至室温后，在无菌环境中添加收集的菌泥制备得菌悬液。
[0012]在一种实施方式中，所述步骤(3)的冷冻干燥是先于
‑
80℃预冻10
‑
14h，再置于真空冷冻干燥设备中
‑
40至
‑
50℃条件下干燥18
‑
22h。
[0013]在一种实施方式中，将所述冷冻干燥后的菌粉在20
‑
25％RH相对湿度条件下用铝
组成的磷酸盐缓冲液调节冻干保护剂溶液的pH至7.4，采用115℃灭菌15min后得到无菌冻干保护剂，待无菌冻干保护剂降至室温后，在无菌环境中添加收集的菌泥制备得菌悬液；
[0031](3)将菌悬液置于冻干设备中，先于
‑
80℃预冻14h，再置于真空冷冻干燥设备中
‑
46℃条件下干燥22h，将冷冻干燥得到的菌粉在20
‑
25％RH相对湿度条件下用铝箔袋进行真空度为0.7MPa的真空包装，得到所述植物乳杆菌菌粉。
[0032]实施例3
[0033]一种植物乳杆菌冻干菌粉的制备方法，具体包括以下步骤：
[0034](1)将植物乳杆菌菌液在MRS培养基中发酵培养得到发酵液，经4℃离心，9000rpm离心15min，用无菌水洗涤再次离心，弃去上清后得到收集菌泥；
[0035](2)将收集菌泥加入冻干保护剂中，菌泥与冻干保护剂按质量比为1：1.6；所述冻干保护剂由3.0％wt可溶性大豆多糖、7.0％wt半乳甘露聚糖、5.5％wt水苏糖、1.0％wt谷氨酸钠、83.5％wt蒸馏水组成，混合均匀后，采用由0.021mol/L Na2HPO4、0.016mol/L KH2PO4组成的磷酸盐缓冲液调节冻干保护剂溶液的pH至7.0，采用115℃灭菌15min后得到无菌冻干保护剂，待无菌冻干保护剂降至室温后，在无菌环境中添加收集的菌泥制备得菌悬液；
[0036](3)将菌悬液置于冻干设备中，先于
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80℃预冻12h，再置于真空冷冻干燥设备中
‑
48℃条件下干燥20h，将冷冻干燥得到的菌粉在20
‑
25％RH相对湿度条件下用铝箔袋进行真空度为0.66MPa的真空包装，得到所述植物乳杆菌菌粉。
[0037]实施例4
[0038]一种植物乳杆菌冻干菌粉的制备方法，具体包括以下步骤：
[0039](1)将植物乳杆菌菌液在MRS培养基中发酵培养得到发酵液，经4℃离心，9500rpm离心10min，用无菌水洗涤再次离心，弃去上清后得到收集菌泥；
[0040](2)将收集菌泥加入冻干保护剂中，菌泥与冻干保护剂按质量比为1：2.1；所述冻干保护剂由3.1％wt可溶性大豆多糖、5.9％wt半乳甘露聚糖、8.8％wt水苏糖、0.6％wt谷氨酸钠、81.6％wt蒸馏水组成，混合均匀后，采用由0.020mol/L Na2HPO4、0.020mol/L KH2PO4组成的磷酸盐缓冲液调节冻干保护剂溶液的pH至7.0，采用115℃灭菌15min后得到无菌冻干保护剂，待无菌冻干保护剂降至室温后，在无菌环境中添加收集的菌泥制备得菌悬液；
[0041](3)将菌悬液置于冻干设备中，先于
‑
80℃预冻10h，再置于真空冷冻干燥设备中
‑
40℃条件下干燥19h，将冷冻干燥得到的菌粉在20
‑
25％RH相对湿度条件下用铝箔袋进行真空度为0.65MPa的真空包装，得到所述植物乳杆菌菌粉。
[0042]实施例5
[0043]一种植物乳杆菌冻干菌粉的制备方法，具体包括以下步骤：
[0044](1)将植物乳杆菌菌液在MRS培养基中发酵培养得到发酵液，经4℃离心，8000rpm离心12min，用无菌水洗涤再次离心，弃去上清后得到收集菌泥；
[0045](2)将收集菌泥加入冻干保护剂中，菌泥与冻干保护剂按质量比为1：1.7；所述冻干保护剂由4.0％wt可溶性大豆多糖、6.0％wt半乳甘露聚糖、9.0％wt水苏糖、本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种植物乳杆菌冻干菌粉的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)培养植物乳杆菌，收集菌泥；(2)将步骤(1)收集的菌泥加入冻干保护剂中，菌泥与冻干保护剂按质量比为1：0.5
‑
2.5；所述冻干保护剂由3.0
‑
5.0％wt可溶性大豆多糖、5.0
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8.0％wt半乳甘露聚糖、5.0
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10.0％wt水苏糖、0.5
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1.5％wt谷氨酸钠、70.0
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85.0％wt蒸馏水组成；(3)将步骤(2)混合后的菌悬液冷冻干燥，得到所述植物乳杆菌菌粉。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)是将植物乳杆菌在MRS培养基培养。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)是将植物乳杆菌菌液在在4℃，8000
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【专利技术属性】
技术研发人员：田莹，王华川，王晓晨，蒋诗雨，诸梦洁，邓丽莎，
申请(专利权)人：格乐瑞无锡营养科技有限公司，
类型：发明
国别省市：