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一种基于双组分群体感应元件的枯草芽孢杆菌自诱导基因表达系统技术方案

技术编号:37255342 阅读:18 留言:0更新日期:2023-04-20 23:31
本发明专利技术公开一种基于双组分群体感应元件的枯草芽孢杆菌自诱导基因表达系统,属于基因工程技术领域。开发一种持久和高表达的自诱导基因表达系统。本发明专利技术提供一种自诱导基因的表达系统,所述表达元件由组成型启动子和靶标启动子、agrA基因的RBS序列和/或agrD基因的RBS序列、编码应答调节蛋白基因agrA、编码信号分子AIP前体基因agrD、编码信号加工蛋白的基因agrB和编码与信号分子结合并启动信号传导的传感蛋白基因agrC组成。本发明专利技术对设计基于枯草芽孢杆菌的重组蛋白表达体系提供了一种新的思路和方法。思路和方法。思路和方法。

【技术实现步骤摘要】
一种基于双组分群体感应元件的枯草芽孢杆菌自诱导基因表达系统


[0001]本专利技术属于基因工程
,主要涉及一种基于双组分群体感应元件的枯草芽孢杆菌自诱导基因表达系统。

技术介绍

[0002]随着基因工程、合成生物学的发展,人们通过在细胞中构建基因电路来实现对细胞进行遗传操作,这在合成生物学研究中具有重要的作用。传统的表达调控系统可以在转录水平实现调控,但需要外源添加诱导剂来进行调控,常见的诱导剂有由乳糖、异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)、木糖等,不过,诱导型的表达系统种类依然很少,性能依然不能满足大规模工业生产的要求,并且外源添加的诱导剂会大幅度提高生产成本。此外,细胞内的所有代谢活动是动态而复杂的,而这种调控策略与底盘细胞的生长耦合,所以在细胞中构建人工静态调控系统往往会对底盘细胞造成干扰,例如,外源基因的过度表达可能造成宿主无法正常生长;中间有毒产物的大量积累可能对细胞产生毒害作用,甚至导致细胞死亡。有时需要生产特殊的化合物,例如在合成具有细胞毒性的产物时,通常需要宿主生长到较高的细胞密度时再从生长转换为生产模式,从而尽可能减少产物对细本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种自诱导基因的表达元件,其特征在于,所述表达元件由组成型启动子和靶标启动子、agrA基因的RBS序列和/或agrD基因的RBS序列、编码应答调节蛋白基因agrA、编码信号分子AIP前体基因agrD、编码信号加工蛋白的基因agrB和编码与信号分子结合并启动信号传导的传感蛋白基因agrC组成。2.根据权利要求1所述的表达元件,其特征在于,所述agrD基因的RBS序列如SEQ IDNO.16或SEQ ID NO.17所示;所述agrA基因的RBS序列如SEQ ID NO.18、SEQ ID NO.19、SEQ ID NO.20或SEQ ID NO.21。3.根据权利要求1所述的表达元件,其特征在于,组成型启动子分别为组成型启动子Pveg和组成型启动子P43,靶标启动子为P3启动子,载体为pHT01。4.根据权利要求1所述的表达元件,其特征在于,连接顺序为:组成型启动子P43与agrA基因RBS和agrA基因依次连接,P3启动子与多克隆位点连接,组成型启动子Pveg与agrD基因RBS和agrD基因依次连接,组成...

【专利技术属性】
技术研发人员:崔文璟张雨晴伍义周哲敏胡瑞淳韩来闯郭品增王馨苒段誉邵梦圆
申请(专利权)人:江南大学
类型:发明
国别省市:

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