一种同时检测重酒石酸去甲肾上腺素中API游离碱与配对有机酸的HPLC检测方法技术

本发明专利技术属于药物分析技术领域，具体涉及一种同时检测重酒石酸去甲肾上腺素中API游离碱与配对有机酸的HPLC检测方法。该检测方法为：采用二羟丙基键合相的亲水相互作用色谱柱，以磷酸盐和乙酸铵混合液为强洗脱流动相，以乙腈为弱洗脱流动相，以强洗脱流动相:弱洗脱流动相＝20:80，v/v，进行等度洗脱，所述强洗脱流动相为5mM磷酸二氢钾和10mM乙酸铵，并用乙酸调节pH至4.4～4.5；其色谱条件：流动相流速为0.9～1.1mL/min；色谱柱温度为30～45℃；检测器所用紫外检测器，检测波长为210～220nm。该检测方法操作简单、成本低，能够同时分离游离碱和有机酸，二者之间的分离度远大于2.0，且游离碱和有机酸的峰型良好，拖尾因子均在0.8～1.5之间，为产品的研发和生产提供了简便、稳定、可靠的分析检测方法。的分析检测方法。

【技术实现步骤摘要】
一种同时检测重酒石酸去甲肾上腺素中API游离碱与配对有机酸的HPLC检测方法


[0001]本专利技术属于药物分析
，具体涉及一种同时检测重酒石酸去甲肾上腺素中API(活性药物成分)游离碱与配对有机酸的HPLC检测方法。

技术介绍

[0002]重酒石酸去甲肾上腺素为肾上腺素受体激动药，注射液由HOSPIRA开发，于1950年7月首次在美国获批上市，商品名为LEVOPHED。是强烈的α受体激动药，同时也激动β受体。通过α受体激动，可引起血管极度收缩，使血压升高，冠状动脉血流量增加；通过激动β受体，使心肌收缩加强，心排出量增加。早在29世纪50年代，去甲肾上腺素是休克治疗主要升压药。国内一项Meta分析结果显示：在感染性休克患者中，与多巴胺相比，去甲肾上腺素能使住院期间死亡风险降低12％，其差异具有统计学意义；多巴胺组感染休克患者心律失常事件发生风险是去甲肾上腺素组的2.63倍；多巴胺组心脏指数较去甲肾上腺素组增加；但在心率及平均动脉压方面，两组差异无统计学意义。根据系统评价结果，去甲肾上腺素在改善感染性休克患者血流动力学、降低病死率及安全性等方面均优于多巴胺。近年来的一些研究还表明：对于容量复苏效果不理想的感染性休克患者，去甲肾上腺素与多巴酚丁胺合用，可以改善组织灌注与氧输送，增加冠状动脉和肾脏的血流以及肌酐清除率，降低乳酸水平，而不加重器官的缺血。
[0003]据报道，大约50％的药物都能与某种形式的盐结合。许多API缺乏治疗性生物利用度所需的溶解度。因此，将不溶性API与可溶性盐结合，可以提高生物利用度并减少达到治疗效果所需的API用量。鉴定并定量游离碱和配对有机酸是制药行业非常重要的质控环节。
[0004]去甲肾上腺素和酒石酸均为极性较大的物质，但酸碱性具有较大的差异。各国药典中对于去甲肾上腺素有关物质的检测方法是通过使用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，在流动相中添加离子对试剂例如庚烷磺酸钠，来增强游离碱去甲肾上腺素在酸性条件下的保留。但在该条件下，酒石酸几乎没有保留，因此无法分析酒石酸。且各国药典该品种项下没有收载配对有机酸L
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酒石酸的检测方法。

技术实现思路

[0005]为了解决现有技术中存在的问题，本申请专利技术人通过大量理论调研和实验探索，提供了一种同时检测重酒石酸去甲肾上腺素中活性药物成分(API)游离碱与配对有机酸的HPLC检测方法，从而更好地控制重酒石酸去甲肾上腺素产品质量。
[0006]为了实现本专利技术的目的，本专利技术提供的技术方案是：
[0007]一种同时检测重酒石酸去甲肾上腺素中活性药物成分(API)游离碱与配对有机酸的HPLC检测方法：采用二羟丙基键合相的亲水相互作用(HILIC)色谱柱，以磷酸盐和乙酸铵缓冲液为强洗脱流动相，以乙腈为弱洗脱流动相，以强洗脱流动相：弱洗脱流动相＝20:80(v/v)混合液进行等度洗脱，所述高效液相色谱分析方法检测采用如下的色谱条件：
[0008]流动相流速为0.9～1.1mL/min；
[0009]色谱柱温度为30～45℃；
[0010]检测器所用紫外检测器，检测波长为210～220nm；
[0011]优选的，所述色谱柱为广州菲罗门Titank HILIC(250mm*4.6mm，5um)；
[0012]优选的，所述强洗脱流动相为5mM磷酸二氢钾和10mM乙酸铵混合液(磷酸二氢钾和乙酸铵的浓度均指在混合液中的浓度)，pH＝4.4～4.5(用乙酸调节)；
[0013]优选的，色谱柱温度为40℃；
[0014]优选的，所述检测波长为210nm；
[0015]优选的，所述流动相流速为1.0mL/min；
[0016]优选的，进样量为10μL。
[0017]进一步的，所述检测方法包括如下步骤：
[0018]1.1用稀释剂配制待测样品溶液，所述稀释剂与所述洗脱流动相相同，为5mM磷酸二氢钾和10mM乙酸铵混合液(用乙酸调节pH至4.4～4.5):乙腈＝20:80；
[0019]1.2将步骤1.1所得的待测样品溶液注入到高效液相色谱仪的色谱柱中进行检测。
[0020]本专利技术方法与现有技术相比具有以下优点和有益效果：
[0021]1、实现了对重酒石酸去甲肾上腺素中活性药物成分(API)游离碱与配对有机酸的HPLC检测方法，因此本专利技术的检测方法能够更好地实现对原料药重酒石酸去甲肾上腺素的质量控制，提高最终产品的品质，保证了其临床用药的安全有效。
[0022]2、检测方法操作简单、成本低，能够同时分离游离碱和有机酸，二者之间的分离度远大于2.0，且游离碱和有机酸的峰型良好，拖尾因子均在0.8～1.5之间，为产品的研发和生产提供了简便、稳定、可靠的分析检测方法。
[0023]需要说明的是：本专利技术中单位“mM”均是指mmol/L。
附图说明
[0024]图1为重酒石酸去甲肾上腺素原料药在缓冲液(10mM乙酸铵，pH4.40)中游离碱去甲肾上腺素与配对有机酸L
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酒石酸的保留与峰型情况；
[0025]图2为重酒石酸去甲肾上腺素原料药在缓冲液(30mM乙酸铵，pH4.50)中游离碱去甲肾上腺素与配对有机酸L
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酒石酸的保留与峰型情况；
[0026]图3为重酒石酸去甲肾上腺素原料药在缓冲液(50mM乙酸铵，pH4.46)中游离碱去甲肾上腺素与配对有机酸L
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酒石酸的保留与峰型情况；
[0027]图4为重酒石酸去甲肾上腺素原料药在缓冲液(5mM磷酸二氢钾，pH4.70)中游离碱去甲肾上腺素与配对有机酸L
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酒石酸的保留与峰型情况；
[0028]图5为重酒石酸去甲肾上腺素原料药在缓冲液(10mM磷酸二氢钾，pH4.75)中游离碱去甲肾上腺素与配对有机酸L
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酒石酸的保留与峰型情况；
[0029]图6为重酒石酸去甲肾上腺素原料药在缓冲液(5mM磷酸二氢钾+50mM乙酸铵，pH4.4)中游离碱去甲肾上腺素与配对有机酸L
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酒石酸的保留与峰型情况；
[0030]图7为重酒石酸去甲肾上腺素原料药在缓冲液(5mM磷酸二氢钾+40mM乙酸铵，pH4.4)中游离碱去甲肾上腺素与配对有机酸L
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酒石酸的保留与峰型情况；
[0031]图8为重酒石酸去甲肾上腺素原料药在缓冲液(5mM磷酸二氢钾+10mM乙酸铵，
pH4.4)中游离碱去甲肾上腺素与配对有机酸L
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酒石酸的保留与峰型情况；
[0032]图9为重酒石酸去甲肾上腺素原料药在缓冲液(5mM磷酸二氢钾+10mM乙酸铵，pH4.2)中游离碱去甲肾上腺素与配对有机酸L
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酒石酸的保留与峰型情况；
[0033]图10为重酒石酸去甲肾上腺素原料药在缓冲液(5mM磷酸二氢钾+10mM乙酸铵，pH4.5)中游离碱去甲肾上腺素与配对有机酸L
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酒石本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种同时检测重酒石酸去甲肾上腺素中活性药物成分游离碱与配对有机酸的HPLC检测方法，其特征在于：采用二羟丙基键合相的亲水相互作用色谱柱，以磷酸盐和乙酸铵混合液为强洗脱流动相，以乙腈为弱洗脱流动相，以强洗脱流动相:弱洗脱流动相＝20:80，v/v，进行等度洗脱，所述强洗脱流动相为5mM磷酸二氢钾和10mM乙酸铵混合液，其pH＝4.4～4.5；检测采用如下的色谱条件：流动相流速为0.9～1.1mL/min；色谱柱温度为30～45℃；检测器所用紫外检测器，检测波长为210～220nm。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述色谱柱为广州菲罗门...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋潇潇，
申请(专利权)人：武汉嘉诺康医药技术有限公司，
类型：发明
国别省市：