一种俄色果及其制剂的HPLC特征图谱检测方法技术

本发明专利技术属于药物分析领域，具体公开了一种俄色果及其制剂的HPLC特征图谱检测方法，它包括如下步骤：1）对照品溶液制备；2）供试品溶液制备；3）分别吸取对照品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图。本发明专利技术俄色果及其制剂的HPLC特征图谱检测方法，通过特定的色谱条件建立的特征图谱能标定8个特征峰，尤其是能指认出俄色果中特有的有机酸类成分枸杞酸和L

【技术实现步骤摘要】
C18柱或Kromasil C18柱，柱长250mm，内径4.6mm，粒径5
µ
m，柱温25~35℃，进样量5~25μL，流速为0.2~0.7mL
∙
min
‑1，检测波长200~220nm。
[0010]进一步地，步骤3）所述色谱条件中柱温30℃，进样量10μL，流速为0.5mL
∙
min
‑1，检测波长210nm。
[0011]进一步地，所述供试品溶液的色谱图中应呈现8个特征峰，其中2个峰应分别与相应对照品参照物峰的保留时间相对应，与枸杞酸参照物峰相应的峰为S峰，计算其余各峰与S峰的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的
±
10%范围之内，规定值为：峰1：0.343、峰2：0.413、峰3：0.534、峰6：1.173、峰7：1.487、峰8：1.800。
[0012]本专利技术俄色果及其制剂的HPLC特征图谱检测方法，通过特定的色谱条件建立的特征图谱能标定8个特征峰，尤其是能指认出俄色果中特有的有机酸类成分枸杞酸和L
‑
苹果酸的色谱峰，更具特征性的化学成分的标定实现了对俄色果及其制剂的质量控制，保障了俄色果的临床疗效，具备实际推广应用价值。
[0013]显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
[0014]以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。
附图说明
[0015]图1色谱柱耐用性考察色谱图（A：SunFire C18柱；B：Kromasil C18柱；C：Inertsil ODS
‑
3 C18柱）；图2 3批样品特征图谱（S1:PFG001特征图谱, S2:PFG002特征图谱, S3:PFG003特征图谱, R:对照特征图谱）；图3 HPLC色谱图（A：俄色果（变叶海棠）配方颗粒的对照特征图谱；B：混合对照品溶液的HPLC色谱图；峰4:L
‑
苹果酸；峰5:枸杞酸）；图4 俄色果饮片、标准汤剂、配方颗粒匹配色谱图。
具体实施方式
[0016]本专利技术具体实施方式中使用的试剂、试药、设备均为已知产品，通过购买市售产品获得。其中俄色果（变叶海棠）配方颗粒为蔷薇科植物变叶海棠Malus toringoides(Rehd.) Hughes的干燥成熟果实经炮制并按标准汤剂的主要质量指标加工制成的配方颗粒，性状为淡棕色至红棕色的颗粒；气微，味酸、甘。具体的制备方法为：取俄色果（变叶海棠）饮片2000g，加水煎煮，滤过，滤液浓缩成清膏（干浸膏出膏率为25%～45%），加辅料适量，干燥（或干燥，粉碎），再加辅料适量，混匀，制粒，制成1000g，即得。
[0017] 实施例1 本专利技术俄色果配方颗粒的特征图谱检测1）对照品溶液的制备取枸杞酸、L
‑
苹果酸对照品，精密称定，加蒸馏水制成每1ml分别含0.25mg、0.5mg的混合溶液，作为对照品溶液。
[0018]2）供试品溶液的制备
取俄色果配方颗粒0.5g，研细，置具塞锥形瓶中，加蒸馏水15ml，超声处理（功率500W，频率40kHz）30min，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
[0019]3）分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。色谱条件如下：色谱柱：SunFire C18柱，规格4.6
ꢀ×
250 mm，5μm；检测波长：210 nm；柱温30℃，流速为0.5mL
∙
min
‑1；流动相：以乙腈为流动相A，以0.1%磷酸溶液为流动相B；梯度洗脱程序：0～18 min，1%
→
3%A；18～18.5 min，3%
→
4 %A；18.5～25min，4%
→
7%A；25～30min，7%
→
15%A；30～35min，15%
→
31%A。
[0020]4）分析色谱图供试品溶液的色谱图中应呈现8个特征峰，其中2个峰应分别与相应对照品参照物峰的保留时间相对应。与枸杞酸参照物峰相应的峰为S峰，计算峰1、峰2、峰3、峰6、峰7、峰8与S峰的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的
±
10%范围之内，规定值为：0.343（峰1）、0.413（峰2）、0.534（峰3）、1.173（峰6）、1.487（峰7）、1.800（峰8）。
[0021] 实施例2 本专利技术俄色果的特征图谱检测1）对照品溶液的制备取枸杞酸、L
‑
苹果酸对照品，精密称定，加蒸馏水制成每1ml分别含0.25mg、0.5mg的混合溶液，作为对照品溶液。
[0022]2）供试品溶液的制备取俄色果药材粉末1g，研细，置具塞锥形瓶中，加蒸馏水20ml，超声处理（功率500W，频率40kHz）45min，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
[0023]3）分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。色谱条件如下：色谱柱：Inertsil ODS
‑
3 C18柱，规格4.6
ꢀ×
250 mm，5μm；检测波长：210 nm；柱温30℃，流速为0.5mL
∙
min
‑1；流动相：以乙腈为流动相A，以0.1%磷酸溶液为流动相B；梯度洗脱程序：0～18 min，1%
→
3%A；18～18.5 min，3%
→
4 %A；18.5～25min，4%
→
7%A；25～30min，7%
→
15%A；30～35min，15%
→
31%A。
[0024]4）分析色谱图供试品溶液的色谱图中应呈现8个特征峰，其中2个峰应分别与相应对照品参照物峰的保留时间相对应。与枸杞酸参照物峰相应的峰为S峰，计算峰1、峰2、峰3、峰6、峰7、峰8与S峰的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的
±
10%范围之内，规定值为：0.343（峰1）、0.413（峰2）、0.534（峰3）、1.173（峰6）、1.487（峰7）、1.800（峰8）。
[0025] 实施例3 本专利技术俄色果标准汤剂的特征图谱检测1）参照物溶液的制备取枸杞酸、L
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苹果酸对照品，精密称定，加蒸馏水制成每1ml分别含0.25mg、0.5mg的混合溶液，作为对照品溶液。
[0026]2）供试品溶液的制备取俄色果标准汤剂的冻干粉末0.5g，研细，置具塞锥形瓶中，加蒸馏水20ml，超声处理（功率500W，频率40kHz）30min，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
[0027]3）分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种俄色果及其制剂的HPLC特征图谱检测方法，其特征在于：它包括如下步骤：1）对照品溶液的制备：取枸杞酸和L
‑
苹果酸对照品，加水溶解，即得对照品溶液；2）供试品溶液制备：取待检样品，加水提取，提取液过滤，取滤液，即得供试品溶液；3）分别吸取对照品溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图；色谱条件如下：色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：以乙腈为流动相A，以0.1%磷酸溶液为流动相B；梯度洗脱程序0～18 min，1%
→
3%A；18～18.5 min，3%
→
4 %A；18.5～25min，4%
→
7%A；25～30min，7%
→
15%A；30～35min，15%
→
31%A。2.根据权利要求1所述的HPLC特征图谱检测方法，其特征在于：步骤1）所述对照品溶液每1ml含枸杞酸0.1~0.5 mg、L
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苹果酸0.1~1mg；所述水为蒸馏水。3.根据权利要求1所述的HPLC特征图谱检测方法，其特征在于：步骤2）所述待检样品与水的质量体积比为0.5~1g：5~50ml。4.根据权利要求1或3所述的HPLC特征图谱检测方法，其特征在于：所述待检样品为俄色果药材、俄色果标准汤剂或俄色果配方颗粒。...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗枫，
申请(专利权)人：四川智佳成生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：