用于确定样品中的抗体的游离抗原的方法技术

本文报告了一种用于确定未稀释血清样品中的抗体的游离抗原的方法，所述方法包括以下步骤：a)将所述未稀释样品施加至其上已经固定了捕获抗体的固相以形成捕获抗体

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于确定样品中的抗体的游离抗原的方法
[0001]本专利技术属于药代动力学领域。更具体地说，本文报道了一种用于确定样品中治疗性抗体的游离抗原的测定，尤其是在治疗性抗体以高血清浓度存在的情况下。

技术介绍

[0002]Lee,J.W.,等人(AAPS J.13(2011)99
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110)报告称，支持药物开发的生物分析的主要驱动因素是数据的预期用途。测量循环中的mAb及其抗原配体(L)的可靠方法对于评估暴露
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应答关系以支持疗效和安全性评价以及剂量选择至关重要。配体结合测定(LBA)广泛用于分析蛋白质生物治疗药物和抗原配体(L)，以支持药代动力学/药效学(PK/PD)和安全性评估。特别是对于与L非共价结合的单克隆抗体药物(mAb)，体内可以存在多种形式的mAb和L，包括游离的mAb、游离的L以及mAb和L的单价和/或二价复合物。考虑到给药后体内发生的动态结合平衡的复杂性以及生物分析过程中平衡的多种扰动来源，很显然，体外定量感兴趣的形式(游离、结合或总的mAb和L)可能与体内的实际情况不同。原则上可以设计LBA试剂和测定形式来测量m本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于确定包含游离抗原、游离抗体和抗原
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抗体复合物的未稀释血清样品中的可以由抗体特异性结合的游离抗原的方法，其中所述方法包括以下步骤：a)将所述样品施加至其上已经固定了捕获抗体的固相以形成捕获抗体
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抗原复合物，其中所述捕获抗体与所述抗体竞争结合至所述抗原上的第一表位，b)向所述固相施加示踪抗体以形成捕获抗体
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抗原
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示踪抗体复合物，其中所述示踪抗体特异性结合至所述抗原上的第二表位，其中在所述抗原上，所述示踪抗体的表位不与所述捕获抗体的表位重叠，c)通过确定所述捕获抗体
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抗原
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示踪抗体复合物中的所述示踪抗体来确定所述抗体的所述游离抗原。2.根据权利要求1所述的方法，其中在步骤a)中，所述施加在结合至所述抗原的所述抗体的至多10％被所述捕获抗体替换的条件下进行，其中在步骤a)中，结合至所述抗原的所述抗体的至多10％被替换。3.根据权利要求1至2中任一项所述的方法，其中步骤a)为将所述样品施加至其上已经固定了捕获抗体的所述固相以形成捕获抗体
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抗原复合物，其中所述捕获抗体与所述抗体竞争结合至所述抗原上的第一表位，其中将所述样品与所述固相一起孵育240秒或更短。4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中特异性结合至所述抗原上的所述第一表位的所述抗体的抗原结合位点与所述抗原的复合物的半衰期为100秒或更短。5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述抗体为双特异性抗体；其中所述双特异性抗体包含与所述抗原上的所述第一表位特异性结...

【专利技术属性】
技术研发人员：G，
申请(专利权)人：豪夫迈，
类型：发明
国别省市：