一种金丝桃苷的定量检测方法及应用技术

本申请适用于药物检测技术领域，提供了一种金丝桃苷的定量检测方法及应用，本申请通过优化色谱条件获得具有简单快速、分离效果好、柱效高、耐用性良好、重现性优等优点的健儿清解液中金丝桃苷的专属含量测定检测方法；一方面，使用单波长检测方法，实验室可使用标配的可变波长紫外检测器便可执行，简单易行，降低仪器配置成本；另一方面，通过优化色谱柱的填料粒径、流动相种类及流动相洗脱程序等，提高色谱分离效率，得到更尖锐的峰形和更高的理论塔板数；再一方面，采用乙酸乙酯提取法，实现了待检成分的有效提取和干扰成分的有效净化，减少对色谱柱的损害。少对色谱柱的损害。少对色谱柱的损害。

【技术实现步骤摘要】
一种金丝桃苷的定量检测方法及应用


[0001]本申请属于药物检测
，尤其涉及一种金丝桃苷的定量检测方法及应用。

技术介绍

[0002]健儿清解液为中药成方制剂，具有清热解毒、祛痰止咳、消滞和中之功效。健儿清解液目前执行质量标准有2个，分别为卫生部《中药成方制剂》第十册(标准编号：WS3
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2015
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95)及药典业发[2003]522号、国家药品监督管理局颁布标准(标准编号：WS3
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2002),收载均为鉴别和检查项，无含量测定检测项目。
[0003]《中国医学报》2009年第四期刊载《健儿清解液中金丝桃苷和橙皮苷的HPLC鉴别》中研究和建立的方法仅为定性鉴别，未建立定量检测方法。《中国药品标准》2020，21(6)期刊载《HPLC法测定健儿清解液中绿原酸等4种成分的含量》，研究了健儿清解液中绿原酸、橙皮苷、川陈皮素和桔皮素4种成分的含量的检测方法，未对金丝桃苷检测方法进行研究。《中国药师》2020年第7期刊载《HPLC法测定健儿清解液中绿原酸、橙皮苷、金丝桃苷及苯甲酸含量》中建立了多组分含量测定的检测方法，但存在金丝桃苷响应值低，不能达到良好的方法重复性，且需要配备DAD检测器的高效液相色谱仪方可执行检测，测试要求高的问题。
[0004]因此，本专利技术为健儿清解液的专属性成分金丝桃苷的含量测定检测方法，对于健儿清解液产品质量控制具有重要的意义。
专利技术内容
[0005]本申请实施例的目的在于提供一种金丝桃苷的定量检测方法，旨在解决现有健儿清解液质量控制方法存在金丝桃苷响应值低，重复性差、仪器配置成本高等问题。
[0006]本申请实施例是这样实现的，一种金丝桃苷的定量检测方法，包括：
[0007]取金丝桃苷对照品溶液、供试品溶液，按照色谱条件，进样分析并记录色谱图，以外标法计算金丝桃苷的含量；
[0008]所述供试品溶液是通过乙酸乙酯对待检测样品进行萃取而得；
[0009]所述色谱条件包括：色谱柱所含填料的粒径为3.5μm；以乙腈
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0.1％甲酸为流动相；检测波长为354nm；梯度洗脱如下：0
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22min：乙腈由8％～12％递增至15％～18％，0.1％甲酸由88％～92％递减至82％～85％；22
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30min：乙腈由15％～18％递增至16％～19％，0.1％甲酸由82％～85％递减至81％～84％；30
–
60min：乙腈由16％～19％递增至20％～24％，0.1％甲酸由81％～84％递减至76％～80％。
[0010]本申请实施例的另一目的在于一种上述的金丝桃苷的定量检测方法在控制金丝桃苷相关药品质量中的应用。
[0011]本申请实施例通过优化色谱条件获得具有简单快速、分离效果好、柱效高、耐用性良好、重现性优等优点的健儿清解液中金丝桃苷的专属含量测定检测方法；一方面，使用单波长检测方法，实验室可使用标配的可变波长紫外检测器便可执行，简单易行，降低仪器配置成本；另一方面，通过优化色谱柱的填料粒径、流动相种类及流动相洗脱程序等，提高色
谱分离效率，得到更尖锐的峰形和更高的理论塔板数；再一方面，采用乙酸乙酯提取法，实现了待检成分的有效提取和干扰成分的有效净化，减少对色谱柱的损害。
附图说明
[0012]图1是本申请实施例1提供的对照品溶液色谱图；
[0013]图2是本申请实施例1提供的供试品溶液色谱图；
[0014]图3是本申请实施例2提供的对照品溶液色谱图；
[0015]图4是本申请实施例2提供的供试品溶液色谱图；
[0016]图5是本申请实施例3提供的对照品溶液色谱图；
[0017]图6是本申请实施例3提供的供试品溶液色谱图；
[0018]图7是本申请对比例1提供的对照品溶液图谱；
[0019]图8是本申请对比例1提供的供试品溶液图谱；
[0020]图9是本申请对比例2提供的对照品溶液图谱；
[0021]图10是本申请对比例2提供的供试品溶液图谱；
[0022]图11是本申请对比例3提供的供试品溶液图谱；
[0023]图12是本申请对比例4提供的供试品溶液图谱。
[0024]图13是本申请对比例4提供的供试品溶液图谱。
具体实施方式
[0025]为了使本申请的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本申请进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本申请，并不用于限定本申请。
[0026]目前官方法定标准均无金丝桃苷含量测定检测项目，亟需建立更具专属性的质量控制方法，且由于健儿清解液中金丝桃苷含量较低(拟定限度值：山楂：以金丝桃苷计，不得低于0.01mg/ml)，较难开发出一灵敏度高、分离效果好的定量检测方法。
[0027]《中国药师》2020年第7期刊载的《HPLC法测定健儿清解液中绿原酸、橙皮苷、金丝桃苷及苯甲酸含量》方法，存在以下问题和缺点：
[0028]1、由于绿原酸为与功能主治相关成分，苯甲酸为防腐剂，不宜作为含量测定选择的成分，且在检测过程中增加了绿原酸对照品、苯甲酸对照品成本。
[0029]2、与金丝桃苷保留时间相邻的干扰峰较多，方法中使用规格为250mm
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4.6mm、5μm的色谱柱，但流速使用0.8ml/min，不能达到该规格色谱柱最佳分离效果，分离效果较差。
[0030]3、健儿清解液中含有较高蔗糖成分，方法中未对供试品溶液进行适当净化，可能导致对色谱柱的严重损害，且影响色谱峰的分离效果。
[0031]4、健儿清解液中金丝桃苷含量较低，样品制备方法中样品量小，提取试剂较少和浓缩倍数较小，金丝桃苷响应值低，不能达到良好的方法重复性。
[0032]5、方法中使用3个检测波长(230nm、284nm、326nm)，需使用配备DAD检测器的高效液相色谱仪方可执行检测，对于仪器要求较高，目前DAD检测器并非常规实验室标配检测器。
[0033]6、方法中为同时确保橙皮苷有效检测，选择284nm波长，该波长金丝桃苷响应值较
低，峰形较差。
[0034]本申请为了解决现有健儿清解液质量控制方法的不足，提供了一种采用RP
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HPLC法测定健儿清解液中金丝桃苷专属方法，通过优化色谱条件获得具有简单快速、分离效果好、柱效高、耐用性良好、重现性优等优点的健儿清解液中金丝桃苷的专属含量测定检测方法；一方面，使用单波长检测方法，实验室可使用标配的可变波长紫外检测器便可执行，简单易行，降低仪器配置成本；另一方面，通过优化色谱柱的填料粒径、流动相种类及流动相洗脱程序等，提高色谱分离效率，得到更尖锐的峰形和更高的理论塔板数；再一方面，采用乙酸乙酯提取法，实现了待检成分的有效提取和干扰本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种金丝桃苷的定量检测方法，其特征在于，包括：取金丝桃苷对照品溶液、供试品溶液，按照色谱条件，进样分析并记录色谱图，以外标法计算金丝桃苷的含量；所述供试品溶液是通过乙酸乙酯对待检测样品进行萃取而得；所述色谱条件包括：色谱柱所含填料的粒径为3.5μm；以乙腈
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0.1％甲酸为流动相；检测波长为354nm；梯度洗脱如下：0
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22min：乙腈由8％～12％递增至15％～18％，0.1％甲酸由88％～92％递减至82％～85％；22
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30min：乙腈由15％～18％递增至16％～19％，0.1％甲酸由82％～85％递减至81％～84％；30
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60min：乙腈由16％～19％递增至20％～24％，0.1％甲酸由81％～84％递减至76％～80％。2.根据权利要求1所述的金丝桃苷的定量检测方法，其特征在于，所述色谱条件还包括：检测波长为354nm；流速为0.8～1.2mL/min；进样量为10～20μL；柱温为25～35℃。3.根据权利要求1所述的金丝桃苷的定量检测方法，其特征在于，所述色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，4.6*150mm，3.5μm。4.根据权利要求1所述的金丝桃苷的定量检测方法，其特征在于，所述供试品溶液通过将待检测样品经乙酸乙酯提取、干燥处理后，经甲醇溶解并...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄超，邓国峰，付豪，刘灿群，周勇胜，徐瑛雅，曾环想，
申请(专利权)人：国药集团致君深圳制药有限公司，
类型：发明
国别省市：