一种磷霉素氨丁三醇有关物质的检测方法以及应用技术

本申请适用于药物检测技术领域，提供了一种磷霉素氨丁三醇有关物质的检测方法以及应用，本申请提供的磷霉素氨丁三醇有关物质的检测方法具有如下优势：色谱系统更加稳定，磷霉素与各杂质保留时间较原方法稳定，使得采用相对保留时间对杂质进行定位更加准确；可以改善色谱峰型，使磷霉素与相邻杂质杂质D分离更佳，杂质D可准确检出；杂质B的检出不再受溶剂峰干扰，检出更准确；杂质检出个数多，可有效控制其他杂质(其他未知和已知杂质)；降低氨基柱的流失，色谱柱寿命延长，降低检测成本，利于产业化，增加企业竞争力。增加企业竞争力。增加企业竞争力。

【技术实现步骤摘要】
一种磷霉素氨丁三醇有关物质的检测方法以及应用


[0001]本申请属于药物检测
，尤其涉及一种磷霉素氨丁三醇有关物质的检测方法以及应用。

技术介绍

[0002]磷霉素氨丁三醇(fosfomycin trometamol)是磷霉素衍生物，以其安全性好、杀菌谱广、尿药浓度高、对细菌耐药选择压力低、与其他抗菌药物无交叉耐药性的优势，且可以降低联用抗生素的肾毒性，是一种值得推荐用于治疗妇女、儿童、老人、成年人急性单纯性下尿路感染及预防外科手术中尿路感染及经尿路诊断手法引起的感染的口服抗菌物。磷霉素氨丁三醇被作为单剂治疗急性单纯性下泌尿道感染的首选药物，在国外广泛应用。
[0003]目前磷霉素氨丁三醇原料药质量标准被欧洲药典(EP)、英国药典(BP)、美国药典(USP)、中国药典(ChP)等收载，制剂(散剂)仅中国药典收载，但有关物质项(分析方法及杂质限度)并没有列入散剂标准。
[0004]各国药典磷霉素氨丁三醇原料的质量标准中有关物质检测均采用高效液相色谱法，且色谱条件相同：色谱柱为氨丙基键合硅胶柱，流动相为10.89g/L磷酸二氢钾溶液，检测器为示差检测器。该色谱条件可以将杂质A、杂质B和杂质C有效检出，但是由于该色谱条件下因磷霉素色谱峰拖尾严重，磷霉素相邻杂质D被磷霉素包裹而不能被有效分离而不能够被检出，且氨丙基键合硅胶柱在纯水相流动相中极易水解，导致氨基柱的柱效快速下降，导致色谱系统不稳定，各杂质及主成分保留时间在使用过程中逐渐前移，使得采用相对保留时间对杂质定位变的困难，杂质B易被溶剂峰干扰儿导致积分不准确，且色谱柱的寿命极短。
[0005]除以上四个已知结构的杂质(杂质A、杂质B、杂质C、杂质D)外，磷霉素氨丁三醇原料药及其制剂中还可能存在其他杂质如杂质E和F以及含磷酸酯警示结构的潜在基因毒杂质。因磷霉素氨丁三醇无紫外吸收，各国药典中收载的有关物质方法检测器均为示差检测器，经过大量文献和专利检索可知，现有技术中虽然有用毛细管电泳、电喷雾离子阱质谱法和核磁共振(NMR)检测磷霉素氨丁三醇有关物质的报道，但是这两种方法因检测仪器设备的可及性问题而通用性差，检测成本高，产业化难度大等问题未被广泛采用。
[0006]各国药典方法均采用色谱柱为氨丙基键合硅胶柱，流动相为10.89g/L磷酸二氢钾溶液，检测器为示差检测器的分析系统，鉴于上述杂质是影响药品安全性和有效性的关键质量控制指标，因此，开发一种系统更加稳定、杂质分离度更佳、成本更低的且可准确检出的磷霉素氨丁三醇及其制剂有关物质的检测方法，对其质量控制及产业化具有非常重要的意义。

技术实现思路

[0007]本申请实施例的目的在于提供一种磷霉素氨丁三醇有关物质的检测方法，旨在解决现有的检测磷霉素氨丁三醇有关物质的方法存在通用性差，检测成本高，产业化难度大
等问题。
[0008]本申请实施例是这样实现的，一种磷霉素氨丁三醇有关物质的检测方法，包括：
[0009]在待测试磷霉素氨丁三醇样品中加入磷酸二氢钾溶液与乙腈
‑
甲醇溶液的混合液进行溶解并稀释处理，得到供试品溶液；
[0010]将供试品溶液用磷酸二氢钾溶液与乙腈
‑
甲醇溶液的混合液进行稀释处理，得到对照溶液；
[0011]将待测试磷霉素氨丁三醇样品用氢氧化钠溶液进行浸润以及加热处理后，加入磷酸二氢钾溶液与乙腈
‑
甲醇溶液的混合液进行溶解并稀释处理，得到系统适用性溶液；
[0012]将所述系统适用性溶液、对照溶液和供试品溶液分别注入液相色谱仪，按照色谱条件，进样分析并记录色谱图，以主成分自身对照法计算磷霉素氨丁三醇有关物质的含量；
[0013]所述色谱条件包括：以十八烷基键合硅胶为填充剂的色谱柱，所述磷酸二氢钾溶液的浓度为0.02～0.12mol/L；所述乙腈
‑
甲醇溶液中乙腈、甲醇的体积比为(0:100)～(20:80)；所述磷酸二氢钾溶液与乙腈
‑
甲醇溶液的体积比为(100:0)～(50:50)；流速为0.8ml/min～1.5ml/min；进样量为10μL～80μL；柱温为30℃～40℃，检测器温度为30℃～40℃。
[0014]本申请实施例的另一目的在于一种上述的磷霉素氨丁三醇有关物质的检测方法在控制磷霉素氨丁三醇相关药品质量中的应用。
[0015]本申请实施例在药典方法的基础上，优化色谱条件，提供了一种HPLC的磷霉素氨丁三醇及其制剂(散剂、和颗粒剂)有关物质控制方法，该方法具有如下优势：1)色谱系统更加稳定，磷霉素与各杂质保留时间较原方法稳定，使得采用相对保留时间对杂质进行定位更加准确；2)可以改善色谱峰型，使磷霉素与相邻杂质杂质D分离更佳，杂质D可准确检出；3)杂质B的检出不再受溶剂峰干扰，检出更准确；4)杂质检出个数多，可有效控制其他杂质(其他未知和已知杂质)；5)降低氨基柱的流失，色谱柱寿命延长，降低检测成本，利于产业化，增加企业竞争力。
附图说明
[0016]图1是本申请实施例1提供的色谱图；
[0017]图2是本申请实施例2提供的色谱图；
[0018]图3是本申请实施例3提供的色谱图；
[0019]图4是本申请实施例4提供的色谱图；
[0020]图5是本申请实施例5提供的色谱图；
[0021]图6是本申请实施例6提供的色谱图；
[0022]图7是本申请实施例7提供的色谱图。
具体实施方式
[0023]为了使本申请的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本申请进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本申请，并不用于限定本申请。
[0024]当前，现有的检测磷霉素氨丁三醇有关物质的方法均存在以下问题：1)磷霉素相邻杂质(如杂质D和其他杂质)被包裹，不能被有效分离而不能够被检出；2)色谱峰峰型差，
易拖尾，且杂质B易被溶剂峰干扰儿导致积分不准确；杂质检出个数少，不能有效控制其他杂质(其他未知和已知杂质)；3)色谱系统不稳定，各杂质及主成分保留时间在使用过程中逐渐前移，使得采用相对保留时间对杂质定位变的困难；4)传统的色谱系统导致氨基色谱柱流失严重，色谱柱柱效下降，色谱系统不稳定，色谱柱寿命极短。
[0025]本申请在药典方法的基础上，优化色谱条件，开发一种HPLC的磷霉素氨丁三醇及其制剂(散剂、和颗粒剂)有关物质控制方法，该方法具有如下优势：1)色谱系统更加稳定，磷霉素与各杂质保留时间较原方法稳定，使得采用相对保留时间对杂质进行定位更加准确；2)可以改善色谱峰型，使磷霉素与相邻杂质杂质D分离更佳，杂质D可准确检出；3)杂质B的检出不再受溶剂峰干扰，检出更准确；4)杂质检出个数多，可有效控制其他杂质(其他未知和已知杂质)；5)降低氨基柱的流失，色谱柱寿命延长，降低检测成本，利于产业化，增加企业竞争力。
[0026]本申请实施例提供了一种磷霉素氨丁三醇有关物质的检测方法，包括：...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种磷霉素氨丁三醇有关物质的检测方法，其特征在于，包括：在待测试磷霉素氨丁三醇样品中加入磷酸二氢钾溶液与乙腈
‑
甲醇溶液的混合液进行溶解并稀释处理，得到供试品溶液；将供试品溶液用磷酸二氢钾溶液与乙腈
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甲醇溶液的混合液进行稀释处理，得到对照溶液；将待测试磷霉素氨丁三醇样品用氢氧化钠溶液进行浸润以及加热处理后，加入磷酸二氢钾溶液与乙腈
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甲醇溶液的混合液进行溶解并稀释处理，得到系统适用性溶液；将所述系统适用性溶液、对照溶液和供试品溶液分别注入液相色谱仪，按照色谱条件，进样分析并记录色谱图，以主成分自身对照法计算磷霉素氨丁三醇有关物质的含量；所述色谱条件包括：以十八烷基键合硅胶为填充剂的色谱柱，所述磷酸二氢钾溶液的浓度为0.02～0.12mol/L；所述乙腈
‑
甲醇溶液中乙腈、甲醇的体积比为(0:100)～(20:80)；所述磷酸二氢钾溶液与乙腈
‑
甲醇溶液的体积比为(100:0)～(50:50)；流速为0.8ml/min～1.5ml/min；进样量为10μL～80μL；柱温为30℃～40℃，检测器温度为30℃～40℃。2.根据权利要求1所述的磷霉素氨丁三醇有关物质的检测方法，其特征在于，所述磷酸二氢钾溶液浓度为0.03～0.08mol/L。3.根据权利要求1所述的磷霉素氨丁三醇有关物质的检测方法，其特征在于，所述磷酸二氢钾溶液与乙腈
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甲醇溶液的体积比为60：40。4.根据权利要求1所述的磷霉素氨丁三醇有关物质的检测方法，其特征在于，所述乙腈
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甲醇溶液中乙腈、甲醇的体积比为5:95。5.根据权利要求1所述的磷霉素氨丁三醇有关物质的检测方法，其特征在于，所述色谱柱为AgilentZorbax
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NH2，250
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【专利技术属性】
技术研发人员：崔庆玲，潘红娟，周向荣，何晶晶，王绛玉，罗文杰，于晓阳，汤林熹，黄艳，曾环想，
申请(专利权)人：国药集团致君深圳制药有限公司，
类型：发明
国别省市：