一种泊沙康唑中手性异构体的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种泊沙康唑中手性异构体的检测方法，属于药物分析技术领域。本发明专利技术所述方法包括：1)配制泊沙康唑对照品溶液，配制时对照品用稀释剂溶解并稀释；2)配制供试品溶液，配制时供试品用稀释剂溶解并稀释；3)用高效液相色谱检测对照品溶液和供试品溶液，色谱条件为：采用以硅胶表面共价键合多糖衍生物为填料的色谱柱，流动相由二氯甲烷、异丙醇和二乙胺按49～55：44～50：0.1～2的体积比组成；4)根据供试品溶液的色谱图和泊沙康唑对照品溶液的色谱图，确定试品溶液中手性异构体的限度；以上步骤中涉及的稀释剂与流动相的组成相同。本发明专利技术所述方法能够有效分离泊沙康唑及其手性异构体，且灵敏度和准确度理想的。且灵敏度和准确度理想的。且灵敏度和准确度理想的。

【技术实现步骤摘要】
一种泊沙康唑中手性异构体的检测方法


[0001]本专利技术涉及一种泊沙康唑中手性异构体的检测方法，属于药物分析


技术介绍

[0002]泊沙康唑(posaconazole)是伊曲康唑的衍生物，为第二代三唑类抗真菌药物，原研产品由美国默沙东制药研制。泊沙康唑含有4个手性中心，除泊沙康唑外，还有15个手性异构体。含手性因素的化学药物的异构体在人体内的药理活性、代谢过程及毒性存在显著的差异。据文献报道，泊沙康唑的手性异构体的疗效不如泊沙康唑或具有一定毒性，考虑到用药的安全性和有效性，需要严格控制泊沙康唑中手性异构体的含量。
[0003]泊沙康唑的肠溶片剂型和注射液剂型已被列入我国第一批鼓励仿制药品目录建议清单。目前，《中华人民共和国药典》中还未有该产品的检验分析方法。经检索发现，现有技术多采用高效液相色谱检测泊沙康唑中手性异构体的含量。如公布号为CN106442807A的专利技术专利，公开了一种用高效液相色谱检测泊沙康唑手性异构体的方法，该方法采用以硅胶表面共价键合多糖衍生物为填料的色谱柱，用双流动相，即流动相A和流动相B进行梯度洗脱，流动相A为二元流动相，流动相B为三元流动相。该专利技术中确定的色谱条件虽可以较好地分离泊沙康唑及其手性异构体，但其流动相为双流动相，而且组成相对较为复杂。又如公布号为CN112903857A的专利技术专利，公开了一种有效检测泊沙康唑注射液中异构体的方法，包括以下步骤：步骤一，配制系统适用性溶液；步骤二，配制供试品溶液；步骤三，配置对照溶液；步骤四，设置色谱条件；步骤五，系统适用性要求；步骤六，检测方法；步骤七，数据对比计算，供试品溶液的色谱图中如有与杂质保留时间一致的色谱峰，其峰面积与对照溶液的主峰面积进行比较。该专利技术采用硅胶表面涂敷纤维素
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三(3,5
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二甲基苯基氨基甲酸酯)的手性色谱柱以及三元单流动相的色谱条件，虽能够较好地分离泊沙康唑及其对映异构体，但其灵敏度和准确度不够理想。

技术实现思路

[0004]本专利技术要解决的技术问题是提供一种能够有效分离泊沙康唑及其手性异构体，且灵敏度和准确度理想的泊沙康唑中手性异构体的检测方法。
[0005]为解决上述技术问题，本专利技术采用以下技术方案：
[0006]一种泊沙康唑中手性异构体的检测方法，包括以下步骤：
[0007]1)配制泊沙康唑对照品溶液，配制时对照品用稀释剂溶解并稀释；
[0008]2)配制供试品溶液，，配制时供试品用稀释剂溶解并稀释；
[0009]3)用高效液相色谱检测对照品溶液和供试品溶液，色谱条件为：采用以硅胶表面共价键合多糖衍生物为填料的色谱柱，流动相由二氯甲烷、异丙醇和二乙胺按49～55：44～50：0.1～2的体积比组成；
[0010]4)根据供试品溶液的色谱图和泊沙康唑对照品溶液的色谱图，确定试品溶液中手性异构体的限度；
[0011]以上步骤中涉及的稀释剂与流动相的组成相同。
[0012]泊沙康唑有15个手性异构体，采用本专利技术所述方法至少可以有效分离PSK
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E、PSK
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DS
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2和PSK
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DS
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9三种手性异构体中的一种或两种以上的组合，所述PSK
‑
E、PSK
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DS
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2和PSK
‑
DS
‑
9三种手性异构体的结构分别如下：
[0013][0014]作为优选，所述的流动相由二氯甲烷、异丙醇和二乙胺按52：48：0.1的体积比组成，所述的稀释剂由二氯甲烷、异丙醇和二乙胺按52：48：0.1的体积比组成。
[0015]作为优选，高效液相色谱检测时的进样体积为5～15μL，流动相流速为0.4～0.6mL，柱温为22～32℃，检测波长为254～265nm。进一步优选进样体积为10μL，流动相流速为0.5mL，柱温为27℃，检测波长为262nm。
[0016]作为优选，上述步骤1)中，在配制泊沙康唑对照品溶液时，每1mL泊沙康唑对照品溶液含2.5～7.5μg泊沙康唑；进一步优选每1mL泊沙康唑对照品溶液含5μg泊沙康唑。
[0017]作为优选，上述步骤2)中，在配制供试品溶液时，每1mL供试品溶液含2.5mg泊沙康唑。本专利技术中可以是以泊沙康唑肠溶片或泊沙康唑注射液为供试品。
[0018]根据本专利技术提供的高效液相色谱条件，本领域技术人员可以选择适宜的计算方法计算泊沙康唑含量和其手性异构体的限度，所述计算方法包括但不限于内标法、外标法。优选外标法，进一步采用加校正因子(RRF，也称相对响应因子)的外标法。
[0019]本专利技术的一些实施例采用泊沙康唑主成分为对照品的外标法确定手性异构体的限定(相对于使用多个杂质对照品的外标法可以节约对照品和人工成本)，具体方法如下：
[0020]a)配制流动相和稀释剂，备用；其中流动相由二氯甲烷、异丙醇和二乙胺按52：48：0.1的体积比组成，稀释剂的组成与流动相相同；
[0021]b)配制泊沙康唑对照品溶液：取泊沙康唑对照品适量，加稀释剂溶解并稀释制成
每1mL含泊沙康唑5μg的溶液，作为泊沙康唑对照品溶液；
[0022]c)配制供试品溶液：取泊沙康唑肠溶片适量或泊沙康唑注射液适量，置于容量瓶中，加入适量稀释剂，超声，用稀释剂稀释至刻度，摇匀，离心，取上清液作为供试品溶液；
[0023]d)配制系统适应性溶液：是取泊沙康唑和手性异构体适量，用稀释剂溶解并稀释制成每1mL分别含泊沙康唑2.5mg、手性异构体各5μg的溶液，以该溶液作为系统适用性溶液；
[0024]e)在系统适应性通过后，分别取上述制备的泊沙康唑对照品溶液和供试品溶液10μL注入高效液相色谱检测系统中，完成泊沙康唑中手性异构体的检测。
[0025]其中高效液相色谱条件如下：
[0026]采用以硅胶表面共价键合多糖衍生物为填料的色谱柱，以流动相进行洗脱。高效液相色谱检测时的进样体积为10μL，流动相流速为0.5mL，柱温为27℃，检测波长为262nm。
[0027]f)根据步骤e)检测的色谱结果，采用加校正因子的外标法计算手性异构体杂质含量。其中，杂质手性异构体PSK
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E的RRF＝0.99，杂质手性异构体PSK
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DS
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2的RRF＝0.99，杂质手性异构体PSK
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DS
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9的RRF＝0.98。
[0028]试验结果表明，本专利技术选用的色谱条件能较好地分离主成分及其异构体，方法简便易行，流动相组成简单，能实现在同一色谱条件下检测至少3个异构体的总杂限度，更好地监控泊沙康唑原料药的质量，达到质量控制的目的。
附图说明
[0029]图1为本专利技术所述方法中使用的空白溶剂的高效液相色谱图。
[0030]图2为本专利技术所述方法中使用的空白辅料的高效本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种泊沙康唑中手性异构体的检测方法，包括以下步骤：1)配制泊沙康唑对照品溶液，配制时对照品用稀释剂溶解并稀释；2)配制供试品溶液，配制时供试品用稀释剂溶解并稀释；3)用高效液相色谱检测对照品溶液和供试品溶液，色谱条件为：采用以硅胶表面共价键合多糖衍生物为填料的色谱柱，流动相由二氯甲烷、异丙醇和二乙胺按49～55：44～50：0.1～2的体积比组成；4)根据供试品溶液的色谱图和泊沙康唑对照品溶液的色谱图，确定试品溶液中手性异构体的限度；以上步骤中涉及的稀释剂与流动相的组成相同。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征是，所述的手性异构体为PSK
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E、PSK
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DS
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2和PSK
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DS
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【专利技术属性】
技术研发人员：刘婷，莫秀芬，刘彪，刘铭恒，潘梅，蒋文晗，
申请(专利权)人：桂林南药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：