一种3M综合征致病基因CUL7复合杂合突变位点的应用及其诊断试剂制造技术

本发明专利技术提供了一种3M综合征致病基因CUL7复合杂合突变位点的应用及其诊断试剂，属于基因诊断技术领域。本发明专利技术首次确认CUL7:NM_014780.5:exon3:c.616C>A和exon7:c.1825G>A位点复合杂合突变可以导致3M综合征。因此，本发明专利技术提供了一种3M综合征致病基因CUL7复合杂合突变位点c.616C>A和c.1825G>A在制备3M综合征诊断试剂或制备预防和/或治疗3M综合征靶点药物中的应用。本发明专利技术还提供了相应诊断试剂可以用于3M综合征的遗传学诊断和优生优育指导。以用于3M综合征的遗传学诊断和优生优育指导。以用于3M综合征的遗传学诊断和优生优育指导。

【技术实现步骤摘要】
一种3M综合征致病基因CUL7复合杂合突变位点的应用及其诊断试剂


[0001]本专利技术属于基因诊断
，具体涉及一种3M综合征致病基因CUL7复合杂合突变位点的应用及其诊断试剂。

技术介绍

[0002]3M综合征(OMIM 273750)是于1975年由5位科学家报道，并以前3位作者(Miller JD，McKusick VA，Malvaux P)名字的首字母命名。该病是一种罕见的常染色体隐性遗传病，其最显著的临床特征是从宫内开始的严重的生长迟缓，出生身长大多为40～42cm，头围大，生后无追赶性生长，最终身高低于正常均值5～6倍标准差。女性性腺功能正常，男性睪丸体积小及精液异常，可存在性腺功能紊乱及生育功能低下或是不孕，少数男性可有尿道下裂。颌面部特点：三角脸，前额突出，上颌骨发育不全，高颧弓，眉毛浓密，鼻头厚，长人中，突唇，尖下巴，舌体中间裂缝，牙齿萌出延迟及牙釉质钙化不全。影像学特点：长骨干骺端压缩变形，高位椎体缩短，胸椎椎体前楔入，胸椎后侧凸，隐形脊柱裂，小骨盆，小髂翼，伴有纤细水平肋的宽胸骨，骨龄稍微延迟。其他特点：颈部短宽，斜方肌突出，胸骨畸形，方肩，翼状肩胛骨，脊柱前凸，小指短，脚踝突出，关节松动。冠状缝扁平化，眼距缩短，肘关节发育不全，尺骨短，第二掌骨假骨骺，小指弯曲，髋关节脱位。有研究通过对3M综合征患者下一代测序进行产前及早期诊断，显示中国3M综合征患者新的临床表现，如早期的运动发育延迟，下眼睑脂肪垫，骨龄为延迟。
[0003]3M综合征致病基因包括CUL7(Cullin7)、OBSL1(Obscurin
‑
Like 1)和CCDC8(Coiled
‑
coil domain containing 8，CCDC8/P90)，其中CUL7基因突变导致的3M综合征占84％。研究表明CUL7基因是3M综合征最常见的、首位致病候选基因。CUL7基因(MIM 609577)是定位于染色体6p21.1，基因长16.2kb，包含26各外显子和25个内含子，编码1668个氨基酸。CUL7、OBSL1、CCDC8在一个信号通路中，该信号通路与人类的生长发育有重要联系。下调CUL7后，细胞的有丝分裂出现诸如微管运动障碍、前中期停滞、出现4倍体、有丝分裂细胞死亡等问题。这种现象在CUL7突变的3M综合症细胞中也出现，但在野生型细胞中没有。提示3M综合症蛋白复合物与有丝分裂中微管运动和基因组的完整性出现问题有关，也就可以解释3M综合症中出现的身体畸形现象。一定程度的GH抵抗或缺乏可能与3M综合征有关，3M综合征可能与GH、IGF1和IGF结合蛋白的失调有关，或许这是其矮小的原因。
[0004]基因突变是导致疾病发生发展的重要遗传基础，基因诊断是确诊3M综合征的重要遗传学标准。临床上需要针对不同突变建立相应的检测技术用于明确病因和疾病诊断。

技术实现思路

[0005]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种3M综合征致病基因CUL7复合杂合突变位点的应用及其诊断试剂，可将3M综合征患者、携带者和正常人群区分开。
[0006]本专利技术提供了一种3M综合征致病基因CUL7复合杂合突变位点c.616C>A和c.1825G
>A在制备3M综合征诊断试剂或制备预防和/或治疗3M综合征靶点药物中的应用。
[0007]本专利技术提供了一种用于3M综合征基因诊断的试剂，所述试剂是扩增CUL7复合杂合突变位点c.616C>A和c.1825G>A的引物，包括核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的CUL7
‑
1F、核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示的CUL7
‑
1R、核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示的CUL7
‑
2F、核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示的CUL7
‑
2R。
[0008]优选的，所述试剂包括测序引物；所述测序引物包括核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示的CUL7
‑
Seq1F、核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示的CUL7
‑
Seq1R、核苷酸序列如SEQ ID NO:7所示的CUL7
‑
Seq2F、核苷酸序列如SEQ ID NO:8所示的CUL7
‑
Seq2R。
[0009]本专利技术提供了，所述试剂包括PCR扩增试剂。
[0010]本专利技术提供了所述的试剂在制备3M综合征诊断试剂盒中的应用。
[0011]优选的，所述诊断的方法为利用所述诊断试剂盒检测样本中基因突变位点的基因型来诊断个体是否患有3M综合征，所述基因突变位点是CUL7:NM_014780.5:exon3:c.616C>A和exon7:c.1825G>A；检测结果为“c.616C>A和c.1825G>A”复合杂合突变，则诊断受试个体为3M综合征。
[0012]优选的，所述样本为血液。
[0013]本专利技术提供了一种3M综合征诊断试剂盒，所述诊断试剂盒包括所述的试剂。
[0014]本专利技术提供了一种3M综合征致病基因CUL7复合杂合突变位点c.616C>A和c.1825G>A在制备3M综合征诊断试剂或制备预防和/或治疗3M综合征靶点药物中的应用。本专利技术通过外显子组测序技术首次发现了CUL7:NM_014780.5:exon3:c.616C>A和exon7:c.1825G>A位点突变可以导致3M综合征发病。一方面，通过检测受试者是否携带有上述突变，用于筛查或诊断3M综合征的遗传学诊断，以指导治疗。特别地，本专利技术所提供的诊断试剂盒可用于快速、有效地预测或诊断3M综合征。另一方面，本专利技术为3M综合征的发病机制研究奠定了重要基础，为3M综合征患者的治疗提供全新的理论依据。第三方面，本专利技术可以为治疗3M综合征提供可能的药物靶点。
附图说明
[0015]图1为3M综合征1号家系遗传图谱；其中，表示男性携带者，表示女性携带者，
●
表示女性患者，表示先证者。
[0016]图2为利用Sanger测序检测1号家系CUL7:NM_014780.5:exon3:c.616C>A位点基因型的结果图，1号家系中先证者、先证者父亲、先证者妹妹为c.616C>A杂合突变(测序图中箭头所指为突变发生位置)；
[0017]图3为利用Sanger测序检测1号家系CUL7:NM_014780.5:exon7:c.1825G>A位点基因型的结果图，1号家系中先证者及先证者母亲为c.1825G>A杂合突变(测序图中箭头所指为突变发生位置)；
[0018]图4为3M综合征2号家系遗传图谱。其中，表示男性携带者，表示女性携带者，
●
表示女性患者，表示先证者；
本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种3M综合征致病基因CUL7复合杂合突变位点c.616C>A和c.1825G>A在制备3M综合征诊断试剂或制备预防和/或治疗3M综合征靶点药物中的应用。2.一种用于3M综合征基因诊断的试剂，其特征在于，所述试剂是扩增CUL7复合杂合突变位点c.616C>A和c.1825G>A的引物，包括核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的CUL7
‑
1F、核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示的CUL7
‑
1R、核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示的CUL7
‑
2F、核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示的CUL7
‑
2R。3.根据权利要求2所述用于3M综合征基因诊断的试剂，其特征在于，所述试剂包括测序引物；所述测序引物包括核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示的CUL7
‑
Seq1F、核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示的CUL7<...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾桥，刘亚宁，伊宁，
申请(专利权)人：湖南家辉生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：