一种用于精神分裂症诊断的环状RNA标志物及试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种精神分裂症早期诊断标志物的组合物，所述标志物的组合物包括hsa_circ_0004442、hsa_circ_MYO9A

【技术实现步骤摘要】
一种用于精神分裂症诊断的环状RNA标志物及试剂盒


[0001]本专利技术涉及分子生物学领域，特别涉及一种用于精神分裂症诊断的环状RNA标志物及试剂盒。

技术介绍

[0002]精神分裂症影响全球约1％人口，精神病院80％～90％以上的住院病人为精神分裂症患者。精神分裂症的病因非常复杂，截止目前也没有明确的结论。不论精神分裂症的遗传学研究还是神经影像学研究，均无法解释该疾病的所有病理生理现象。除了精神分裂症的病因尚不清楚之外，其诊断也存在争议。同其他主要精神疾病一样，精神分裂症的诊断标准主要基于症状和体征，而非病理和生理基础，也无相关的生理、生化诊断指标。因此，探究精神分裂症的生物标志物和发病机制已成为精神疾病研究的热点。
[0003]细胞外囊泡是活细胞分泌到细胞外基质中的一种直径约30～150nm的膜性囊泡，广泛存在于血液等各种体液之中。细胞外囊泡具有膜性囊泡结构，所以可以保护其内含物在通过长时间、远距离的运输不受降解，仍能保持其生物活性。细胞外囊泡能够整合到细胞膜上，也可以通过血脑屏障。
[0004]细胞外囊泡包含许多种类的RNAs，例如miRNA、mRNA和circRNAs等。circRNAs是mRNA在剪接过程中形成的一类的闭合环状RNA分子，其不具有5
‘
末端帽子和3
’
末端poly(A)尾巴，多数属于非编码RNA分子，少数也能够翻译成蛋白。circRNAs因其特殊结构，不易被核酸外切酶降解，要比血液中的线性RNA更加稳定。circRNAs在真核细胞和组织中特异性表达，与相应的miRNA结合，通过充当miRNA的海绵，从而调节mRNA的表达。随着下一代测序技术的发展，已证实circRNAs在细胞增殖、凋亡、转移和炎症等关键生物学过程中发挥特定的生物学作用。CircRNAs在哺乳动物的大脑中尤其丰富，可能在参与神经发育和功能的发挥、维持大脑健康和预防神经精神疾病的发生中扮演重要角色。多项研究证实，circRNAs是正常的发育过程、生理和疾病状态，包括癌症、精神疾病和心血管疾病发生中的重要调节因子。同时，也有研究揭示了circRNAs与神经系统疾病之间的关系。目前已证实circRNAs参与多种神经精神疾病，如精神分裂症、抑郁症、阿尔茨海默病(AD)、癫痫和帕金森病(PD)等疾病的发生和发展。
[0005]有研究表明，在精神分裂症患者的外周血中发现了异常表达的circRNAs，可能参与了精神分裂症的发病过程。姚等人(2019)证实，hsa_circRNA_104597在精神分裂症患者外周血单核细胞(PBMC)中的表达水平显着下调；经抗精神病药物治疗8周后，hsa_circRNA_104597的表达水平变为显着上调；因此，揭示了hsa_circRNA_104597可以作为精神分裂症诊断和治疗潜在的生物标志物。
[0006]尽管现有技术中存在利用circRNAs作为标志物来诊断精神分裂症的技术方案，但其效果却不尽如人意，主要体现在特异性和灵敏度等相关指标偏低。因此，寻找一种更好的circRNAs标志物已成为当务之急。

技术实现思路

[0007]本专利技术的一个方面，是针对现有技术中精神分裂症的诊断标志物存在特异性和灵敏度等相关指标偏低的缺陷，提供了一种用于精神分裂症诊断的环状RNA标志物及试剂盒。
[0008]本专利技术选择了20个候选circRNAs，利用RT
‑
qPCR检查了它们在96名未用药物治疗的精神分裂症患者和120名性别和年龄匹配的健康对照者的血清细胞外囊泡中的表达。结果表明，有11个circRNAs在未用药物治疗的精神分裂症患者血清细胞外囊泡中存在异常表达。与96名未用药的精神分裂症患者比较，8个circRNAs在经利培酮治疗4周后的48例精神分裂症患者的血清细胞外囊泡中的表达显著改变(P<0.01)，可见利培酮对其表达是有影响的，可能参与了精神分裂症的发生、发展过程。
[0009]本专利技术提供的技术方案为：
[0010]一种标志物的组合物，所述标志物的组合物包括hsa_circ_0004442、hsa_circ_MYO9A
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66和hsa_circ_CDR1as三种circRNA；
[0011]所述标志物的组合物为血清细胞外囊泡来源的circRNA。
[0012]在本专利技术的某些实施方式中，为了提高所述标志物的组合物的某些性能，所述组合物还可以包含其他标志物。但只要包含上述hsa_circ_0004442、hsa_circ_MYO9A
‑
66和hsa_circ_CDR1as三种circRNA，即可以实现本专利技术的目的。
[0013]作为优选，在本专利技术的某些实施方式中，上述标志物的组合物还可以包括选自hsa_circ_0001495,hsa_circ_0042174,has_circRNA_101836,hsa_circ_0004669,hsa_circ_HP1BP3
‑
7,hsa_circ_TOP1
‑
10,hsa_circ_ZNF236_2或hsa_circ_GPR137B中的一种或几种。
[0014]作为优选，在本专利技术的一个实施方式中，上述标志物的组合物由hsa_circ_0004442、hsa_circ_MYO9A
‑
66和hsa_circ_CDR1as三种circRNA组成。
[0015]在本专利技术中，本专利技术人发现，检测受试者血清细胞外囊泡中的上述标志物组合物，更可以准确反映脑部异常的病理状态，是非常合适的神经精神疾病的生物标志物，并且具有更好的准确性、特异性和敏感性。
[0016]因此，在本专利技术的实施方式中，上述标志物的组合物为血清细胞外囊泡来源的circRNA。
[0017]本专利技术的另一个方面，是提供了一种产品，所述产品的功能为能够检测上述标志物的组合物的存在和/或水平。
[0018]本专利技术的另一个方面，是提供了一种试剂盒，所述试剂盒包含直接或间接检测上述标志物的组合物的产品。同时，上述试剂盒中还包括了必要的组件，例如，buffer、试剂盒说明书，等。
[0019]作为优选，在本专利技术的某些实施方式中，上述产品可以包括检测所述标志物的组合物的引物或探针；
[0020]更优选地，在本专利技术的一个实施方式中，上述引物为如SEQ ID No.1
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2所示的引物对、如SEQ ID No.3
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4所示的引物对和如SEQ ID No.5
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6所示的引物对。
[0021]本专利技术的另一个方面，是提供了上述标志物的组合物、上述试剂盒或上述RNA芯片在制备研究、预测、检测、诊断或辅助诊断精神分裂症的产品中的用途。
[0022]本专利技术的另一个方面，是提供了一种诊断精神分裂症的方法，包括以下步骤：
[0023]步骤1)获取未用药的精神分裂症患者的血清细胞外囊泡样本；
[0024]步骤本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种标志物的组合物，其特征在于，所述标志物的组合物包括hsa_circ_0004442、hsa_circ_MYO9A
‑
66和hsa_circ_CDR1as三种circRNA；所述标志物的组合物为血清细胞外囊泡来源的circRNA。2.根据权利要求1所述的标志物的组合物，其特征在于，所述标志物的组合物还包括选自hsa_circ_0001495,hsa_circ_0042174,has_circRNA_101836,hsa_circ_0004669,hsa_circ_HP1BP3
‑
7,hsa_circ_TOP1
‑
10,hsa_circ_ZNF236_2或hsa_circ_GPR137B中的一种或几种。3.根据权利要求1所述的标志物的组合物，其特征在于，所述标志物的组合物由hsa_circ_0004442、hsa_circ_MYO9A
‑
66和hsa_circ_CDR1as三种circRNA组成。4.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含直接或间接检测如权利要求1～3任意一项中所述标志物的组合物的产品。5.根据权利要求4所述的试剂盒...

【专利技术属性】
技术研发人员：贺宽军，郭闯，郭猛，吕海冰，
申请(专利权)人：内蒙古民族大学，
类型：发明
国别省市：