铱配合物及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了式(Ⅰ)的阳离子与阴离子形成的铱配合物。本发明专利技术还公开了该铱配合物的制备方法及用途。本发明专利技术公开的化合物可与革兰氏阳性菌表面的LTA键和，从而实现对革兰氏阳性菌的特异选择性识别。的特异选择性识别。的特异选择性识别。

【技术实现步骤摘要】
铱配合物及其制备方法与应用


[0001]本专利技术涉及生物检测
，尤其涉及一种铱配合物及其制备方法与应用。

技术介绍

[0002]根据细菌在革兰氏染色后颜色的不同，将细菌分为革兰氏阳性菌(染色为紫色)和革兰氏阴性菌(染色为粉色)，这两类细菌的主要区别在于细胞壁结构不同。革兰氏阳性菌的细胞壁较厚，主要有肽聚糖(Petidoglycan,PG)和脂磷壁酸(Lipoteichoic acid，LTA)。相比之下，革兰氏阴性菌的细胞壁更薄，结构更复杂，除肽聚糖外，还含有独特的外膜和脂多糖。迄今为止，由革兰氏阳性菌(G
+
)引起的细菌感染目前是导致人类病发甚至死亡的最主要原因之一。G
+
引起多种感染，包括如皮肤和软组织感染、手术部位感染、血流感染和肺炎感染等，这些感染与心内膜炎、肺炎、关节炎、骨髓炎及败血症等疾病密切相关。此外，在肿瘤细胞中的一些G
+
可能会降低药物疗效，并引起化疗药物耐药性的产生。因此开发快速、灵敏检测G
+
的荧光探针应用于临床诊断、环境监测和食品药品分析等领域，对维护人类生命健康和公共卫生安全起着至关重要的意义。
[0003]目前，G
+
鉴定的主要方法有传统的革兰氏染色法、聚合酶链反应法(PCR)、核酸相关的检测法、免疫学相关技术和表面增强拉曼光谱法(SERS)等，这些方法存在前期预处理时间长、准确度低、操作复杂、需要大型仪器等缺点。与上述方法相比，荧光检测技术具有灵敏度高、响应速度快、无创伤性、可实时检测等优点，成为一种可替代的方法应用于细菌检测和鉴定。

技术实现思路

[0004]本专利技术所要解决的技术问题在于，提供一种铱配合物及其制备方法与应用，该铱配合物对革兰氏阳性菌具有特异选择识别效果。
[0005]具体的，本专利技术提供了式(Ⅰ)所示的阳离子与阴离子形成的铱配合物；
[0006][0007]具体的，本专利技术的铱配合物并不限定阴离子的种类，本领域常规阴离子均能实现
本专利技术目的，尤其是无机盐阴离子，如ClO4‑
、Cl
‑
、PF6‑
等，但不限于此。优选的阴离子为Cl
‑
和/或ClO4‑
。
[0008]本专利技术还提供了一种上述铱配合物的制备方法，其包括以下步骤：
[0009](1)将1,10
‑
邻菲罗啉
‑
5,6
‑
二酮、乙酸铵、冰醋酸与3
‑
氯苯胺，在氩气氛围下混合加热3～5h并冷凝回流，待混合物冷却至20～40℃后加入水，用碱中和，抽滤，收集沉淀，用水和乙醚洗涤后得到粗产物；
[0010](2)将粗产物用乙醇溶解，用60
‑
100目的硅胶装柱，以乙醇作为淋洗剂淋洗，收集黄色组分，旋转蒸发得到中间产物(3
‑
CPIPBA)；
[0011](3)将所述中间产物与[Ir(ppy)2Cl2]·
2H2O加入到体积比为3:1的二氯甲烷与甲醇的混合溶液中，在氩气保护下加热回流6～9h，冷却至20～40℃后滴加阴离子盐的饱和溶液产生沉淀，过滤，产物采用中性氧化铝柱提纯，以体积比为10:1的乙腈与乙醇混合溶液作为淋洗液进行洗脱，干燥得到铱配合物成品。
[0012]具体的，在本专利技术的一个实施例之中，阴离子无机盐为NaClO4或NH4Cl，但不限于此。
[0013]本专利技术还提供了上述的铱配合物在检测革兰氏阳性菌中的应用。具体的，本专利技术制备得到的铱配合物可与革兰氏阳性菌表面的LTA键和，从而实现对革兰氏阳性菌的特异选择识别。
[0014]其中，革兰氏阳性菌为金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌或粪肠球菌，但不限于此。
[0015]本专利技术还提供了上述的铱配合物在区分革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌和/或真菌中的应用。
[0016]其中，革兰氏阳性菌为金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌或粪肠球菌，但不限于此。革兰氏阴性菌为大肠杆菌、沙门氏菌或奇异变形杆菌，但不限于此。真菌为白色念珠菌，但不限于此。
[0017]相应的，本专利技术还公开了一种用于检测革兰氏阳性菌的荧光探针，其包括上述的铱配合物。
[0018]相应的，本专利技术还公开了一种用于检测革兰氏阳性菌的试剂盒，其包括上述的荧光探针。
[0019]实施本专利技术，具有如下有益效果：
[0020]本专利技术提供的铱配合物可与革兰氏阳性菌表面的LTA键和，从而实现对革兰氏阳性菌的特异选择识别。
附图说明
[0021]图1是本专利技术实施案例1中铱配合物的结构表征质谱图；
[0022]图2是本专利技术实施例1中铱配合物的氢谱图；
[0023]图3是本专利技术实施例2中铱配合物对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌的荧光滴加实验结果图；
[0024]图4是本专利技术实施例3中铱配合物对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌的共聚焦成像实验结果图；
[0025]图5是本专利技术实施例4中铱配合物对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、真菌的流式细胞术实验结果图；
[0026]图6是本专利技术实施例5中铱配合物与BODIPY
‑
TR
‑
cadaverine竞争LTA实验结果图。
具体实施方式
[0027]为使本专利技术的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图及具体实施方式对本专利技术作进一步地详细描述。
[0028]实施例1铱配合物的合成
[0029](1)3
‑
CPIPBA的合成方法：
[0030]以1,10
‑
邻菲罗啉
‑
5,6
‑
二酮、乙酸铵、3
‑
氯苯胺与冰醋酸在氩气氛围下混合加热冷凝回流4小时，混合物冷却至室温后加入去离子水，用25％氨水中和，抽滤，收集黄色沉淀并用水和乙醚洗涤，得到相应粗产物。粗产物用少量的乙醇溶解，用硅胶(60
‑
100目)装柱，乙醇作为淋洗剂，收集黄色组分，旋转蒸发得到黄色粉末4
‑
(1
‑
(3
‑
氯苯基)
‑
1H咪唑并[4,5
‑
f][1,10]菲咯啉
‑2‑
基)苯甲酸(4
‑
(1
‑
(3
‑
chlorophenyl)
‑
1H
‑
imidazo[4,5
‑
f][1,10]phenanthrolin
‑2‑
yl)benzoic acid，即配体3
‑
CPIPBA)。
[0031]该化合物的Anal.Calcd for C
26
H
15
N4O2Cl:C,69.26；H,3.35；N,本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.式(Ⅰ)的阳离子与阴离子形成的铱配合物；2.如权利要求1所述的铱配合物，其特征在于，所述阴离子选用无机盐阴离子。3.如权利要求1或2所述的铱配合物，其特征在于，所述阴离子选用Cl
‑
和/或ClO4‑
。4.如权利要求1至3任一项所述的铱配合物在检测革兰氏阳性菌中的应用。5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述革兰氏阳性菌为金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌或粪肠球菌。6.如权利要求1至3任一项所述的铱配合物在区分革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌和/或真菌中的应用。7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述革兰氏阳性菌为金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌或粪肠球菌，所述革兰氏阴性菌为大肠杆菌、沙门氏菌或奇异变形杆菌，所述真菌为白色念珠菌。8.一种用于检测革兰氏阳性菌的荧光探针，其特征在于，包括如权利要求1至3任一项所述的铱配合物。9.一种用于检测革兰氏阳性菌的试剂盒，其特征在于，包括如权利要求5...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐丽，刘梦灵，邓沛沛，宋文竹，
申请(专利权)人：广东药科大学香港大学中山生物医药创新平台，
类型：发明
国别省市：