一种秋水仙碱杂质F的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种秋水仙碱杂质F(去甲秋水仙碱)的检测方法。本发明专利技术具有较高的系统适用性，同时在专属性、定量限、检测限、线性范围以及重复性上表现出无可拟比的优势，具有较高的精密度。的精密度。

【技术实现步骤摘要】
一种秋水仙碱杂质F的检测方法


[0001]本专利技术属于化学药物分析检测领域，具体涉及一种秋水仙碱杂质F的检测方法。

技术介绍

[0002]秋水仙碱(Colchicine)为百合科植物丽江山慈菇Iphigenia indica Kunthet Benth.的球茎中提取得到的一种生物碱，主要用于抗痛风病。本品在中国药典、欧洲药典和美国药典中均有收载，且各国药典秋水仙碱原料药标准均收载了杂质F，都采用与三价铁显色法检查。结构式分别如下：
[0003][0004]显色法方法专属性差，无法给出具体杂质含量数值，片剂中由于辅料干扰，无法采用该法测定杂质F；另采用药典有关物质检查色谱条件，杂质F峰形差，积分不准确。本专利技术采用HPLC法测定秋水仙碱中杂质F的含量。峰形良好，专属性强，不受其他杂质干扰，方法可靠，能计算出杂质具体含量值。

技术实现思路

[0005]专利技术目的：本专利技术的目的是提供一种秋水仙碱及其片剂中杂质F的HPLC检测方法，使其专属性、定量限、检测限、线性范围、重复性、准确度等方面完全符合标准并且具有较高的精密度。
[0006]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种秋水仙碱杂质F的检测方法，其特征在于，通过液相色谱法检测秋水仙碱及其片剂中杂质F的含量；
[0007]所述杂质F为去甲秋水仙碱，化学名称为N
‑
(10
‑
羟基
‑
1,2,3
‑
三甲氧基
‑9‑
氧代
‑
5,6,7,9
‑
四氢苯并[a]庚二烯
‑7‑
基)乙酰胺，结构式如下：
[0008][0009]具体地，该检测方法采用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，采用含铝离子
溶液作为配制样品溶液的稀释剂，采用含铝离子溶液作为流动相A，采用有机溶剂作为流动相B进行梯度洗脱。
[0010]具体地，含铝离子溶液为硫酸铝溶液、硫酸铝钾溶液、氯化铝溶液中的一种或多种。
[0011]具体地，该检测方法最低能定量检测供试品中0.01％的杂质F。
[0012]具体地，本专利技术所提供的一种秋水仙碱中杂质F的检测方法，包括如下步骤：
[0013]a)配制原料药供试品溶液
[0014]精密称取秋水仙碱原料药至量瓶中，用稀释剂制成秋水仙碱原料药供试品溶液；
[0015]b)配制片剂供试品溶液
[0016]取秋水仙碱片，研细，精密称定适量，置量瓶中，加稀释剂制成秋水仙碱片剂供试品溶液；
[0017]c)配制对照品溶液
[0018]取杂质F适量，加稀释剂溶解制成对照品溶液；
[0019]d)分别精密量取供试品溶液和对照品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图，采用外标法以峰面积计算供试品溶液中杂质F的含量。
[0020]具体地，所述稀释剂含铝离子浓度为25mmol/L或10mmol/L。
[0021]具体地，所述步骤d)中计算公式为：
[0022][0023][0024]其中：
[0025]式中：f—响应因子；m
S
—对照品溶液中杂质B的称样量；c
S
—杂质B的含量；V
S
—对照品溶液中杂质B总稀释体积；A
S
—对照品溶液色谱图中杂质B的峰面积f
平均
—响应因子的平均值；A
i
—供试品中杂质B的峰面积；m
i
—供试品称样量；V
i
—供试品稀释体积。
[0026]具体地，所述液相色谱的检测条件为：
[0027]色谱柱：Welch Xtimate C8色谱柱，规格为150mm
×
4.6mm，5μm；
[0028]流动相A：含铝离子浓度为10mmol/L的溶液；
[0029]流动相B：甲醇；
[0030]洗脱方式：梯度洗脱；
[0031]流速：1.0ml/min；
[0032]柱温：35℃；
[0033]检测波长：250nm；
[0034]进样体积：10μl。
[0035]具体地，在梯度洗脱的过程中，洗脱程序为：
[0036]时间(min)流动相A(％)流动相B(％)06535
665357109012109012.16535206535
[0037]一种含铝离子溶液
‑
有机溶剂流动相体系在HPLC法中检测秋水仙碱杂质F的应用，该HPLC法中采用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，采用含铝离子溶液作为配制样品溶液的稀释剂，采用含铝离子溶液作为流动相A，采用有机溶剂作为流动相B进行梯度洗脱。
[0038]具体地，含铝离子溶液为硫酸铝溶液、硫酸铝钾溶液、氯化铝溶液中的一种或多种，流动相B为甲醇，流动相A含铝离子浓度为10mmol/L，稀释剂含铝离子浓度为25mmol/L或10mmol/L。
[0039]本专利技术的有益效果在于：(1)本专利技术在溶剂和流动相中添加了铝离子，使杂质F与铝离子形成稳定络合物，并且杂质F和秋水仙碱能有效分离，杂质F峰形良好，不受色谱系统中微量金属离子污染物干扰导致的不对称峰形。(2)本专利技术在专属性、定量限、检测限、线性范围、准确性以及精密度上表现出无可拟比的优势。
附图说明
[0040]图1是杂质F在水
‑
甲醇流动相体系下色谱图；
[0041]图2是杂质F在水
‑
甲醇流动相体系下紫外吸收光谱图；
[0042]图3是杂质F在10mmol/L硫酸铝钾溶液
‑
甲醇流动相体系下色谱图；
[0043]图4是杂质F在10mmol/L硫酸铝钾溶液
‑
甲醇流动相体系下紫外吸收光谱图；
[0044]图5是杂质F对照品的标准曲线图。
具体实施方式
[0045]为了加深对本专利技术的理解，下面将结合实施例和附图对本专利技术作进一步详述，该实施例仅用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术保护范围的限定。
[0046]下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0047]依照本专利技术所述检测方法，主要针对杂质F的检测，用外标法进行计算。
[0048]本专利技术所述检测方法在实施方式中采用的仪器与试剂信息见下表：
[0049][0050]本专利技术实施例中，杂质F含量计算公式如下：
[0051](1)
[0052]式中：f—响应因子；
[0053]ms—对照品溶液中杂质F的称样量；
[0054]cs—杂质F的含量；
[0055]Vs—对照品溶液中杂质F总稀释体积；
[0056]As—对照品溶液色谱图中杂质F的峰面积。
[0057](2)
[0058][0059]式中：本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种秋水仙碱杂质F的检测方法，其特征在于，通过色谱法检测秋水仙碱或秋水仙碱片剂中杂质F的含量；所述杂质F为去甲秋水仙碱，化学名称为N
‑
(10
‑
羟基
‑
1,2,3
‑
三甲氧基
‑9‑
氧代
‑
5,6,7,9
‑
四氢苯并[a]庚二烯
‑7‑
基)乙酰胺，结构式如下：2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法采用辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱，采用含铝离子溶液作为配制样品溶液的稀释剂，采用含铝离子溶液作为流动相A，采用有机溶剂作为流动相B进行梯度洗脱。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述含铝离子溶液为硫酸铝溶液、硫酸铝钾溶液、氯化铝溶液中的一种或多种。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，具体包括如下步骤：a)配制秋水仙碱原料药供试品溶液精密称取秋水仙碱原料药至量瓶中，用稀释剂制成秋水仙碱原料药供试品溶液；b)配制秋水仙碱片剂供试品溶液取秋水仙碱片，研细，精密称定适量，置量瓶中，加稀释剂制成秋水仙碱片剂供试品溶液；c)配制对照品溶液取杂质F适量，加稀释剂溶解制成对照品溶液；d)分别精密量取供试品溶液和对照品溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图，采用外标法以峰面积计算供试品溶液中杂质F的含量。5.根据权利要求4...

【专利技术属性】
技术研发人员：王蓉蓉，朱兵，陈小星，
申请(专利权)人：南京华威医药科技集团有限公司，
类型：发明
国别省市：