具有抑制疫霉属病原菌生长的拜赖青霉HH-1及其应用制造技术

本发明专利技术属于微生物技术领域，具体涉及一株具有抑制疫霉属病原菌(Phytophthora)生长作用的拜赖青霉HH

【技术实现步骤摘要】
具有抑制疫霉属病原菌生长的拜赖青霉HH
‑
1及其应用


[0001]本专利技术属于微生物
，具体涉及一株具有抑制疫霉属病原菌生长和控制疫霉病害流行的拜赖青霉HH
‑
1及其应用。

技术介绍

[0002]农业生产中由于连作普遍存在，使植物的根系代谢产物在土壤中逐渐积累，为土传菌类病害提供了生长繁殖的环境，造成了农作物和蔬菜栽培中土传病害的日益加剧。作物被土传病原卵菌侵染后，症状一般为疫病型和枯萎型，具体表现症状为植株枯萎，进而引起重大经济损失。其中，疫霉菌是一种重要的土传病原卵菌。
[0003]烟草疫霉属病原菌(Phytophthora)在烟草上侵染，引起烟草黑胫病(Phytophthora nicotianae)，主要为害烟草的根和茎基部，在其上形成黑色凹陷的病斑。烟草黑胫病遍布全世界，特别是温带、亚热带和热带地区发生较严重。烟草黑胫病是世界范围内烟草种植区都有发生、具毁灭性的病害之一，其病菌导致烟草黑胫病在烟草全生育期内可侵染根、茎、叶等组织，导致根系坏死、叶片黄化、植株萎蔫甚至枯死等症状。在不采取防治措施情形下，损失可达100％。防治烟草黑胫病的方法主要有利用抗病品种、土壤处理、杀菌剂等。然而，传统防治方法带来的抗药性、生态系统的破坏和对人类健康的威胁等问题越来越突出。由于化学药剂的残留、对非靶标生物的毒害以及引起环境污染问题，利用环境友好型生防菌剂进行植物病害的生物防治，被视为替代或减少农业化学药剂使用的补充，已成为国内外的研究热点。生物防治是利用生物有机体或其代谢产物防治植物病害的有效且环保的方法，利用微生物防治烟草黑胫病受到越来越多的关注。获得高效拮抗菌株是进行生物防治的基础，已报道的烟草疫霉拮抗菌有芽孢杆菌、放线菌、木霉等，在防治烟草黑胫病中发挥了重要作用。但不同的微生物适应性不尽相同，发掘新型微生物菌剂受到研究者的关注。分离拮抗菌群并从中筛选高效生防菌，研究其生防效果，对生防菌株的应用具有重要的理论和现实意义。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供了一株具有抑制疫霉属病原菌生长和控制疫霉病害流行作用的拜赖青霉HH
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1及其应用。所述拜赖青霉HH
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1无论是在固体平板上，还是在液体发酵摇瓶中的发酵产物都对烟草疫霉菌丝生长具有显著的抑制作用。另外该青霉在有黑胫病菌的环境下，能够在培养基上快速繁殖，实现了对病原菌的抑制作用。接种该青霉后，能够抑制疫霉病原菌的繁殖，控制疫霉导致的烟草黑胫病等疫霉属病害流行，保障烟草植株健康生长。所述拜赖青霉HH
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1具有显著抑制疫霉属病原菌生长的作用，可直接应用于烟田，实现烟草黑胫病等相关疫霉属病害的防治。另外，其产生的发酵液可用于制备生防制剂，并具有良好的市场应用前景。
[0005]为实现上述专利技术目的，本专利技术采用以下技术方案予以实现：
[0006]本专利技术提供了一株具有抑制疫霉属病原菌生长和控制疫霉病害流行作用的拜赖
青霉HH
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1，其分类命名为拜赖青霉Penicilliumbilaiae，保藏于农业农村部农业环境微生物资源库(山东)，保藏时间为2022年11月15日，保藏编号为CGMCC NO：3766，所述拜赖青霉HH
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1的ITS的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
[0007]进一步的，所述拜赖青霉HH
‑
1的菌落菌丝发达且长度较短，呈毡状；分生孢子头呈扫帚状，分生孢子链状着生。
[0008]进一步的，所述拜赖青霉HH
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1在抑制疫霉属病原菌生长和控制疫霉病害流行的应用。
[0009]进一步的，所述拜赖青霉HH
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1能够有效抑制烟草疫霉属病原菌生长,从而控制植物疫霉病害流行。
[0010]进一步的，所述拜赖青霉HH
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1在有疫霉属病原菌的环境条件下，能够抑制疫霉属病原菌的生长，控制其导致的疫霉属病害流行，保障烟草植株健康生长，所述疫霉属病害包括烟草黑胫病。
[0011]本专利技术还提供了所述的拜赖青霉HH
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1在用于制备防治疫霉属病害的生防制剂中的应用，所述疫霉属病害包括烟草黑胫病。
[0012]进一步的，所述疫霉属病害是由疫霉病原菌引起的植物疫霉属病。
[0013]进一步的，所述拜赖青霉HH
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1制备的生防制剂，能够显著抑制烟草黑胫病疫霉属病原菌的生长。
[0014]进一步的，所述生防制剂中含有拜赖青霉HH
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1或其发酵液。
[0015]进一步的，所述拜赖青霉HH
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1发酵液的制备方法为培养基培养后发酵，包括以下步骤：将所述拜赖青霉HH
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1菌株接种于燕麦片液体培养基中，28℃震荡培养14天，6000rpm条件下离心10min后，上清即为不含有菌体的拜赖青霉HH
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1发酵液。
[0016]优选的，所述赖青霉HH
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1发酵液在生防制剂中的体积比是15％
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30％。
[0017]优选的，所述生防制剂用于抑制烟草疫霉的菌丝伸长，所述赖青霉HH
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1发酵液在生防制剂中的体积比是15％
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30％。
[0018]与现有技术相比，本专利技术具有以下优点和有益效果：
[0019]本专利技术从烟草黑胫病发病土壤地块的健康烟株根际土壤中，筛选到一株拜赖青霉HH
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1，该菌能够显著抑制烟草疫霉的生长，从而有效的抑制疫霉菌引起的疫霉病。所述拜赖青霉HH
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1无论是在固体平板上，还是在液体发酵摇瓶中的发酵产物都对烟草疫霉菌丝生长具有显著的抑制作用。另外该青霉在有黑胫病菌的环境下更能激发其生长繁殖达到了对病原菌的抑制作用。在有病原菌的环境下，接种该青霉能够保障烟草生长。因此该菌及其发酵液能够用来制备成生防制剂，进而增强植物对疫霉病的抗性，且该生防制剂使用简单、效果好、安全可靠，具有良好的市场应用前景。
附图说明
[0020]图1是利用含有烟草黑胫病疫霉属病原菌的土壤，稀释液涂布在PDA抗生素固体培养基，其上生长的大量菌落中通过纯化培养，获得拜赖青霉HH
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1的菌落，疫霉菌丝延伸到平板顶部；
[0021]图2是拜赖青霉HH
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1在高氏一号固体培养基(A)和燕麦培养基(B)上的生长情况上的菌落形态；
[0022]图3是拜赖青霉HH
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1在燕麦培养基上对疫霉菌丝生长抑制结果，A为疫霉菌丝的原始平板，B为疫霉菌丝火烧后的图片；
[0023]图4是拜赖青霉HH
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1在谷子培养基上单独培养以及和疫霉菌混合培养时的生长结果，A为谷子固体培养基的空白对照，B为仅接种青霉HH
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1的谷子固体培养基，C为接种青霉HH
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1和疫霉的谷子固体培养基本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株具有抑制疫霉属病原菌生长的拜赖青霉HH
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1，其特征在于：分类命名为拜赖青霉Penicilliumbilaiae，保藏于农业农村部农业环境微生物资源库(山东)，保藏时间为2022年11月15日,保藏编号为CGMCCNO：3766，所述拜赖青霉HH
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1的ITS的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。2.如权利要求1所述的拜赖青霉HH
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1在抑制疫霉属病原菌生长和控制疫霉病害流行的应用。3.如权利要求1所述的一株具有抑制疫霉属病原菌生长的拜赖青霉HH
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1，其特征在于：所述拜赖青霉HH
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1能够有效抑制烟草疫霉属病原菌的生长，从而控制植物疫霉病害流行。4.如权利要求1所述的一株具有抑制疫霉属病原菌生长的拜赖青霉HH
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1，其特征在于：所述拜赖青霉HH
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1在有疫霉病原菌的环境条件下，能够抑制疫霉属病原菌的生长，控制其导致的疫霉属病害流行，保障烟草植株健康生长，所述疫霉属病害包括烟草黑胫病。5.如权利要求1所述的拜赖青霉HH
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1在制备防治疫霉属病害的生防制剂中的应用，所述疫霉属病害包括烟草黑胫病。6.如权利要求5所述的拜赖青霉HH
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1在制备防治疫霉属病害的生防制剂中的...

【专利技术属性】
技术研发人员：李义强，杨英杰，尤祥伟，张成省，郑艳芬，陈芊如，褚德朋，
申请(专利权)人：中国农业科学院烟草研究所中国烟草总公司青州烟草研究所，
类型：发明
国别省市：