一种厚木霉及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株厚木霉、厚木霉孢子悬液、厚木霉发酵液及其制备方法与应用，属于微生物技术领域。该厚木霉菌株编号为T37，保藏编号GDMCCNo:61066。所述厚木霉T37及其孢子悬液、发酵液和发酵菌粉制备方法简单，使用安全高效，具有良好的抑菌性能；可用于农作物病害的防治，特别是由大丽轮枝菌和溃疡病病原菌引起的农作物病害。另外，其还具有促进植物生根、生长，提高农作物的耐寒能力的效果，具有良好的应用前景和重要的价值。的应用前景和重要的价值。

【技术实现步骤摘要】
一种厚木霉及其应用


[0001]本专利技术涉及微生物
，具体而言，涉及一株厚木霉、厚木霉孢子悬液、厚木霉发酵液的制备方法及其应用。

技术介绍

[0002]冷害指零摄氏度以上低温对作物造成的伤害，通常发生在早春和晚秋。当农作物生长期遭受冷害后，轻者造成减产减收，重则绝收。目前应对作物冷害的主要措施是施用外源植物激素类物质如脱落酸诱导植物的低温耐性和培育耐低温品种。施用植物激素一方面成本过高，另一方面植物激素很可能还参与调控作物其他方面的生理生长，造成如早熟等问题；耐低温品种的培育往往年限长，较短时间内难以满足需求。因此，目前田间缺少一种实用性更强的方法用于防治作物冷害。
[0003]厚木霉为木霉属(Trichoderma Pers.)真菌，木霉属真菌为世界性分布，主要存在于森林、坡沟、农田、草地等潮湿的生境中，土壤、枯枝落叶腐木等植物残体以及其他真菌的子实体都是其生长基物，其物种多样性丰富，是子囊菌的重要类群。木霉属包括其有性阶段(“肉座菌属”)是一类重要的自然生物资源，具有较高的经济价值。该属部分种类对植物病原真菌具有较强的杀伤能力，因而作为生物防治制剂广泛使用；其中一些能够产生纤维素酶、半纤维素酶、木质素酶和果胶酶等酶类而倍受关注，目前比较广泛地应用于农业、工业、环境保护等相关领域。木霉属真菌能够产生多种次级代谢产物，目前从中分离到的代谢产物已超过180余种，主要包括：聚酮类、萜烯类、氨基酸及其衍生物等，其生物活性主要表现在：抗植物病原真菌活性、促进植物生长活性、抗酵母活性、抗细菌活性、抗病毒活性等，广泛应用于植物病害防治，并在生物及其医药领域有一定的应用价值。
[0004]已知报道的木霉菌株主要是通过竞争营养物质和空间，改变环境条件来促进植物的生长，通常都是通过真菌寄生性机制，间接对真菌植物病原菌发挥生物防治作用。而对于细菌性病害鲜有报道。而且对于厚木霉，并不都能有效用于病原菌的生物防治；已报道的厚木霉M82为番茄叶斑病和枯萎病的致病病原菌，参见“First Report of Trichoderma crassum Causing Leaf Spot on Tomato(Solanum lycopersicum)in Ohio”。因此，从厚木霉菌(Trichoderma crassum)中筛选出能够有效用于包括真菌性病害和细菌性病害的多种植物病害的防治存在巨大挑战。
[0005]哈茨木霉菌是木霉属下研究最广，使用最多的菌种，且哈茨木霉菌已被证实能够高效用于多种植物病害的防治；属于公认防效好的菌种。有报道哈茨木霉菌对黄萎病(病原菌为大丽轮枝菌Verticillium dahliae)的防治优于厚木霉菌(Trichoderma crassum)，参见“Study of Antagonistic Effects of Trichoderma Species on Growth of Verticillium dahliae,the Causal Agent of VerticilliumWilt of Pistachio under Laboratory Condition”；要筛选出能够防治效果媲美与哈茨木霉菌，甚至优于哈茨木霉菌的防治效果的新菌株，具有重大意义。此外，哈茨木霉的使用范围也是有限的，如一般都用于高温高湿环境，或者盐碱地，对于抗寒耐冷鲜有报道。且哈茨木霉菌株在市场同质化较为
严重，筛选出新菌株，且防治效果媲美于哈茨木霉的木霉菌，且能够实现抗寒耐冷的环境是对科技创新型企业的一个重要使命。
[0006]鉴于此，筛选出一株安全、抗寒耐冷、具有高效抑制真菌的作用，对溃疡性细菌病害的厚木霉菌株，以及黄萎病病害的防治效果能够媲美甚至优于哈茨木霉菌的新菌株，且能广泛应用于田间植物的病害生物防治，促进农作物的生长，并进行商业化生产，在农业领域具有较高的经济价值。
[0007]在理论研究方面，由于该类群的物种多样性丰富，成为探讨真菌系统演化规律的重要研究材料。因此，不断挖掘木霉属的新自然资源兼具理论意义和应用前景。

技术实现思路

[0008]基于上述
技术介绍
，本专利技术的目的在于筛选出一株安全，且具有抗寒耐冷、以及更高效抑制真菌的作用的厚木霉菌株。
[0009]为了实现以上目的，本专利技术的技术方案为：本专利技术公开了一种尚未报道的厚木霉，该真菌被命名为厚木霉(Trichoderma crassum)T37，其保藏信息为：保藏在广东省微生物菌种保藏中心，保藏地址为广州市先烈中路100号广东省微生物研究所，保藏编号为GDMCC No:61066，保藏日期为2020年6月30日。
[0010]本专利技术所涉及厚木霉样本采集自广西番石榴叶，其经分离鉴定得到所述菌株为厚木霉，其ITS1/ITS4的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，tef1的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
[0011]进一步地，本专利技术还要求保护一种厚木霉孢子悬液、厚木霉发酵液或发酵菌粉；所述孢子悬液、厚木霉发酵液和发酵菌粉由所述的厚木霉制备而得。
[0012]本专利技术的厚木霉T37可通过PDA培养基进行培养，28℃培养5～7天可得到绿色孢子。将孢子重悬于溶液中即可得到孢子悬液。
[0013]所述孢子悬液的优选使用浓度为1
×
107sp/mL，用于防治柑橘溃疡病的可将其稀释300倍使用，作为植物生长调节剂，如发挥其促生根作用时，可稀释500倍使用。
[0014]本专利技术的厚木霉T37经活化后，置于液体培养基震荡培养可制备得到发酵液。进一步将所述发酵菌液冻干可制得所述发酵粉。
[0015]本专利技术还要求保护一种组合物或微生物制剂，包括以下组分中的至少一种：所述厚木霉T37、所述厚木霉T37孢子悬液、所述厚木霉T37发酵液和所述厚木霉T37发酵菌粉。
[0016]进一步地，本专利技术还要求保护所述厚木霉T37、所述厚木霉T37孢子悬液、所述厚木霉T37发酵液、所述厚木霉T37发酵菌粉、所述组合物或微生物制剂在促进农作物根系生长的用途。
[0017]同时，本专利技术还要求保护所述厚木霉T37、所述厚木霉T37孢子悬液、所述厚木霉T37发酵液、所述厚木霉T37发酵菌粉、所述组合物或微生物制剂在促诱导农作物耐寒的用途。
[0018]同时，本专利技术还要求保护所述厚木霉T37、所述厚木霉T37孢子悬液、所述厚木霉T37发酵液、所述厚木霉T37发酵菌粉、所述组合物或微生物制剂在防治农作物病害的用途。
[0019]本专利技术的厚木霉T37，以及制备厚木霉T37孢子悬液、所述厚木霉T37发酵菌粉和厚木霉T37发酵液拥有厚木霉的所有功效，可有效用于促进农作物根系生长、促诱导农作物耐
寒，以及用于防治农作物病害。
[0020]作为本专利技术的优选实施方式，所述农作物为柑橘、火龙果或黄瓜。
[0021]作为本专利技术的优选实施方式，所述的农作物病害包括真菌性病害和/或细菌性病害。
[0022]优选地，所述农作物病害包括真菌性病害和/或细菌性病害引起本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种厚木霉T37，其特征在于，所述菌株保藏在广东省微生物菌种保藏中心，保藏地址为广州市先烈中路100号广东省微生物研究所，保藏编号为GDMCCNo:61066，保藏日期为2020年6月30日。2.一种厚木霉孢子悬液、厚木霉发酵液或发酵粉，其特征在于，所述孢子悬液、厚木霉发酵液或厚木霉发酵菌粉由如权利要求1所述的厚木霉制备而得。3.一种组合物或微生物制剂，其特征在于，包括以下组分中的至少一种：如权利要求1所述的厚木霉T37、如权利要求2所述的厚木霉孢子悬液、厚木霉发酵液或发酵菌粉。4.如权利要求1所述的厚木霉、或如权利要求2所述的厚木霉孢子悬液、厚木霉发酵液或发酵菌粉、或如权利要求3所述的组合物或微生物制剂促进农作物根系生长的作用。5.如权利要求1所述的厚木霉、或如权利要求2所述的厚木霉孢子悬液、厚木霉发酵液或发酵菌粉、或如权利要求3所述的组合物或微生物制剂诱导农作物抗寒耐冷的作用。6.如权利要求1所述的厚木霉、或如权利要求2所述的厚木霉孢子悬液、厚木霉发酵液或发酵菌粉、或如权利要求3所述的组合物或微生物制剂在防治农作物病害的应用；优选地，所述农作物为柑橘、火龙果或黄瓜；优选地，所述农作物病害为真菌性病害和/或细菌性病害；优选地，所述农作物病害包括真菌性病害和/或细菌性病害引起的立枯病、赤霉病、枯萎病、溃疡病中的至少一种。7.如权利要求6所述的应用，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：王琳，王科晶，余昕彤，王雪，孙玉婷，季晓琴，刘仁燕，
申请(专利权)人：慕恩广州生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：