一种纳米调节剂的制备方法及其产品和应用技术

本发明专利技术公开了一种操作简便，重复性强，普适性高纳米调节剂的制备方法。本发明专利技术还公开了由所述方法制备的纳米颗粒尺寸均一、PBS中稳定性优异、可迅速释放中心负载药物、可在体内降解的纳米调节剂，所述纳米调节剂可通过两亲性高分子PCL5k

【技术实现步骤摘要】
一种纳米调节剂的制备方法及其产品和应用


[0001]本专利技术涉及一种纳米调节剂，尤其涉及一种纳米调节剂的制备方法及其产品和应用，属于生物与医学纳米材料领域。

技术介绍

[0002]多形性胶质母细胞瘤(GBM，IV级星形细胞瘤)作为最常见的恶性胶质瘤，其生存中位值往往只有十五个月左右。现有治疗模式为开颅式最大限度切除并辅以化疗和放疗。新型非侵入式治疗手段往往因为血脑肿瘤屏障(BBTB)的存在而在很大程度上限制了到达肿瘤部位的有效治疗剂量。因此，亟待针对BBTB通透性的特异性调控方法的出现。
[0003]血脑屏障(BBB)因为其血管内皮细胞中极低的转胞吞作用和相邻细胞间致密的紧密连接，以及基底膜等的存在使得外源性治疗剂难以进入大脑。BBTB作为肿瘤发生发展中通透性有一定改变的BBB，仍然维持着较高的选择性。BBTB中转胞吞作用相对于BBB有所增加，紧密连接也出现少量的破坏，然而其改变程度低，GBM边缘浸润处BBTB非常接近BBB，使得通过血液长循环进入肿瘤组织的治疗剂不足以实现最初设想。紧密连接作为跨越BBTB的细胞旁路径，其蛋白表达水平直接影响着BBTB的通透性。越来越多关于紧密连接蛋白表达调控的工作被开发。然而多数的调控手段只能增加部分小分子的透过性，诸多较大尺寸纳米制剂的通过仍然被阻挡。
[0004]作为肿瘤治疗的新型手段，基于磁性纳米颗粒的肿瘤磁感应热疗不断在众多类型的肿瘤治疗中取得突破。然而，对于神经胶质瘤的治疗仍然是侵入性瘤内注射。系统给药磁感应热疗虽然取得进展，但依旧难以突破血脑屏障的阻碍。加上常规四氧化三铁纳米颗粒受限的磁热转换能力，使得通过系统给药特异性靶向肿瘤细胞，并且身体其它重要器官不受磁热带来副作用影响的脑部磁感应热疗一直进展缓慢。亟需有同时能解决这些瓶颈的新方法的出现。

技术实现思路

[0005]专利技术目的：本专利技术所要解决的技术问题是提供一种操作简便，重复性强，普适性高纳米调节剂的制备方法。
[0006]本专利技术还要解决的技术问题是提供一种由所述方法制备的纳米颗粒尺寸均一、PBS中稳定性优异、可迅速释放中心负载药物、可在体内降解的纳米调节剂，所述纳米调节剂可通过两亲性高分子PCL5k
‑
SeSe
‑
PEG2k自组装乳化法制备了表面可偶联靶向分子AMD3100，中心可负载药物fingolimod的纳米颗粒的结构优势；所述纳米调节剂还可负载荧光分子，可实时监测纳米调节剂在体内的动态分布；有助于磁性纳米簇通过磁感应热杀伤肿瘤细胞。
[0007]本专利技术还要解决的技术问题是提供所述方法制备的纳米调节剂在制备抗肿瘤药物和/或改善肿瘤屏障通透性药物中的应用。
[0008]技术方案：为解决上述技术问题，本专利技术提供如下技术方案：
[0009]本专利技术提供一种纳米调节剂的制备方法，包括如下步骤：
[0010]1)将Mal
‑
PEG2k
‑
SeSe
‑
NH2和6
‑
己内酯解于无水甲苯中反应，减压浓缩，加入到冰乙醚中沉淀，干燥，即得PCL5k
‑
SeSe
‑
PEG2k粉末；
[0011]2)将PCL5k
‑
SeSe
‑
PEG2k粉末和fingolimod加入到二氯甲烷中，超声溶解，作为油相；以PVA溶液作为水相；将水相与油相混合，冰浴超声，获得乳液体系；
[0012]3)将乳液体系加入到PVA溶液中，搅拌，使二氯甲烷缓慢挥发；离心收集PCL5k
‑
SeSe
‑
PEG2k纳米颗粒，纯水定容得到PCL5k
‑
SeSe
‑
PEG2k纳米颗粒溶液；
[0013]4)将PCL5k
‑
SeSe
‑
PEG2k纳米颗粒溶液进行搅拌，加入巯基化AMD3100分子，继续搅拌，透析得到纳米调节剂。
[0014]其中，步骤1)中所述Mal
‑
PEG2k
‑
SeSe
‑
NH2和6
‑
己内酯的质量比为1：2.5～4。
[0015]其中，步骤1)中所述6
‑
己内酯质量与无水甲苯的体积比为1：40～100。
[0016]其中，步骤1)中反应温度为130～140℃，反应时间为11～15h。
[0017]其中，步骤2)中所述PCL5k
‑
SeSe
‑
PEG2k粉末和fingolimod的质量比为5～20:1；步骤2)中所述PVA溶液的质量浓度为1～2.5％(w/v,g/mL)。
[0018]其中，步骤2)中油相和水相的体积比为1:2～4；冰浴超声的功率为50～100W，冰浴超声的时间为0.5～1min。
[0019]其中，步骤3)中搅拌速率为400～600r/min，搅拌时间为2～4h；步骤4)中PCL5k
‑
SeSe
‑
PEG2k纳米颗粒溶液与巯基化AMD3100分子的质量比为10:0.03～0.16；步骤4)中PCL5k
‑
SeSe
‑
PEG2k纳米颗粒溶液的浓度为0.5～2mg/mL。
[0020]本专利技术还提供了由所述的方法制备得到的纳米调节剂。
[0021]本专利技术还提供了由所述方法制备得到的纳米调节剂在制备抗肿瘤药物和/或改善肿瘤屏障通透性药物中的应用。
[0022]其中，所述肿瘤包括脑部肿瘤。
[0023]工作原理：血脑肿瘤屏障通透性纳米调节剂具备CXCR4高表达肿瘤组织靶向、肿瘤微环境氧自由基(ROS)/谷胱甘肽(GSH)响应裂解、fingolimod快速释放和发挥鞘氨醇
‑1‑
磷酸受体1(S1P1)拮抗调节四级功能结构。四级结构中靶向分子为脑肿瘤血管和细胞中高表达的CXCR4分子，可响应释放的目标条件为为ROS和GSH，释放的fingolimod其拮抗作用的受体为S1P1。
[0024]有益效果：与现有技术相比，本专利技术具有如下显著优点：
[0025]1、本专利技术中获得的血脑肿瘤屏障通透性纳米调节剂的结构优势为通过两亲性高分子PCL5k
‑
SeSe
‑
PEG2k自组装乳化法制备了表面可偶联靶向分子AMD3100，中心可负载药物fingolimod的纳米颗粒；2、该结构制备方法操作简便，重复性强，普适性高；3、本专利技术获得的血脑肿瘤屏障通透性纳米调节剂的纳米颗粒尺寸均一，PBS中稳定性优异；当加入ROS或者GSH时，颗粒中双硒键可以快速响应，颗粒结构破坏，中心负载药物迅速释放；4、纳米调节剂还可负载荧光分子，可实时监测纳米调节剂在体内的动态分布。5、所使用的PCL高分子具备良好生物安全性，可在体内降解；6、该纳米调节剂特异性地调节了血脑肿瘤屏障中紧密连接，正常脑组织中血本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种纳米调节剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：1)将Mal
‑
PEG2k
‑
SeSe
‑
NH2和6
‑
己内酯解于无水甲苯中反应，减压浓缩，加入到冰乙醚中沉淀，干燥，即得PCL5k
‑
SeSe
‑
PEG2k粉末；2)将PCL5k
‑
SeSe
‑
PEG2k粉末和fingolimod加入到二氯甲烷中，超声溶解，作为油相；以PVA溶液作为水相；将水相与油相混合，冰浴超声，获得乳液体系；3)将乳液体系加入到PVA溶液中，搅拌，使二氯甲烷缓慢挥发；离心收集PCL5k
‑
SeSe
‑
PEG2k纳米颗粒，纯水定容得到PCL5k
‑
SeSe
‑
PEG2k纳米颗粒溶液；4)将PCL5k
‑
SeSe
‑
PEG2k纳米颗粒溶液进行搅拌，加入巯基化AMD3100分子，继续搅拌，透析得到纳米调节剂。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中所述Mal
‑
PEG2k
‑
SeSe
‑
NH2和6
‑
己内酯的质量比为1：2.5～4。3.根据权利要求1所...

【专利技术属性】
技术研发人员：武昊安，张宇，马明，王建国，
申请(专利权)人：徐州淮海生命科学产业研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：