瑞氏-姬姆萨复合染色液及其制备方法和用途技术

本发明专利技术公开了一种瑞氏

【技术实现步骤摘要】
瑞氏
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姬姆萨复合染色液及其制备方法和用途


[0001]本专利技术涉及医疗检测
，特别涉及一种瑞氏
‑
姬姆萨复合染色液及其制备方法和用途。

技术介绍

[0002]外周血涂片形态学检查是血常规检查的主要内容之一，人工显微镜检查乃是血细胞形态学检查的金标准，但由于各种原因导致临床检验人员该检验技能薄弱。血涂片染色是血细胞形态学检查中一个非常重要的环节，染色好坏直接影响结果的判断。随着血细胞分析仪流水线的引进，血涂片染色也逐步向自动化迈进，但手工染色仍是目前各级医院的主要手段。
[0003]血涂片的染色有多种方法，目前国际标准化委员会(ICSH)推荐使用的标准染色为罗曼诺夫斯基(Romanowsky)染色，但由于该染色的染料价格高而难以普及，我国多采用以罗氏染色演变过来的瑞氏(Wright)染色法、瑞特
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姬姆萨(Wright
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Giemsa)染色法，另外还有一些快速的染色方法主要用于急诊。目前，许多医院进行分步染色，即先使用染液染色，再使用缓冲液调整pH值，导致血涂片pH不稳定、染色操作繁琐、染色时间长、血涂片染色质量不稳定，因此，亟需一种能够成分可标准化控制的染色液，也需要一种简单、快速且染色效果稳定的血涂片染色方法。

技术实现思路

[0004]本专利技术为了解决上述技术问题，提供瑞氏
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姬姆萨复合染色液及其制备方法和用途。
[0005]第一方面，本专利技术提供一种瑞氏
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姬姆萨复合染色液，是采用以下技术方案得以实现的。
[0006]一种瑞氏
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姬姆萨复合染色液，其特征在于，包括以下重量份的组分：
[0007][0008][0009]所述瑞氏
‑
姬姆萨复合染色液的pH为6.5
‑
6.7。
[0010]优选的，一种瑞氏
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姬姆萨复合染色液，包括以下重量份的组分：
[0011][0012]第二方面，本专利技术提供一种瑞氏
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姬姆萨复合染色液的制备方法，是采用以下技术方案得以实现的。
[0013]一种上述瑞氏
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姬姆萨复合染色液的制备方法，包括下步骤：
[0014]S1.称取瑞氏染料、姬姆萨染料、天青Ⅱ、甘油，溶于甲醇中，再加入聚乙烯吡咯烷酮，使其全部溶解，得到溶液A；
[0015]S2.称取无水磷酸二氢钾和无水磷酸氢二钠，溶于蒸馏水中，得到溶液B；
[0016]S3.将步骤S1所得溶液A与步骤S2所得溶液B混合，配置得到的瑞氏
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姬姆萨复合染色液。
[0017]第三方面，本专利技术提供一种瑞氏
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姬姆萨复合染色液的用于一步快速细胞染色的用途，是采用以下技术方案得以实现的。
[0018]一种瑞氏
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姬姆萨复合染色液的用于一步快速细胞染色的用途，其特征在于：包括下步骤：
[0019]S1.制血膜，水平放置至血涂片晾干；
[0020]S2.采用甲醇固定血涂片3
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5秒后，弃去多余液体；
[0021]S3.滴加权利要求1或2所述的瑞氏
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姬姆萨复合染色液，染色2
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3分钟；
[0022]S4.用清水冲洗染色后的血涂片，干燥后镜检。
[0023]综上所述，相比于现有技术，本申请具有以下技术效果。
[0024]1.本申请将染液和磷酸盐缓冲液按一定比例混合后，复合染液成分和pH稳定，具有较好的均一性和稳定性，保证了细胞着色的均匀度，有效保障了染液的质量控制，且能够长期、反复使用；
[0025]2.本申请的瑞氏
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姬姆萨复合染色液pH控制在6.5
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6.7，由于控制了特定的稳定的pH，细胞染色效果大大提升；
[0026]3.本申请先配置复合染液，再进行一步染色，有效的提升了操作流程的标准化程度，便于建立新的质控标准，防止分步染色时人为原因造成的系统的误差；
[0027]4.本申请单纯采用甲醇对血涂片进行固定，改变了多年来采用瑞氏染液或瑞姬染液作为A液来固定血涂片的传统染色模式，既节约成本也缩短了固定时间，大大提高了染色
效率；
[0028]5.本申请的瑞氏
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姬姆萨复合染色液的用于一步快速细胞染色的用途可在3分钟内完成，极大地提高临床效率；
[0029]6.本申请瑞氏
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姬姆萨复合染色液中染液浓度较低，将其用于血细胞分析仪中，可有效防止管道堵塞情，并且，甲醇可回收再利用于冲洗管道喷头，降低了使用成本。
[0030]上述各项改进综合作用，共同发挥作用，取得了预料不到的技术效果，这是单独采用某一技术手段所无法获得，也无法预期的。
附图说明
[0031]图1是本专利技术染液进行染色的中性细胞的染色效果图，可见清楚的特异性颗粒的染色效果；
[0032]图2是本专利技术染液进行染色的幼稚粒系细胞的染色效果图；
[0033]图3是本专利技术染液进行染色的嗜酸性粒细胞的染色效果图；
[0034]图4是本专利技术染液进行染色的淋巴细胞及中性分叶粒细胞的染色效果图；
[0035]图5是本专利技术染液进行染色的嗜碱性粒细胞的染色效果图；
[0036]图6是本专利技术染液进行染色的嗜酸性粒细胞及血小板的染色效果图；
[0037]图7是本专利技术染液进行染色的白血病患者的幼稚细胞的染色效果图，可见明显的核仁及特异性颗粒的染色效果；
[0038]图8是本专利技术染液进行染色的慢粒患者各阶段幼稚粒细胞及血小板的染色效果图；
[0039]图9是本专利技术染液进行染色的中性粒细胞及血小板的染色效果图；
[0040]图10是本专利技术染液进行染色的幼稚粒细胞的各阶段细胞的染色效果图，可见幼稚粒细胞特有细胞结构内的奥氏小体(auer小体)染色效果；
[0041]图11是本专利技术染液进行染色的可见中性粒细胞内的特异性中毒颗粒的染色效果图；
[0042]图12是本专利技术染液进行染色的中性粒细胞、均一染色的红细胞及散在的血小板的染色效果图；
[0043]图13是本专利技术染液进行染色的中性粒细胞及有核红细胞的染色效果图；
[0044]图14是本专利技术染液进行染色的嗜碱性粒细胞及嗜酸性粒细胞的染色效果图；
[0045]图15是本专利技术染液进行染色的白血病患者的原始细胞的染色效果图；
[0046]图16是本专利技术染液进行染色的异常早幼粒细胞含有明显的特异性颗粒及奥氏小体(auer小体)的染色效果图；
[0047]图17是本专利技术染液进行染色的急性早幼粒白血病患者的异常早幼粒细胞(在我院门急诊中必须报的危急值，处理及时可挽救患者生命的重要指标)的染色效果图；
[0048]图18是本专利技术染液进行染色的成熟单核细胞的染色效果图；
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种瑞氏
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姬姆萨复合染色液，其特征在于，包括以下重量份的组分：所述瑞氏
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姬姆萨复合染色液的pH为6.5
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6.7。2.根据权利要求1所述的一种瑞氏
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姬姆萨复合染色液，其特征在于，包括以下重量份的组分：3.一种权利要求1或2所述瑞氏
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姬姆萨复合染色液的制备方法，其特征在于，包括下步骤：S1.称取瑞氏染料、姬姆萨染料、天青Ⅱ、甘油，溶于甲醇中，再加入聚乙烯吡咯烷酮，使其全部溶解，得到溶液A；S2.称取无水磷酸二氢钾和无水磷酸氢二钠，溶于蒸馏水中，得到溶液B；S3.将步骤S1所得溶液A与步...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙娟，朱国庆，夏永辉，
申请(专利权)人：中国医学科学院血液病医院中国医学科学院血液学研究所，
类型：发明
国别省市：