抑制性嵌合受体构造体制造技术

本文提供抑制性嵌合抗原受体组合物和包含此类组合物的细胞。还提供使用抑制性嵌合抗原受体和细胞的方法。原受体和细胞的方法。原受体和细胞的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】抑制性嵌合受体构造体
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2020年12月18日提交的美国临时申请号63/127,843和2020年2月20日提交的美国临时申请号62/979,310的权益，所述申请中的每一者出于所有目的均以引用的方式整体并入本文。
[0003]序列表
[0004]本申请含有序列表，其已经由EFS
‑
Web提交并以引用的方式整体并入本文。所述ASCII复本创建于20XX年XX月，名称为XXXXXUS_sequencelisting.txt且大小为X,XXX,XXX字节。

技术介绍

[0005]嵌合抗原受体(CAR)实现免疫调节细胞(诸如T细胞)的靶向体内活化。这些重组膜受体具有抗原结合域和一个或多个信号传导域(例如，T细胞活化域)。这些特殊的受体使T细胞识别肿瘤细胞上的特定蛋白抗原，并诱导T细胞活化和信号传导途径。表达嵌合受体的T细胞的临床试验的最近结果为其作为癌症免疫疗法的剂的实用性提供了令人信服的支持。然而，尽管取得了这些有前景的结果，但仍发现了许多与CAR T细胞疗法有关的副作用，产生显著的安全问题。一种副作用为来自TCR和CAR工程改造的T细胞的“在靶但脱组织(on
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target but off
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tissue)”不良事件，在所述等不良事件中CAR T细胞与其靶肿瘤组织之外的配体结合并诱导免疫反应。因此，鉴定适当的CAR靶标的能力对于有效地靶向和治疗肿瘤而不损害表达相同靶抗原的正常细胞来说是重要的。
[0006]抑制性嵌合抗原受体(还称为iCAR)为在结合靶细胞上的其同源配体之后抑制或减少免疫调节细胞活性的蛋白构造。当前的iCAR设计利用PD
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1细胞内域进行抑制，但已证明难以再现。因此，需要用于iCAR的替代抑制域。

技术实现思路

[0007]本文提供了嵌合抑制性受体，其包含：细胞外蛋白结合域；跨膜域，其中所述跨膜域可操作地连接至所述细胞外蛋白结合域；以及一个或多个细胞内信号传导域，其中所述一个或多个细胞内信号传导域可操作地连接至所述跨膜域，且其中所述一个或多个细胞内信号传导域中的至少一个能够防止、减弱或抑制在免疫调节细胞上表达的肿瘤靶向嵌合受体的活化。
[0008]在一些方面中，所述一个或多个细胞内信号传导域各自衍生自选自由以下组成的组的蛋白：SLAP1、SLAP2、Dok
‑
1、Dok
‑
2、LAIR1、GRB
‑
2、CD200R、SIRPα、HAVR、GITR、PD
‑
L1、KIR2DL1、KIR2DL2、KIR2DL3KIR3DL2、CD94、KLRG
‑
1、CEACAM1、LIR2、LIR3、LIR5、SIGLEC
‑
2和SIGLEC
‑
10。
[0009]在一些方面中，跨膜域衍生自与所述一个或多个细胞内信号传导域中的一个相同的蛋白。
[0010]在一些方面中，跨膜域进一步包含相同蛋白的细胞外域的至少一部分。
[0011]在一些方面中，跨膜域衍生自第一蛋白，且所述一个或多个细胞内信号传导域衍生自与第一蛋白不同的第二蛋白。
[0012]在一些方面中，所述一个或多个细胞内信号传导域中的一个衍生自SLAP1。
[0013]在一些方面中，细胞内信号传导域包含与PAPAERPLPNPEGLDSDFLAVLSDYPSPDISPPIFRRGEKLRVISDEGGWWKAISLSTGRESYIPGICVARVYHGWLFEGLGRDKAEELLQLPDTKVGSFMIRESETKKGFYSLSVRHRQVKHYRIFRLPNNWYYISPRLTFQCLEDLVNHYSEVADGLCCVLTTPCLTQSTAAPAVRASSSPVTLRQKTVDWRRVSRLQEDPEGTENPLGVDESLFSYGLRESIASYLSLTSEDNTSFDRKKKSISLMYGGSKRKSSFFSSPPYFED(SEQ ID NO:4)或PAPAERPLPNPEGLDSDFLAVLSDYPSPDISPPIFRRGEKLRVISDEGGWWKAISLSTGRESYIPGICVARVYHGWLFEGLGRDKAEELLQLPDTKVGSFMIRESETKKGFYSLSVRHRQVKHYRIFRLPNNWYYISPRLTFQCLEDLVNHYSEVADGLCCVLTTPCLTQSTAAPAVRASSSPVTLRQKTVDWRRVSRLQEDPEGTENPLGVDESLFSYGLRESIASYLSLTSEDNTSF(SEQ ID NO:5)有至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约91％、至少约92％、至少约93％、至少约94％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％同一性的氨基酸序列。
[0014]在一些方面中，细胞内信号传导域包含氨基酸序列PAPAERPLPNPEGLDSDFLAVLSDYPSPDISPPIFRRGEKLRVISDEGGWWKAISLSTGRESYIPGICVARVYHGWLFEGLGRDKAEELLQLPDTKVGSFMIRESETKKGFYSLSVRHRQVKHYRIFRLPNNWYYISPRLTFQCLEDLVNHYSEVADGLCCVLTTPCLTQSTAAPAVRASSSPVTLRQKTVDWRRVSRLQEDPEGTENPLGVDESLFSYGLRESIASYLSLTSEDNTSFDRKKKSISLMYGGSKRKSSFFSSPPYFED(SEQ ID NO:4)或PAPAERPLPNPEGLDSDFLAVLSDYPSPDISPPIFRRGEKLRVISDEGGWWKAISLSTGRESYIPGICVARVYHGWLFEGLGRDKAEELLQLPDTKVGSFMIRESETKKGFYSLSVRHRQVKHYRIFRLPNNWYYISPRLTFQCLEDLVNHYSEVADGLCCVLTTPCLTQSTAAPAVRASSSPVTLRQKTVDWRRVSRLQEDPEGTENPLGVDESLFSYGLRESIASYLSLTSEDNTSF(SEQ ID NO:5)。
[0015]在一些方面中，所述一个或多个细胞内信号传导域中的一个衍生自SLAP2。
[0016]在一些方面中，细胞内信号传导域包含与RKSLPSPSLSSSVQGQGPVTMEAERSKATAVALGSFPAGGPAELSLRLGEPLTIVSEDGDWWTVLSEVSGREYNIPSVHVAKVSHGWLYEGLSREKAEELLLLPGNPGGAFLIRESQTRRGSYSLSVRLSRPASWDRIRHYRIHCLDNGWLYISPRLTFPSLQALVDHYSELADDICCLLKEPCVLQRAGPLPGKDIPLPVTVQRTPLNWKELDSSLLFSEAATGEESLLSEGLRESL本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种嵌合抑制性受体，其包含：(a)细胞外蛋白结合域；(b)跨膜域，其中所述跨膜域可操作地连接至所述细胞外蛋白结合域；以及(c)一个或多个细胞内信号传导域，其中所述一个或多个细胞内信号传导域可操作地连接至所述跨膜域；并且其中所述一个或多个细胞内信号传导域中的每一者衍生自选自由以下组成的组的蛋白：SLAP1、SLAP2、Dok
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1、Dok
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2、LAIR1、GRB
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2、CD200R、SIRPα、HAVR、GITR、PD
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L1、KIR2DL1、KIR2DL2、KIR2DL3、KIR3DL2、CD94、KLRG
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1、CEACAM1、LIR2、LIR3、LIR5、SIGLEC
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2和SIGLEC
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10，并且其中所述一个或多个细胞内信号传导域中的至少一个能够防止、减弱或抑制在免疫调节细胞上表达的肿瘤靶向嵌合受体的活化。2.如权利要求1所述的嵌合抑制性受体，其中：(a)所述跨膜域和所述一个或多个细胞内信号传导域中的一个衍生自相同蛋白，任选其中所述跨膜域进一步包含相同蛋白的细胞外域的至少一部分；或(b)所述跨膜域衍生自第一蛋白，且所述一个或多个细胞内信号传导域中的每一者衍生自与所述第一蛋白不同的第二蛋白。3.如权利要求1或权利要求2所述的嵌合抑制性受体，其中：(a)所述一个或多个细胞内信号传导域中的一个衍生自SLAP1，任选其中所述细胞内信号传导域包含与PAPAERPLPNPEGLDSDFLAVLSDYPSPDISPPIFRRGEKLRVISDEGGWWKAISLSTGRESYIPGICVARVYHGWLFEGLGRDKAEELLQLPDTKVGSFMIRESETKKGFYSLSVRHRQVKHYRIFRLPNNWYYISPRLTFQCLEDLVNHYSEVADGLCCVLTTPCLTQSTAAPAVRASSSPVTLRQKTVDWRRVSRLQEDPEGTENPLGVDESLFSYGLRESIASYLSLTSEDNTSFDRKKKSISLMYGGSKRKSSFFSSPPYFED(SEQ ID NO:4)有至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约91％、至少约92％、至少约93％、至少约94％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％同一性的氨基酸序列，或其中所述细胞内信号传导域包含氨基酸序列PAPAERPLPNPEGLDSDFLAVLSDYPSPDISPPIFRRGEKLRVISDEGGWWKAISLSTGRESYIPGICVARVYHGWLFEGLGRDKAEELLQLPDTKVGSFMIRESETKKGFYSLSVRHRQVKHYRIFRLPNNWYYISPRLTFQCLEDLVNHYSEVADGLCCVLTTPCLTQSTAAPAVRASSSPVTLRQKTVDWRRVSRLQEDPEGTENPLGVDESLFSYGLRESIASYLSLTSEDNTSFDRKKKSISLMYGGSKRKSSFFSSPPYFED(SEQ ID NO:4)；或(b)所述一个或多个细胞内信号传导域中的一个衍生自SLAP1，任选其中所述细胞内信号传导域包含与PAPAERPLPNPEGLDSDFLAVLSDYPSPDISPPIFRRGEKLRVISDEGGWWKAISLSTGRESYIPGICVARVYHGWLFEGLGRDKAEELLQLPDTKVGSFMIRESETKKGFYSLSVRHRQVKHYRIFRLPNNWYYISPRLTFQCLEDLVNHYSEVADGLCCVLTTPCLTQSTAAPAVRASSSPVTLRQKTVDWRRVSRLQEDPEGTENPLGVDESLFSYGLRESIASYLSLTSEDNTSF(SEQ ID NO:5)有至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约91％、至少约92％、至少约93％、至少约94％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％同一性的氨基酸序列，或其中所述细胞内信号传导域包含氨基酸序列PAPAERPLPNPEGLDSDFLAVLSDYPSPDISPPIFRRGEKLRVISDEGGWWKAISLSTGRESYIPGICVARVYHGWLFEGLGRDKAEELLQLPDTKVGSFMIRESETKKGFYSLSVRHRQVKHYRIFRLPNNWYYISPRLTFQCLEDLVNHYSEVADGLCCVLTTPCLTQSTAAPAVRASSSPVTLRQKTVDWRRVSRLQEDPEGTENPLGVDESLFSYG
LRESIASYLSLTSEDNTSF(SEQID NO:5)；或(c)所述一个或多个细胞内信号传导域中的一个衍生自SLAP2，任选其中所述细胞内信号传导域包含与RKSLPSPSLSSSVQGQGPVTMEAERSKATAVALGSFPAGGPAELSLRLGEPLTIVSEDGDWWTVLSEVSGREYNIPSVHVAKVSHGWLYEGLSREKAEELLLLPGNPGGAFLIRESQTRRGSYSLSVRLSRPASWDRIRHYRIHCLDNGWLYISPRLTFPSLQALVDHYSELADDICCLLKEPCVLQRAGPLPGKDIPLPVTVQRTPLNWKELDSSLLFSEAATGEESLLSEGLRESLSFYISLNDEAVSLDDA(SEQ ID NO:6)有至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约91％、至少约92％、至少约93％、至少约94％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％同一性的氨基酸序列，或其中所述细胞内信号传导域包含氨基酸序列RKSLPSPSLSSSVQGQGPVTMEAERSKATAVALGSFPAGGPAELSLRLGEPLTIVSEDGDWWTVLSEVSGREYNIPSVHVAKVSHGWLYEGLSREKAEELLLLPGNPGGAFLIRESQTRRGSYSLSVRLSRPASWDRIRHYRIHCLDNGWLYISPRLTFPSLQALVDHYSELADDICCLLKEPCVLQRAGPLPGKDIPLPVTVQRTPLNWKELDSSLLFSEAATGEESLLSEGLRESLSFYISLNDEAVSLDDA(SEQ ID NO:6)；或(d)所述一个或多个细胞内信号传导域中的一个衍生自KIR2DL1，任选其中所述细胞内信号传导域包含与HRWCSNKKNAAVMDQESAGNRTANSEDSDEQDPQEVTYTQLNHCVFTQRKITRPSQRPKTPPTDIIVYTELPNAESRSKVVSCP(SEQ ID NO:60)有至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约91％、至少约92％、至少约93％、至少约94％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％同一性的氨基酸序列，或其中所述细胞内信号传导域包含氨基酸序列HRWCSNKKNAAVMDQESAGNRTANSEDSDEQDPQEVTYTQLNHCVFTQRKITRPSQRPKTPPTDIIVYTELPNAESRSKVVSCP(SEQ ID NO:60)；或(e)所述一个或多个细胞内信号传导域中的一个衍生自KLRG
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1，任选其中所述细胞内信号传导域包含与MTDSVIYSMLELPTATQAQNDYGPQQKSSSSRPSCSCLGSG(SEQ ID NO:61)有至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约91％、至少约92％、至少约93％、至少约94％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％同一性的氨基酸序列，或其中所述细胞内信号传导域包含氨基酸序列MTDSVIYSMLELPTATQAQNDYGPQQKSSSSRPSCSCLGSG(SEQ ID NO:61)；或(f)所述一个或多个细胞内信号传导域中的一个衍生自LAIR1，任选其中所述细胞内信号传导域包含与HRQNQIKQGPPRSKDEEQKPQQRPDLAVDVLERTADKATVNGLPEKDRETDTSALAAGSSQEVTYAQLDHWALTQRTARAVSPQSTKPMAESITYAAVARH(SEQ ID NO:62)有至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约91％、至少约92％、至少约93％、至少约94％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％同一性的氨基酸序列，或其中所述细胞内信号传导域包含氨基酸序列HRQNQIKQGPPRSKDEEQKPQQRPDLAVDVLERTADKATVNGLPEKDRETDTSALAAGSSQEVTYAQLDHWALTQRTARAVSPQSTKPMAESITYAAVARH(SEQ ID NO:62)；或(g)所述一个或多个细胞内信号传导域中的一个衍生自LIR2，任选其中所述细胞内信号传导域包含与LRHRRQGKHWTSTQRKADFQHPAGAVGPEPTDRGLQWRSSPAADAQEENLYAAVKDTQPEDGVEMDTRAAASEAPQDVTYAQLHSLTLRRKATEPPPSQEREPPAEPSIYATLAIH(SEQ ID NO:63)有至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约91％、至少约92％、至少约93％、至少约94％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％同一性的氨基酸序列，或其中所述细胞内信号传导域包含氨基酸序列LRHRRQGKHWTSTQRKADFQHPAGAVGPEPTDRGLQWRSSPAADAQEENLYAAVKDTQPEDGVEMDTRAAASEAPQDVTYAQLHSLTLRRKATEPPPSQEREPPAEPSIYAT
LAIH(SEQ ID NO:63)；或(h)所述一个或多个细胞内信号传导域中的一个衍生自LIR3，任选其中所述细胞内信号传导域包含与RRQRHSKHRTSDQRKTDFQRPAGAAETEPKDRGLLRRSSPAADVQEENLYAAVKDTQSEDRVELDSQSPHDEDPQAVTYAPVKHSSPRREMASPPSSLSGEFLDTKDRQVEEDRQMDTEAAASEASQDVTYAQLHSLTLRRKATEPPPSQEGEPPAEPSIYATLAIH(SEQ ID NO:64)有至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约91％、至少约92％、至少约93％、至少约94％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％同一性的氨基酸序列，或其中所述细胞内信号传导域包含氨基酸序列RRQRHSKHRTSDQRKTDFQRPAGAAETEPKDRGLLRRSSPAADVQEENLYAAVKDTQSEDRVELDSQSPHDEDPQAVTYAPVKHSSPRREMASPPSSLSGEFLDTKDRQVEEDRQMDTEAAASEASQDVTYAQLHSLTLRRKATEPPPSQEGEPPAEPSIYATLAIH(SEQID NO:64)；或(i)所述一个或多个细胞内信号传导域中的一个衍生自LIR5，任选其中所述细胞内信号传导域包含与QHWRQGKHRTLAQRQADFQRPPGAAEPEPKDGGLQRRSSPAADVQGENFCAAVKNTQPEDGVEMDTRQSPHDEDPQAVTYAKVKHSRPRREMASPPSPLSGEFLDTKDRQAEEDRQMDTEAAASEAPQDVTYAQLHSFTLRQKATEPPPSQEGASPAEPSVYATLAIH(SEQ ID NO:65)有至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约91％、至少约92％、至少约93％、至少约94％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％同一性的氨基酸序列，或其中所述细胞内信号传导域包含氨基酸序列QHWRQGKHRTLAQRQADFQRPPGAAEPEPKDGGLQRRSSPAADVQGENFCAAVKNTQPEDGVEMDTRQSPHDEDPQAVTYAKVKHSRPRREMASPPSPLSGEFLDTKDRQAEEDRQMDTEAAASEAPQDVTYAQLHSFTLRQKATEPPPSQEGASPAEPSVYATLAIH(SEQ ID NO:65)；或(j)所述一个或多个细胞内信号传导域中的一个衍生自SIGLEC
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2，任选其中所述细胞内信号传导域包含与KLQRRWKRTQSQQGLQENSSGQSFFVRNKKVRRAPLSEGPHSLGCYNPMMEDGISYTTLRFPEMNIPRTGDAESSEMQRPPPDCDDTVTYSALHKRQVGDYENVIPDFPEDEGIHYSELIQFGVGERPQAQENVDYVILKH(SEQ ID NO:66)有至少约80％、至少约85％、至少约90％、至少约91％、至少约92％、至少约93％、至少约94％、至少约95％、至少约96％、至少约97％、至少约98％、至少约99％或约100％同一性的氨基酸序列，或其中所述细胞内信号传导域包含氨基酸序列KLQRRWKRTQSQQGLQENSSGQSFFVRNKKVRRAPLSEGPHSLGCYNPMMEDGISYTTLRFPEMNIPRTGDAESSEMQRPPPDCDDTVTYSALHKRQVGDYENVIPDFPEDEGIHYSELIQFGVGERPQAQENVDYVILKH(SEQ ID NO:66)；或(k)所述一个或多个细胞内信号传导域中的一个衍生自SIGLEC
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10，任选其中所述细胞内信号传导域包含与KILPKRRTQTETPRPRFSRHSTILDYINVVPTAGPLAQKRNQKATPNSPRTPLPPGAPSPESKKNQKKQYQLPSFPEPKSSTQAPESQESQEELHYATLNFPGVRPRPEARMPKGTQADYAEVKFQ(SEQ ID NO:...

【专利技术属性】
技术研发人员：R，
申请(专利权)人：森迪生物科学公司，
类型：发明
国别省市：