System.ArgumentOutOfRangeException: 索引和长度必须引用该字符串内的位置。 参数名: length 在 System.String.Substring(Int32 startIndex, Int32 length) 在 zhuanliShow.Bind() 武装嵌合受体及其使用方法技术_技高网

武装嵌合受体及其使用方法技术

技术编号:41097867 阅读:2 留言:0更新日期:2024-04-25 13:55
本文描述了经工程化以表达细胞因子、嵌合受体和合成转录因子系统的免疫应答细胞。本文还描述了核酸、细胞和涉及到它们的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】


技术介绍

1、基于细胞的疗法平台为治疗多种疾病提供了有前景的途径。一种此类有前景的平台是癌症治疗中基于car-t的疗法。考虑到它们的前景,需要改进基于细胞的疗法。一个活跃的探索领域是基于细胞的工程化疗法以产生和/或分泌可增强基于细胞的疗法的效应分子,诸如细胞因子,这一过程被称为武装。例如,未武装的car-t疗法对实体瘤的疗效很差,并且武装可以影响整个癌症免疫循环并增强car-t的活性。然而,未受控制或未受调节的武装策略可以对治疗产生负面影响,诸如脱靶效应和受试者的毒性。因此,需要控制和调节基于细胞的疗法的武装(诸如调节有效载荷效应分子的产生和/或分泌)的额外方法。


技术实现思路

1、在一些实施方案中,本文提供了一种基于细胞的疗法平台,其涉及基于细胞的疗法的受调节的武装,诸如有效载荷效应分子的受调节的分泌。在一些实施方案中,本文还提供了一种基于细胞的组合免疫疗法,其涉及癌症(诸如卵巢癌、乳腺癌、结肠癌、肺癌和胰腺癌)的靶向治疗的受调节的武装。

2、然而,本文提供的疗法可以限制武装的全身毒性。例如,本文提供的免疫疗法可以是肿瘤特异性的和有效的,同时限制因武装引起的全身毒性和/或其他脱靶效应。这些疗法以受调节的方式递送感兴趣的蛋白质,诸如免疫调节效应分子,包括调节分泌动力学、细胞状态特异性和细胞或组织特异性。递送媒剂的设计被优化以改善基于细胞的疗法(诸如癌症疗法)的总体功能,包括但不限于膜切割位点、启动子、接头、信号肽、递送方法、免疫调节效应分子的组合、调节和顺序的优化。</p>

3、本公开所涵盖的效应分子的非限制性实例包括细胞因子、抗体、趋化因子、核苷酸、肽、酶和溶瘤病毒。例如,可以对细胞进行工程化以便以受调节的方式表达和分泌至少一种、两种、三种或更多种下列效应分子:il-12、il-16、ifn-β、ifn-γ、il-2、il-15、il-7、il-36γ、il-18、il-1β、il-21、ox40配体、cd40l、抗pd-1抗体、抗pd-l1抗体、抗ctla-4抗体、抗tgfβ抗体、抗tnfr2、mip1α(ccl3)、mip1β(ccl5)、ccl21、cpg寡脱氧核苷酸和抗肿瘤肽(例如,具有抗肿瘤活性的抗微生物肽,参见例如gaspar,d.等人,front microbiol.2013;4:294;chu,h.等人,plos one.2015;10(5):e0126390以及网站:aps.unmc.edu/ap/main.php)。

4、本文提供了一种免疫应答细胞,其包含:(a)第一经工程化的核酸,所述第一经工程化的核酸包含第一表达盒和第二表达盒,所述第一表达盒包含可操作地连接至编码第一细胞因子的第一外源性多核苷酸序列的第一启动子,所述第二表达盒包含可操作地连接至编码结合至gpc3的嵌合抗原受体(car)的第二外源性多核苷酸序列的第二启动子;和(b)第二经工程化的核酸,所述第二经工程化的核酸包含第三表达盒和第四表达盒,所述第三表达盒包含可操作地连接至编码第二细胞因子的第三外源性多核苷酸序列的合成转录因子应答启动子,所述第四表达盒包含可操作地连接至编码有条件激活控制多肽(acp)的第四外源性多核苷酸序列的第四启动子,其中所述acp包含有包含dna结合结构域和转录效应子结构域的合成转录因子,其中所述acp能够通过结合至所述acp应答启动子来诱导所述第三外源性多核苷酸序列的表达,其中所述第一外源性多核苷酸序列和所述第三外源性多核苷酸序列中的至少一者编码从n末端到c末端取向的膜可切割嵌合蛋白,所述膜可切割嵌合蛋白具有下式:s-c-mt或mt-c-s其中s包含有包含所述第一细胞因子和/或第二细胞因子的可分泌效应分子,c包含蛋白酶切割位点,并且mt包含细胞膜栓系结构域,并且其中s-c-mt或mt-c-c被配置为表达为单一多肽。

5、在一些方面,本文提供了经工程化的核酸,其包含:第一表达盒和第二表达盒,所述第一表达盒包含可操作地连接至编码il15的第一外源性多核苷酸序列的第一启动子,所述第二表达盒包含可操作地连接至编码结合至gpc3的嵌合抗原受体(car)的第二外源性多核苷酸序列的第二启动子,其中第一外源性多核苷酸序列编码从n末端到c末端取向的膜可切割嵌合蛋白,所述膜可切割嵌合蛋白具有下式:s–c–mt或mt–c–s,其中s包含有包含il15的可分泌效应分子,c包含蛋白酶切割位点,并且mt包含细胞膜栓系结构域,并且其中s–c–mt或mt–c–s被配置为表达为单一多肽。

6、在另一方面,本文提供了一种经工程化的核酸,其包括:第一表达盒,所述第一表达盒包含可操作地连接至编码il12p70融合蛋白的第一外源性多核苷酸序列的合成转录因子应答启动子,以及第二表达盒,所述第二表达盒包含第二启动子,所述第二启动子可操作地连接至编码有条件激活控制多肽(acp)的第二外源性多核苷酸序列,其中所述acp包含合成转录因子,所述合成转录因子包含dna结合结构域和转录效应子结构域,其中所述acp能够通过结合至所述acp应答启动子来诱导所述第一外源性多核苷酸序列的表达,其中所述第一外源性多核苷酸序列编码从n末端到c末端取向的膜可切割嵌合蛋白,所述膜可切割嵌合蛋白具有下式:s–c–mt或mt–c–s

7、其中s包含有包含il12p70融合蛋白的可分泌效应分子,c包含蛋白酶切割位点,并且mt包含细胞膜栓系结构域,并且其中s–c–mt或mt–c–s被配置为表达为单一多肽。

8、在一些方面,所述第一表达盒被配置为相对于所述第二表达盒的转录以相反取向转录。在一些方面,在所述第一经工程化的核酸内所述第一表达盒和所述第二表达盒以头对头的方向性定向。在一些方面,所述第一表达盒被配置为相对于所述第二表达盒的所述转录以相同的取向转录。在一些方面,在所述第一经工程化的核酸内所述第一表达盒和所述第二表达盒以头对尾的方向性定向。

9、在另一方面,本文提供了一种经工程化的核酸,其包含:(a)第一经工程化的核酸,所述第一经工程化的核酸包含第一表达盒,所述第一表达盒包含第一启动子,所述第一启动子可操作地连接至编码结合至gpc3的嵌合抗原受体(car)的第一外源性多核苷酸序列和编码第一细胞因子的第二外源性多核苷酸序列;以及(b)第二经工程化的核酸,所述第二经工程化的核酸包含第二表达盒和第三表达盒,所述第二表达盒包含可操作地连接至编码第二细胞因子的第三外源性多核苷酸序列的合成转录因子应答启动子,所述第三表达盒包含可操作地连接至编码有条件激活控制多肽(acp)的第四外源性多核苷酸序列的第三启动子,其中所述acp包含合成转录因子,所述合成转录因子包含dna结合结构域和转录效应子结构域,其中所述acp能够通过结合至所述acp应答启动子来诱导所述第三外源性多核苷酸序列的表达,其中所述第二外源性多核苷酸序列和所述第三外源性多核苷酸序列中的至少一者编码从n末端到c末端取向的膜可切割嵌合蛋白,所述膜可切割嵌合蛋白具有下式:s–c–mt或mt–c–s,其中s包含有包含第一细胞因子和/或第二细胞因子的可分泌效本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种免疫应答细胞,其包含:

2.根据权利要求1所述的免疫应答细胞,其中:

3.根据权利要求1或权利要求2所述的免疫应答细胞,其中:

4.根据权利要求1至3中任一项所述的免疫应答细胞,其中:

5.根据权利要求1至4中任一项所述的免疫应答细胞,其中:

6.根据权利要求1至5中任一项所述的免疫应答细胞,其中:

7.根据权利要求1至6中任一项所述的免疫应答细胞,其中:

8.根据权利要求1至7中任一项所述的免疫应答细胞,其中所述细胞选自由以下组成的群组:T细胞、CD8+T细胞、CD4+T细胞、γ-δT细胞、细胞毒性T淋巴细胞(CTL)、调节性T细胞、病毒特异性T细胞、自然杀伤T(NKT)细胞、自然杀伤(NK)细胞、B细胞、肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)、先天淋巴样细胞、肥大细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜中性粒细胞、髓系细胞、巨噬细胞、单核细胞、树突细胞、红细胞、血小板细胞、人胚胎干细胞(ESC)、ESC衍生细胞、多能干细胞、间充质干细胞(MSC)、诱导多能干细胞(iPSC)和iPSC衍生细胞,>

9.一种经工程化的核酸,其包含:

10.一种经工程化的核酸,其包含:

11.一种表达载体,其包含根据权利要求9或权利要求10所述的经工程化的核酸。

12.一种免疫应答细胞,其包含根据权利要求9或权利要求10所述的经工程化的核酸,或根据权利要求11所述的表达载体。

13.一种药物组合物,其包含根据权利要求1至8或12中任一项所述的免疫应答细胞、根据权利要求9或10所述的经工程化的核酸或根据权利要求11所述的表达载体,以及药学上可接受的载剂、药学上可接受的赋形剂或其组合。

14.一种在受试者中刺激针对肿瘤细胞的细胞介导的免疫应答、减小肿瘤体积或提供抗肿瘤免疫的方法,所述方法包括向有此需要的受试者施用治疗有效剂量的根据权利要求1至8或12中任一项所述的免疫应答细胞、根据权利要求9或10所述的经工程化的核酸、根据权利要求11所述的表达载体或根据权利要求13所述的药物组合物中的任一者,

15.一种治疗患有癌症的受试者的方法,所述方法包括施用治疗有效剂量的根据权利要求1至8或12中任一项所述的免疫应答细胞中的任一者、根据权利要求9或10所述的经工程化的核酸、根据权利要求11所述的表达载体或根据权利要求13所述的药物组合物,

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【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种免疫应答细胞,其包含:

2.根据权利要求1所述的免疫应答细胞,其中:

3.根据权利要求1或权利要求2所述的免疫应答细胞,其中:

4.根据权利要求1至3中任一项所述的免疫应答细胞,其中:

5.根据权利要求1至4中任一项所述的免疫应答细胞,其中:

6.根据权利要求1至5中任一项所述的免疫应答细胞,其中:

7.根据权利要求1至6中任一项所述的免疫应答细胞,其中:

8.根据权利要求1至7中任一项所述的免疫应答细胞,其中所述细胞选自由以下组成的群组:t细胞、cd8+t细胞、cd4+t细胞、γ-δt细胞、细胞毒性t淋巴细胞(ctl)、调节性t细胞、病毒特异性t细胞、自然杀伤t(nkt)细胞、自然杀伤(nk)细胞、b细胞、肿瘤浸润性淋巴细胞(til)、先天淋巴样细胞、肥大细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜中性粒细胞、髓系细胞、巨噬细胞、单核细胞、树突细胞、红细胞、血小板细胞、人胚胎干细胞(esc)、esc衍生细胞、多能干细胞、间充质干细胞(msc)、诱导多能干细胞(ipsc)和ipsc衍生细胞,

9.一种经工程化的核酸,其包含:

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【专利技术属性】
技术研发人员:M·古兹曼·阿亚拉R·M·戈德莱M·E·鸿G·李T·KT·卢
申请(专利权)人:森迪生物科学公司
类型:发明
国别省市:

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