骨转移特异性分泌蛋白DKK3在肺癌骨转移早期诊断中的应用制造技术

本发明专利技术属于生物医药技术领域，公开了骨转移特异性分泌蛋白DKK3在肺癌骨转移早期诊断中的应用，具体公开了检测DKK3的物质在制备肺癌骨转移诊断或早期筛查的产品中的应用。本发明专利技术首次公开了分泌蛋白DKK3表达和肺癌特异性骨转移的关系，并验证了分泌蛋白DKK3在肺癌骨转移患者血清标本以及肺癌骨转移细胞中呈特异性高表达，提示分泌蛋白DKK3可作为一种新型的肺癌骨转移诊断标志物，能显著区分发生骨转移的肺癌病人与其他器官转移的肺癌病人和健康人。康人。

【技术实现步骤摘要】
骨转移特异性分泌蛋白DKK3在肺癌骨转移早期诊断中的应用


[0001]本专利技术属生物医药
，具体涉及骨转移特异性分泌蛋白DKK3在肺癌骨转移早期诊断中的应用。

技术介绍

[0002]肿瘤的侵袭转移是恶性肿瘤的特征，恶性肿瘤的复发与转移倾向给肿瘤治疗带来极大的困难。肿瘤发生转移不仅是预后不良的征兆，也是癌症患者死亡的主要原因，据统计超过90％的癌症病人的死于肿瘤转移。肺癌是全球发病率和死亡率最高的恶性肿瘤,每年大约有180万例肺癌确诊病人以及160万死亡病例。由于肺癌的临床症状表现多样，早期症状不明显，并且缺乏有效的早期诊断靶标，因此超过70％的肺癌患者在确诊时，已发生局部浸润、淋巴结或远端器官转移等恶性进展。出现远端转移的肺癌患者的中位生存期小于5个月，而骨是肺癌病人发生转移的最常见的远端转移器官。
[0003]由于骨转移在早期通常无症状，许多患者在就医时已经出现骨痛或病理性骨折等骨相关事件时，出现骨相关事件意味着已经出现较大的转移病灶且预后不良。临床实践中，常应用骨显像如：放射性核素骨扫描、PET、PET
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CT和MRI等诊断肿瘤患者是否发生骨转移，但骨显像技术存在成本高、诊断不及时等缺点，且在灵敏度、特异性和可操作性上均有一定的局限性。
[0004]近年来，随着关于肿瘤骨转移的研究更加深入，骨转移诊断的生物标记物研究取得了一定进展。研究人员发现，相对于没有骨转移的前列腺癌患者，骨转移患者血清中ProGRP的水平明显升高。通过前瞻性研究，研究人员发现骨钙蛋白阳性的循环肿瘤细胞出现意味着患者更易发生骨转移。而在晚期肺癌患者中，肿瘤细胞中CXCR4、BSP、OPN以及BMP4等蛋白的表达水平与骨转移风险呈正相关。但是，上述研究目前均处于临床前研究阶段，目前尚无骨转移特异性的肿瘤标记物引用于临床，因此，探讨肺癌骨转移的分子机制，寻找新的、高灵敏度的骨转移早期诊断标志物具有重要的临床价值。

技术实现思路

[0005]本专利技术第一方面的目的，在于提供检测DKK3的物质在制备肺癌骨转移诊断或早期筛查的产品中的应用。
[0006]本专利技术第二方面的目的，在于提供DKK3作为生物标志物在制备肺癌骨转移早期诊断的产品中的应用。
[0007]本专利技术第三方面的目的，在于提供DKK3的抑制性试剂在制备预防、抑制和/或肺癌骨转移药物中的应用。
[0008]本专利技术第四方面的目的，在于提供DKK3作为靶点在筛选治疗或预防肺癌骨转移的药物中的应用。
[0009]本专利技术第五方面的目的，在于提供一种肺癌骨转移动物模型的构建方法。
[0010]为了实现上述目的，本专利技术所采取的技术方案是：
[0011]本专利技术的第一个方面，提供检测DKK3的物质在制备肺癌骨转移诊断或早期筛查的产品中的应用。
[0012]优选地，所述物质包括定量检测DKK3的物质。
[0013]优选地，所述检测DKK3的物质包含在基因水平和/或蛋白质水平上检测DKK3的物质。
[0014]优选地，所述检测DKK3的物质是用于选自下组的一种或多种检测技术或方法中的物质：酶联免疫吸附试验、免疫荧光法、放射免疫测定法、免疫共沉淀法、免疫印迹法、高效液相色谱法、毛细管凝胶电泳法、近红外光谱法、质谱法、免疫化学发光法、胶体金免疫技术、荧光免疫层析技术、表面等离子共振技术、免疫
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PCR技术或生物素
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亲和素技术。
[0015]优选地，所述检测DKK3的物质选自：对DKK3具有特异性的物质、DKK3特异性的探针、基因芯片、PCR引物等。
[0016]优选地，所述对DKK3具有特异性的物质为(b1)～(b3)中的任一种：
[0017](b1)特异性结合DKK3的抗体；
[0018](b2)特异性结合DKK3的配体蛋白或多肽；
[0019](b3)特异性识别DKK3的非蛋白类化合物。
[0020]优选地，所述的抗体包括多克隆抗体、单克隆抗体、单链抗体、功能性抗体片段、抗体Fab区，纳米抗体、嵌合抗体、多特异性抗体中的至少一种。
[0021]优选地，所述产品包含试剂、试剂盒、试纸、芯片中的至少一种。
[0022]优选地，所述产品的受试者的样品可以选自从受试者分离的体液样品、肿瘤样品和细胞样品。
[0023]优选地，所述体液包括但不限于血液、血浆、血清、淋巴液、脑脊髓液、滑液、尿液、唾液、粘液等；所述肿瘤样品的形式包括但不限于活体组织、石蜡包埋组织、冰冻组织等形式；所述细胞样品可以选自可以从受试者分离的细胞，比如外周血单个核细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞、循环肿瘤细胞等。
[0024]优选地，当待测对象的DKK3相对于参考水平显著升高，则诊断为肺癌骨转移；所述参考水平为未患有肺癌骨转移的同年龄段受试者的水平。
[0025]优选地，所述同年龄段受试者为健康人和/或无骨转移的肺癌患者。
[0026]术语“无骨转移”在医学领域是指未发生伴骨转移，通常来说，对收集的肿瘤样本进行分析，如果肿瘤样本未发生骨转移，则归类为无骨转移肿瘤样本，本领域技术人员应该知晓，无骨转移肿瘤样本可能是未发生任何转移的肿瘤样本，也有可能是发生了其他非骨转移(如肝、脑、肺)的肿瘤样本。
[0027]优选地，所述肺癌包括非小细胞肺癌、小细胞肺癌。
[0028]优选地，所述非小细胞肺癌包括鳞状细胞癌(鳞癌)、腺癌、大细胞癌。
[0029]优选地，所述DKK3在肺癌骨转移患者体内表达上调。
[0030]本专利技术的第二个方面，提供DKK3作为生物标志物在制备肺癌骨转移早期诊断的产品中的应用。
[0031]优选地，所述产品包括试剂、试剂盒、试纸、芯片中的至少一种。
[0032]本专利技术的第三个方面，提供DKK3的抑制性试剂在制备预防、抑制和/或肺癌骨转移药物中的应用。
[0033]优选地，所述DKK3的抑制性试剂包含抑制DKK3活性的物质、降解DKK3的物质、降低DKK3表达水平的物质中的至少一种。
[0034]优选地，所述DKK3的抑制性试剂包括能够全部或部分抑制DKK3基因表达的物质，和/或抑制DKK3蛋白发挥功效的物质。
[0035]优选地，所述PDKK3的抑制性试剂选自：蛋白质、寡核苷酸、寡核苷酸表达载体、小分子化合物。
[0036]优选地，所述表达载体包括真核细胞表达载体，所述真核细胞表达载体包括质粒表达载体或病毒表达载体。
[0037]本专利技术的第四个方面，提供DKK3作为靶点在筛选治疗或预防肺癌骨转移的药物中的应用。
[0038]本专利技术的第五个方面，提供一种肺癌骨转移动物模型的构建方法，包括以下步骤：将过表达DKK3的表达盒、载体或细胞系置于动物体内，即得到肺癌骨转移动物模型。
[0039]优选地，所述载体包括质粒载体、病毒载体或真核表达载体。
[0040]优选地，所述质粒载体可以是任选的质粒，所述真核表达载体不包括繁本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.检测DKK3的物质在制备肺癌骨转移诊断或早期筛查的产品中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述物质包括定量检测DKK3的物质。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述检测DKK3的物质包含在基因水平和/或蛋白质水平上检测DKK3的物质。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述检测DKK3的物质是用于选自下组的一种或多种检测技术或方法中的物质：酶联免疫吸附试验、免疫荧光法、放射免疫测定法、免疫共沉淀法、免疫印迹法、高效液相色谱法、毛细管凝胶电泳法、近红外光谱法、质谱法、免疫化学发光法、胶体金免疫技术、荧光免疫层析技术、表面等离子共振技术、免疫
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PCR技术或生物素
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亲和素技术。5.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：黎孟枫，蔡俊超，陶天予，刘蕾，梁嘉儿，吴珏珩，何伟玲，霍励耘，林湛文，陈梓烁，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：