一种利用HPLC外标法测定盐酸普拉克索原料中硫脲含量的方法技术

本发明专利技术公开了一种利用HPLC外标法测定盐酸普拉克索原料中硫脲含量的方法，该方法以Waters X

【技术实现步骤摘要】
一种利用HPLC外标法测定盐酸普拉克索原料中硫脲含量的方法


[0001]本专利技术属于分析检测
，涉及盐酸普拉克索原料中基因毒性杂质硫脲的定量分析方法，具体涉及一种利用HPLC外标法测定盐酸普拉克索原料中硫脲含量的方法。
技术背景
[0002]基因毒性杂质是指能直接或间接损害DNA，导致基因突变或具有致癌倾向的物质。基因毒性杂质的特点是可与DNA反应，造成DNA损伤，在很低水平下即可诱发基因突变，并可能致癌，在用药过程中严重威胁到人类的健康。基因毒性杂质的来源主要为原料药合成过程中的起始物料、中间体、试剂和反应副产物，此外，药物在合成、储存或者制剂过程中也可能因降解而产生基因毒性杂质。
[0003]由于基因毒性杂质在很低的浓度下即可诱导基因突变并导致染色体的断裂和重排，因此具有潜在的致癌性，近年来对其关注也越来越重，欧盟、美国等药品监管机构也相继发布了关于基因毒和致癌性杂质的指导原则。我国加入ICH以后，药品研发技术要求势必与国际接轨，对于基因毒性杂质的评估要求也必然与ICH成员国要求统一甚至趋于更加严格。
[0004]硫脲是重要的化工中间体，在2017年10月27日世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单中，硫脲属于3类致癌物。盐酸普拉克索作为治疗帕金森病的特效药，在生产过程中由于相关试剂的使用，会产生痕量的硫脲。因此，对于盐酸普拉克索中的硫脲这一基因毒性杂质的质量控制对于保障药物安全非常重要，需要建立分析方法，实现该物质的准确和快速的定量分析。据文献报道，目前硫脲的检测方法主要有化学分析法、电化学法、光度法、离子色谱法等。目前我国尚无盐酸普拉克索原料中硫脲的标准检测方法。

技术实现思路

[0005]针对现有技术中存在的不足，本专利技术提供了一种利用HPLC外标法测定盐酸普拉克索原料中硫脲含量的方法，该方法基于高效液相色谱技术对盐酸普拉克索中的基因毒性杂质硫脲含量进行检测，具有分析速度快、灵敏度高、检测限低等优势。
[0006]本专利技术具体技术方案如下：
[0007]一种利用HPLC外标法测定盐酸普拉克索原料中硫脲含量的方法，该方法采用高效液相色谱仪对盐酸普拉克索原料进行检测，采用外标法进行定量分析，色谱条件如下：
[0008]色谱柱：Waters X
‑
Bridge RP
‑
18；
[0009]流动相A：水：乙腈体积比95:5的混合物；
[0010]流动相B：体积分数0.1％的三氟乙酸水溶液(用三乙胺调节pH至5.0)：乙腈体积比90:10的混合物；
[0011]流动相采用梯度洗脱，洗脱程序如下：
[0012]时间(min)流动相A(体积％)流动相B(体积％)
010003100040100150100161000221000
[0013]进一步的，检测波长为240
‑
250nm。
[0014]进一步的，色谱柱柱温为32
‑
37℃。
[0015]进一步的，流动相流速为0.5
‑
1.0mL/min，进样体积为15
‑
20μL。
[0016]进一步的，Waters X
‑
Bridge RP
‑
18色谱柱的尺寸为150mm
×
3.0mm
×
3.5μm。
[0017]进一步的，检测时，取硫脲对照品适量，精密称定，用流动相A稀释制成不同浓度的硫脲对照品溶液，分别注入高效液相色谱检测，得到硫脲浓度和峰面积的标准曲线；然后，取待测的盐酸普拉克索原料样品适量，精密称定，用流动相A稀释配成供试品溶液，注入高效液相色谱检测，所得硫脲峰面积带入标准曲线，即得样品中硫脲含量。
[0018]进一步的，供试品溶液中盐酸普拉克索原料的浓度为1mg/ml。
[0019]进一步的，在实验的过程中，还包括单独对稀释剂即流动相A进行检测的步骤，以证明该流动相中是否有干扰硫脲的物质的存在。
[0020]进一步的，在实验的过程中，还包括单独对盐酸普拉克索对照品及盐酸普拉克索有关物质对照品进行检测的步骤，以证明盐酸普拉克索及盐酸普拉克索5种有关物质[N
‑
(4
‑
氧
‑
环己基)
‑
乙酰胺、N
‑
(4
‑
羟基
‑
环己基)
‑
乙酰胺、4
‑
乙酰氨基酚、L
‑
酒石酸和(S)
‑
2,6
‑
二氨基
‑
4,5,6,7
‑
四氢苯并噻唑]对硫脲的测试无干扰。经实验验证，本专利技术方法对上述有关物质均能良好的分离，互不干扰。
[0021]进一步的，在实验的过程中，还包括对盐酸普拉克索供试品进样检测的步骤，以证明供试品溶液中的其他物质对硫脲的测试无干扰。
[0022]进一步的，在实验的过程中，配制浓度为0.0053μg/mL的硫脲对照品溶液，进样体积20.0μL，使硫脲峰值的信噪比不小于10，测定该方法的灵敏度。
[0023]上述检测方法经验证具有以下优异性能：
[0024][0025]本专利技术方法以Waters X
‑
Bridge RP
‑
18色谱柱为分离色谱柱，采用紫外光检测器，以体积分数5％的乙腈水溶液和体积比90:10的0.1体积％三氟乙酸水溶液(三乙胺调节pH至5.0)与乙腈的混合液作为流动相，采用梯度洗脱方式，以硫脲为对照品，用外标法绘制硫脲标准物质浓度
‑
峰面积标准曲线，得出标准曲线的回归方程，通过该回归方程以盐酸普拉克索原料中硫脲峰面积计算得到硫脲含量。本专利技术具有以下有益效果：
[0026]1、目前我国尚无盐酸普拉克索原料中硫脲的标准检测方法，本专利技术首次建立了硫脲的高效液相色谱检测方法，实现了对盐酸普拉克索原料中硫脲的定量分析。
[0027]2、本专利技术检测方法准确度高，灵敏度高，检测限低，检测限为1.3ppm，定量限为5.3ppm，可以实现对盐酸普拉克索中的低含量硫脲进行定量和定性检测。
[0028]3、本专利技术检测方法硫脲与盐酸普拉克索及其有关物质N
‑
(4
‑
氧
‑
环己基)
‑
乙酰胺、N
‑
(4
‑
羟基
‑
环己基)
‑
乙酰胺、4
‑
乙酰氨基酚、L
‑
酒石酸、(S)
‑
2,6
‑
二氨基
‑
4,5,6,7
‑
四氢苯并噻唑都有良好的分离效果，互不干扰。
[0029]4、本专利技术检测方法所得的硫脲浓度线性范围为0.0053μg/mL～0.678μg/mL，线性方本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种利用HPLC外标法测定盐酸普拉克索原料中硫脲含量的方法，其特征是：采用高效液相色谱仪对盐酸普拉克索原料进行检测，采用外标法进行定量分析，色谱条件如下：色谱柱：Waters X
‑
Bridge RP
‑
18；流动相A：体积分数5%的乙腈水溶液；流动相B：体积比90:10的0.1体积%的三氟乙酸水溶液与乙腈的混合液，三氟乙酸水溶液用三乙胺调节pH至5.0；流动相采用梯度洗脱，洗脱程序为：0
‑
3min，流动相A 的体积分数为100%；3
‑
4min，流动相A的体积分数从100%变为0%；4
‑
15min，流动相A的体积分数为0%；15
‑
16min，流动相A的体积分数从0%变为100%；16
‑
22min，流动相A 的体积分数为100%。2.根据权利要求1所述的方法，其特征是：检测波长为240
‑
250nm。3.根据权利要求1所述的方法，其特征是：色谱柱柱温为32
‑
37℃。4.根据权利要求1所述的方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘海东，宋泽选，孟庆勇，马松，张雪，唐重智，庄福君，
申请(专利权)人：上海橡实化学有限公司，
类型：发明
国别省市：