一种人源化Claudin18.2抗体及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种人源化Claudin 18.2抗体及其应用。具体地，本发明专利技术公开了靶向细胞表达的Claudin 18.2的人源化Claudin 18.2单克隆抗体、编码抗体或其片段的核酸序列及其制备方法。体外实验证明本发明专利技术的抗体能够以高亲和力特异性结合细胞表面表达的Claudin 18.2，并且经过人源化改造降低了异源性抗体的免疫原性，更有利于应用到人体。更有利于应用到人体。

【技术实现步骤摘要】
一种人源化Claudin 18.2抗体及其应用


[0001]本专利技术涉及生物工程和抗体领域，具体地涉及一种人源化的抗Claudin 18.2抗体及其制备方法。

技术介绍

[0002]胃肠道和胰腺肿瘤对于人类生命是很大的威胁，虽然手术治疗、放化疗、介入治疗等治疗手段对于该类肿瘤有一定疗效，但患者生存率仍无显著改善。
[0003]细胞免疫治疗是一种正在兴起的肿瘤治疗方法，其通过分子生物学技术构建嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor，CAR)的表达载体，并将该表达载体导入到从人体分离的免疫细胞中，使其细胞表面表达CAR后进行扩增培养，将其回输至人体。CAR由抗原识别域、铰链区和跨膜区及胞内信号域依次连接组成,表达CAR的免疫细胞能够特异性识别并结合靶细胞，通过释放特异的免疫因子对其进行杀伤。
[0004]胃癌是世界上最常见的癌症之一，在中国，胃癌是第二大常见恶性肿瘤,被认为是全世界最难治愈的癌症之一。尽管近年来在治疗选择方面取得了进步，但是胃癌复发难以避免，晚期胃癌患者的五年生存率约为5
–
20％，中位总体生存期约为10个月。随着胃癌发生、发展分子机制研究的深入，靶向治疗成为一种有效的晚期癌症的治疗方案，靶点主要包括EGFR、HER
‑
2、VEGF、VEGFR等。CLDN18.2作为一个高度特异性表达的细胞表面分子，在正常的组织中仅表达在分化的胃粘膜上皮细胞上，因此需要开发具有更大抗胃癌潜力、更低毒性、更低用药剂量的针对CLDN18.2的治疗性抗体。
[0005]鼠源单抗对人体具有异源性反应，可诱发人抗鼠抗体效应(Human anti
‑
mouse antibodies,HAMA反应)，使得抗体或者CART的治疗效果滞后。
[0006]综上所述，本领域急需开发一种新的CLDN18.2抗体用于肿瘤治疗。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的在于提供一种靶向表达Claudin 18.2(CLDN 18.2)的细胞的人源化抗体及其应用。
[0008]本专利技术的第一方面，提供了一种人源化Claudin 18.2(CLDN 18.2)抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段包含重链和轻链，
[0009]其中，所述重链的重链可变区包括以下三个互补决定区CDR：
[0010]如SEQ ID NO:12所示的CDR1；
[0011]如SEQ ID NO:13所示的CDR2；和
[0012]如SEQ ID NO:14所示的CDR3；
[0013]以及，所述轻链的轻链可变区包括以下三个互补决定区CDR：
[0014]如SEQ ID NO:15所示的CDR1
’
；
[0015]如SEQ ID NO:16所示的CDR2
’
；和
[0016]如SEQ ID NO:17所示的CDR3
’
。
[0017]在另一优选例中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:1至6中任一所示的抗体重链可变区。
[0018]在另一优选例中，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:7至9中任一所示的抗体轻链可变区。
[0019]在另一优选例中，所述重链可变区的亲和力与鼠源的SEQ ID NO:10所示的重链可变区的亲和力在一个数量级；
[0020]在另一优选例中，所述轻链可变区的亲和力与鼠源的SEQ ID NO:11所示的轻链可变区的亲和力在一个数量级。
[0021]在另一优选例中，所述SEQ ID NO:13的序列为MIHPNX1GSTN，其中X1为Ser(S)或Thr(T)。
[0022]在另一优选例中，所述SEQ ID NO:14的序列为GGYYGNX2LDF，其中X2为Ser(S)或Thr(T)。
[0023]在另一优选例中，所述SEQ ID NO:16的序列为WASX3X4X5S，其中X3为Ser(S)或Thr(T)；X4为Arg(R)或Leu(L)；X5为Glu(E)或Gln(Q)。
[0024]在另一优选例中，所述抗体重链可变区包括以下三个互补决定区CDR：
[0025]如SEQ ID NO:12所示的CDR1；
[0026]如SEQ ID NO:38所示的CDR2；和
[0027]如SEQ ID NO:39所示的CDR3；
[0028]以及，所述抗体轻链可变区包括以下三个互补决定区CDR：
[0029]如SEQ ID NO:15所示的CDR1
’
；
[0030]如SEQ ID NO:40所示的CDR2
’
；和
[0031]如SEQ ID NO:17所示的CDR3
’
。
[0032]在另一优选例中，所述抗体重链可变区包括以下三个互补决定区CDR：
[0033]如SEQ ID NO:12所示的CDR1；
[0034]如SEQ ID NO:41所示的CDR2；和
[0035]如SEQ ID NO:42所示的CDR3；
[0036]以及，所述抗体轻链可变区包括以下三个互补决定区CDR：
[0037]如SEQ ID NO:15所示的CDR1
’
；
[0038]如SEQ ID NO:40所示的CDR2
’
；和
[0039]如SEQ ID NO:17所示的CDR3
’
。
[0040]在另一优选例中，所述抗体重链可变区包括以下三个互补决定区CDR：
[0041]如SEQ ID NO:12所示的CDR1；
[0042]如SEQ ID NO:38所示的CDR2；和
[0043]如SEQ ID NO:39所示的CDR3；
[0044]以及，所述抗体轻链可变区包括以下三个互补决定区CDR：
[0045]如SEQ ID NO:15所示的CDR1
’
；
[0046]如SEQ ID NO:43所示的CDR2
’
；和
[0047]如SEQ ID NO:17所示的CDR3
’
。
[0048]在另一优选例中，所述抗体重链可变区包括以下三个互补决定区CDR：
[0049]如SEQ ID NO:12所示的CDR1；
[0050]如SEQ ID NO:38所示的CDR2；和
[0051]如SEQ ID NO:39所示的CDR3；
[0052]以及，所述抗体轻链可变区包括以下三个互补决定区CDR：
[0053]如SEQ ID NO:15所示的CDR1
’
；
[0054]如SEQ ID NO:44所示的CDR2
’
；和
[0055]如SEQ ID NO:17所示本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种人源化Claudin 18.2(CLDN 18.2)抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段包含重链和轻链，其中，所述重链的重链可变区包括以下三个互补决定区CDR：如SEQ ID NO:12所示的CDR1；如SEQ ID NO:13所示的CDR2；和如SEQ ID NO:14所示的CDR3；以及，所述轻链的轻链可变区包括以下三个互补决定区CDR：如SEQ ID NO:15所示的CDR1
’
；如SEQ ID NO:16所示的CDR2
’
；和如SEQ ID NO:17所示的CDR3
’
。2.如权利要求要求1所述的抗体，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:1至6中任一所示的抗体重链可变区。3.如权利要求要求1所述的抗体，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段包含SEQ ID NO:7至9中任一所示的抗体轻链可变区。4.如权利要求1
‑
3中任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或其抗原结合片段具有如SEQ ID NO:18、19、20、21、22、23、24、25、26或27所示的氨基酸序列。5.一种嵌合抗原受体(CAR)，其特征在于，所述嵌合抗原受体包含如权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：董坚，孙亚如，杨圣，聂紫，李文荣，方捷，
申请(专利权)人：上海莱馥医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：