高产L-苏氨酸的基因工程菌及其构建方法与应用技术

本发明专利技术提供一种高产L

【技术实现步骤摘要】
高产L
‑
苏氨酸的基因工程菌及其构建方法与应用


[0001]本专利技术涉及生物
，具体地说，涉及一种高产L
‑
苏氨酸的基因工程菌及其构建方法与应用。

技术介绍

[0002]L
‑
苏氨酸是人和动物生长必需的8种氨基酸之一，其广泛应用于饲料、食品添加及药物辅助材料制备等。目前L
‑
苏氨酸主要通过微生物发酵生产，多种细菌可用于L
‑
苏氨酸生产，如大肠杆菌、棒状杆菌属、沙雷氏菌属等的野生型诱导获得的突变株作为生产菌株。具体实例包括抗氨基酸类似物突变株或甲硫氨酸、赖氨酸、异亮氨酸等多种营养缺陷型。然而，传统诱变育种由于随机突变造成菌株生长缓慢及产生较多副产物，不易获得高产菌株。
[0003]随着全球苏氨酸需求量的不断增加，高产苏氨酸菌株的构建和改造尤为重要。2003年韩国CJ株式会社申请的中国专利CN03811059.8中，利用大肠杆菌，通过缺失苏氨酸操纵子序列的第
‑
56至
‑
18位的39bp序列，增强苏氨酸合成关本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种提高L
‑
苏氨酸发酵产量的方法，其特征在于，所述方法包括弱化或失活发酵菌种中异柠檬酸脱氢酶基因或者与异柠檬酸脱氢酶的氨基酸序列具有80％以上同源性且表达相同功能蛋白的编码基因；所述发酵菌种为具有苏氨酸生产能力的细菌。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述细菌为埃希氏菌属(Escherichia)菌种或棒杆菌属(Corynebacterium)菌种。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述细菌为大肠杆菌(Escherichia coli)或谷氨酸棒状杆菌(Corynebacterium glutamicum)。4.高产L
‑
苏氨酸的基因工程菌的构建方法，其特征在于，所述方法包括弱化或失活大肠杆菌或谷氨酸棒状杆菌中异柠檬酸脱氢酶基因，并将获得的基因弱化或失活菌株用于L
‑
苏氨酸发酵生产；大肠杆菌异柠檬酸脱氢酶基因在NCBI上的Gene ID：945702；谷氨酸棒状杆菌异柠檬酸脱氢酶基因在NCBI上的GeneID：1018663。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述弱化或失活选自异柠檬酸脱氢酶基因的起始密码子弱化、启动子弱化、RBS序列弱化或失活中的至少一种。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，起...

【专利技术属性】
技术研发人员：尹春筱，刘慧敏，康培，
申请(专利权)人：廊坊梅花生物技术开发有限公司，
类型：发明
国别省市：