一株双厌氧启动子诱导产高光学纯D-乳酸的工程菌及其制备方法与应用技术

本发明专利技术提供了一株双厌氧启动子诱导产高光学纯D

【技术实现步骤摘要】
一株双厌氧启动子诱导产高光学纯D
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乳酸的工程菌及其制备方法与应用


[0001]本专利技术涉及微生物学、生物化学和发酵工程
，特别涉及一株产高光学纯度D
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乳酸的工程菌及其制备方法与应用。

技术介绍

[0002]乳酸作为在食品，医药，化工，化妆品等行业的重要原料，具有巨大的生产经济价值。据报道，2016年全球乳酸总产量达到122万吨，并且每年以16.2％的比例增长(Xuejiao Tian,Hao Chen,Hao Liu,Jihong Chen,Recent advances in lactic acid production by lactic acid bacteria,Appl Biochem Biotechnol,2021,193(12):4151
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4171)。D
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乳酸是一种农药合成的手性中间体，也是合成高耐热性聚乳酸材料的前体，因此其生产和应用受到广泛关注。有研究证明，D
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乳酸的光学纯度是决定合成高耐热性聚乳酸(PLA)和手性农药的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株双厌氧启动子诱导产高光学纯D
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乳酸的工程菌，其特征在于，所述双厌氧启动子诱导产高光学纯D
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乳酸的工程菌为Escherichia coli HBUT
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D
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DNL，保藏编号为：CCTCC NO：M 2022448。2.一种权利要求1所述的工程菌在发酵高产光学纯D
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乳酸中的应用。3.一种发酵菌剂，其特征在于，所述发酵菌剂包括：将如权利要求1所述的双厌氧启动子诱导产高光学纯D
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乳酸的工程菌进行发酵获得的发酵液；或将所述发酵液经喷雾干燥获得干粉菌剂。4.一种权利要求1所述的工程菌的制备方法，其特征在于，所述方法包括：以野生型E.coli W的基因组为模板，以SEQ ID NO.3
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SEQ ID NO.4所示的引物对进行扩增，获得片段1；以野生型E.coli W的基因组为模板，以SEQ ID NO.5
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SEQ ID NO.6所示的引物对进行扩增，获得片段2；将所述片段1和所述片段2为模板，以SEQ ID NO.7
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SEQ ID NO.8所示的引物对进行扩增，获得片段3；将所述片段3进行TA克隆并筛选阳性克隆，获得质粒pJH
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nlldD；以所述质粒pJH
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nlldD为模板，以SEQ ID NO.9
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SEQ ID NO.10所示的引物对进行扩增，并通过切胶回收纯化，获得片段4；使用限制性内切酶Hind III对质粒pAGI02进行酶切，并通...

【专利技术属性】
技术研发人员：王金华，赵筱，王永泽，王周，刘宗求，
申请(专利权)人：湖北工业大学，
类型：发明
国别省市：