重组大肠杆菌及其制备方法和应用以及降解塑料的方法技术

本发明专利技术涉及基因工程及代谢工程领域，公开了一种重组大肠杆菌及其制备方法和应用以及降解塑料的方法。本发明专利技术的重组大肠杆菌包括能够表达下述(1)和(2)的基因的基因表达盒：(1)来自铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)的烷烃单加氧酶基因，(2)来自假单胞菌(Pseudomonas sp.)的铜耐受多铜氧化酶基因。降解塑料的方法包括以下步骤：将上述重组大肠杆菌进行培养得到培养菌体，将所述培养菌体与塑料进行接触培养。该重组大肠杆菌能够同时降解聚乙烯塑料和聚丙烯塑料，有效提高塑料降解效率，且降解效果稳定。且降解效果稳定。且降解效果稳定。

【技术实现步骤摘要】
重组大肠杆菌及其制备方法和应用以及降解塑料的方法


[0001]本专利技术涉及基因工程及代谢工程领域，具体地，涉及一种重组大肠杆菌及其制备方法和应用以及降解塑料的方法。

技术介绍

[0002]聚乙烯(polyethylene，PE)是乙烯经聚合制成的热塑性树脂，具有化学稳定性好的特点，聚丙烯(polypropylene，PP)是丙烯通过加聚反应合成的聚合物，具有耐酸碱性好的特点。PP和PE属于聚烯烃类塑料，是应用最广泛的合成塑料，但同时也给环境带来了很大的压力，对塑料进行有效处理的方法也一直在探索中。
[0003]目前，处理塑料废物的主要方法是垃圾填埋、焚烧和回收。然而，垃圾填埋占用了很多土地资源，既耗时又不环保；焚烧会产生大量有毒气体和灰尘，导致二次污染；回收的方式无法满足塑料废物大量增长的需求。因此，研究者们一直致力于研究出生物降解的方法，实现塑料废物的有效、快速的降解。
[0004]人们对PE、PP的降解研究至今，很多研究者都专注于对降解菌株的筛选和关键降解酶的寻找。现有研究报道已公开的多种降解PE或PP的菌株，如链霉菌、芽本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种重组大肠杆菌，其特征在于，其包括能够表达下述(1)和(2)的基因的基因表达盒：(1)来自铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)的烷烃单加氧酶基因，(2)来自假单胞菌(Pseudomonas sp.)的铜耐受多铜氧化酶基因。2.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌，其特征在于，所述来自铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)的烷烃单加氧酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；所述来自假单胞菌(Pseudomonas sp.)的铜耐受多铜氧化酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。3.根据权利要求1或2所述的重组大肠杆菌，其特征在于，所述烷烃单加氧酶基因和/或所述铜耐受多铜氧化酶基因上连接有信号肽基因Omp A，所述信号肽基因Omp A的氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示；优选地，所述信号肽基因Omp A的核苷酸序列如SEQ ID NO：12所示。4.一种重组大肠杆菌的制备方法，其特征在于，该方法包括：将下述(1)和(2)的基因的基因表达盒导入大肠杆菌出发菌株；(1)来自铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)的烷烃单加氧酶基因，(2)来自假单胞菌(Pseudomonas sp.)的铜耐受多铜氧化酶基因。5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述来自铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)的烷烃单加氧酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；所述来自假单胞菌(Pseudomonas sp.)的铜耐受多铜氧化酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示；优选地，所述烷烃单加氧酶基因和/或所述铜耐受多铜氧化酶基因上连接有信号肽基因Omp A，所述信...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄和，张立慧，李蕴涵，胡方慧，赵金娣，
申请(专利权)人：南京师范大学，
类型：发明
国别省市：