一种口腔癌标志物线性表位融合肽及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种口腔癌标志物线性表位融合肽及其应用，该口腔癌标志物线性表位融合肽，包括融合肽1和融合肽2；所述融合肽1的核苷酸序列为：SKDQIKKLTSLKNKLERRQNRSQNPVQPIGPQTPKACDSK；所述融合肽2的核苷酸序列为：SKDQIKKLTSLKNKLERRQNEDERWTNNFREYNL；该口腔癌标志物线性表位融合肽可与T细胞表位融合，以促进免疫反应的发生，产生的抗血清具有较高的亲和力和特异性，为进一步制备高亲和力的单克隆抗体和检测试剂盒的开发打下良好基础，融合肽1和融合肽2通过化学偶联处理，可替代全长的MMP

【技术实现步骤摘要】
一种口腔癌标志物线性表位融合肽及其应用


[0001]本专利技术涉及生物工程
，具体的说是一种口腔癌标志物线性表位融合肽及其应用。

技术介绍

[0002]口腔癌是世界上第六大癌症，按照世卫组织的统计，每年新增大约657000例口腔癌患者。口腔癌患者的五年生存率大约为50％；然而2012年到2016年的统计数据发现，I、II、III、IV期的生存率分别为79.9％、71.0％、56.5％和35.6％。这些数据表明，口腔癌的早发现早治疗能大大提高生存率。
[0003]口腔粘膜检测是现阶段口腔癌临床评估的重要手段。损伤处的组织活检是口腔癌诊断的金标准。尽管如此，由于口腔癌的异质性，准确的选择活检位点是一个较大的挑战。按照世卫组织的统计，口腔粘膜的筛查的灵敏度和特异性分别为0.5
‑
0.99和0.64
‑
0.99；耗钱耗时、对临床医生的操作也要求较高；且具有侵入性。因此，灵敏度高、特异性好、操作方便的口腔癌检测指标对于口腔癌的早发现早治疗具有极其重要的意义。
[0004]在诸多口腔癌标志物中，金属基质蛋白酶
‑
1(MMP
‑
1)被认为是最有前途的一个检测指标，大多数口腔癌患者唾液中MMP
‑
1的含量比对照组高约83倍，具有较高的区分度，其灵敏度和特异性分别为69.5％和95％。由于检测的样品是唾液，检测基本无创，简单易行，方便居家检测，MMP
‑
1是一种较理想的检测指标。
[0005]综合研究表明，MMP
‑
1是最早被鉴定的MMP家族成员，该家族基因主要编码中心粒细胞胶原酶；参与细胞外基质的重构，与肿瘤发生过程的迁移、激动及炎症密切相关；其他一些癌症组织中，MMP
‑
1的表达也会上升。人体内编码该家族蛋白的基因有24个，具有较高的同源性，给MMP
‑
1特异性的抗体及后续检测试剂盒的研发带来巨大挑战。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提出了一种口腔癌标志物线性表位融合肽及其应用，该口腔癌标志物线性表位融合肽可与T细胞表位融合，以促进免疫反应的发生，产生的抗血清具有较高的亲和力和特异性，为进一步制备高亲和力的单克隆抗体和检测试剂盒的开发打下良好基础，融合肽1和融合肽2通过化学偶联处理，可替代全长的MMP
‑
1作为检测试剂盒的校准品。
[0007]为实现上述目的，本专利技术采用以下技术方案：
[0008]一种口腔癌标志物线性表位融合肽，包括融合肽1和融合肽2；
[0009]所述融合肽1的核苷酸序列为：
[0010]SKDQIKKLTSLKNKLERRQNRSQNPVQPIGPQTPKACDSK；
[0011]所述融合肽2的核苷酸序列为：
[0012]SKDQIKKLTSLKNKLERRQNEDERWTNNFREYNL。
[0013]优选地，所述融合肽1和融合肽2从基质金属蛋白酶
‑
1中提取或通过化学合成方法
获得。
[0014]一种口腔癌标志物线性表位融合肽的应用，将融合肽1和融合肽2偶联于载体蛋白或者与T细胞表位融合，用于免疫动物来获得MMP
‑
1特异性的免疫血清或进一步制备多克隆抗体和单克隆抗体。
[0015]优选地，所述载体蛋白为牛血清白蛋白BSA或血蓝蛋白KLH；所述T细胞表位是一种疟疾来源的小分子短肽，该小分子短肽的核苷酸序列为：
[0016]SKDQIKKLTSLKNKLERRQN。
[0017]一种口腔癌标志物线性表位融合肽的应用，将所述融合肽1和融合肽2用于MMP
‑
1的抗原或抗体的检测。
[0018]一种口腔癌标志物线性表位融合肽的应用，将所述融合肽1和融合肽2通过化学偶联处理，替代全长的MMP
‑
1作为检测试剂盒的校准品。
[0019]采用上述技术方案后，本专利技术与
技术介绍
相比，具有如下优点：本专利技术的融合肽1和融合肽2由于肽段较短，适合通过化学合成的方法获得，获取简单方便，成本较低；口腔癌标志物线性表位融合肽可与T细胞表位融合，以促进免疫反应的发生，产生的抗血清具有较高的亲和力和特异性，为进一步制备高亲和力的单克隆抗体和检测试剂盒的开发打下良好基础，同时线性表位的完全抗原的合成，包含T细胞表位及线性表位，有利于产生高效价的血清，且由于表位单一，减少不必要的抗体的生产，有利于特异性抗体的生产；此外，融合肽1和融合肽2通过化学偶联处理，可替代全长的MMP
‑
1作为检测试剂盒的校准品。
附图说明
[0020]图1为MMP
‑
1与MMP
‑
8的同源性分析，其中框住的为两个线性表位；
[0021]图2为本专利技术的融合肽1和融合肽2在MMP
‑
1结构中的位置图；
[0022]图3为本专利技术的融合肽1免疫血清对MMP
‑
1和MMP
‑
8的免疫滴度图；
[0023]图4为本专利技术的融合肽2免疫血清对MMP
‑
1和MMP
‑
8的免疫滴度图。
具体实施方式
[0024]为了使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。
[0025]参见图1至图4，一种口腔癌标志物线性表位融合肽，包括融合肽1和融合肽2；
[0026]所述融合肽1的核苷酸序列为：
[0027]SKDQIKKLTSLKNKLERRQNRSQNPVQPIGPQTPKACDSK；
[0028]所述融合肽2的核苷酸序列为：
[0029]SKDQIKKLTSLKNKLERRQNEDERWTNNFREYNL。
[0030]所述融合肽1和融合肽2从基质金属蛋白酶
‑
1中提取或通过化学合成方法获得。
[0031]一种口腔癌标志物线性表位融合肽的应用，将融合肽1和融合肽2偶联于载体蛋白或者与T细胞表位融合，用于免疫动物来获得MMP
‑
1特异性的免疫血清或进一步制备多克隆抗体和单克隆抗体。
[0032]所述载体蛋白为牛血清白蛋白BSA或血蓝蛋白KLH；所述T细胞表位是一种疟疾来
源的小分子短肽，该小分子短肽的核苷酸序列为：
[0033]SKDQIKKLTSLKNKLERRQN。
[0034]一种口腔癌标志物线性表位融合肽的应用，将所述融合肽1和融合肽2用于MMP
‑
1的抗原或抗体的检测。
[0035]一种口腔癌标志物线性表位融合肽的应用，将所述融合肽1和融合肽2通过化学偶联处理，替代全长的MMP
‑
1作为检测试剂盒的校准品。
[0036本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种口腔癌标志物线性表位融合肽，其特征在于，包括融合肽1和融合肽2；所述融合肽1的核苷酸序列为：SKDQIKKLTSLKNKLERRQNRSQNPVQPIGPQTPKACDSK；所述融合肽2的核苷酸序列为：SKDQIKKLTSLKNKLERRQNEDERWTNNFREYNL。2.如权利要求1所述的一种口腔癌标志物线性表位融合肽，其特征在于：所述融合肽1和融合肽2从基质金属蛋白酶
‑
1中提取或通过化学合成方法获得。3.一种如权利要求1
‑
2任一所述的口腔癌标志物线性表位融合肽的应用，其特征在于：将融合肽1和融合肽2偶联于载体蛋白或者与T细胞表位融合，用于免疫动物来获得MMP
‑
1特异性的免疫血清或进一步...

【专利技术属性】
技术研发人员：穆锦全，李多，屠嫩斐，
申请(专利权)人：宁波市健康口腔医学研究院，
类型：发明
国别省市：