miR-378作为胆固醇稳态调控靶点的应用制造技术

本发明专利技术揭示了miR

【技术实现步骤摘要】
miR
‑
378作为胆固醇稳态调控靶点的应用


[0001]本专利技术属于分子生物学
，更具体地，本专利技术涉及miR
‑
378作为胆固醇稳态调控靶点的应用。

技术介绍

[0002]MicroRNA是真核生物中一类长度一般在19～24nt，具有调控基因表达功能的小分子非编码RNA。MicroRNA多为体内合成，基因组中编码miRNA的基因在RNA聚合酶的作用下转录产生较长的初级转录产物(pri
‑
miRNA)，pri
‑
miRNA在Drosha的作用下被加工成具有茎环结构的microRNA前体(pre
‑
miRNA)，pre
‑
miRNA由转运蛋白5(Exportin
‑
5)转运出核，在细胞质中由Dicer进一步切割产生双链miRNA，随后miRNA双链发生解链，最终生成成熟的miRNA。成熟的miRNA会进入RNA诱导的沉默复合物(RISC)，从而引起靶基因mRNA的降解或翻译抑制，microRNA(miRNA)增加了基因转录后调控网络的稳定性。
[0003]甲状腺激素(TH)主要通过甲状腺激素受体(TR)发挥作用，甲状腺激素受体主要有α和β两种，它们在成体组织中差异表达。TRβ1是肝脏中的主要TR，主要负责TH对胆固醇代谢的影响。具有TRβ1突变的小鼠模型表现出胆固醇体内平衡的缺陷。基于对TH作用机制的理解，为了避免对心脏功能和下丘脑
‑
垂体
‑/>甲状腺轴的不良副作用，近年来在开发TRβ选择性或肝特异性TH激动剂方面取得了很大进展，用于治疗高胆固醇血症和预防动脉粥样硬化性心血管疾病。TH降低胆固醇的机制之一是能够促进胆汁酸(BA)的合成，从而增加胆固醇在肝内转化为BA和从体内消除胆固醇。胆汁酸的合成主要存在两条通路，一条是主要通过CYP7A1和CYP8B1合成胆酸(CA)的经典通路，另一条是主要通过CYP27A1和CYP7B1合成脱氧胆酸(CDCA)的旁通路。值得注意的是，人和小鼠的胆汁酸组成成分有一定的差别，在人体中经典通路合成的胆汁酸占绝大部分，但在小鼠中旁通路合成的胆汁酸最多可以占到百分之五十左右。此外，小鼠肝脏中旁通路合成的脱氧胆酸会在CYP2C70酶的催化作用下转化为aMCA和bMCA。肝脏中合成的胆汁酸会进入胆囊中与胆囊中的甘氨酸和牛磺酸共轭结合并储存在胆囊中。当机体进食以后，胆汁酸由胆囊分泌进入小肠中，并在小肠中的肠道菌群的作用下，与氨基酸解离，进一步代谢成次级胆汁酸，帮助消化和吸收。小肠中的胆汁酸大部分都会经过重新收进入血液然后运回胆囊存储，小部分会与粪便一起排出体外，机体会进一步合成新的胆汁酸以补充损失的胆汁酸。有研究报道TH能够直接通过TR结合在CYP7A1的启动子区域促进CYP7A1的表达但同时也有研究发现TH能够抑制CYP8B1的表达水平。此外，chip
‑
seq分析发现TH对胆汁酸合成通路中其他的酶也可能存在一定的调控作用，这也显示了TH在维持BA合成和体内稳态中发挥着重要作用。
[0004]尽管本领域对于胆固醇的调控有一定的研究，但本领域技术人员也已发现，TH或其类似物作为药物治疗高胆固醇血症等疾病时，会伴随很多的副作用。目前本领域中尚难以找到其它的替代药物，没有有效的途径来解决这一问题。
[0005]因此，本领域还需进一步地筛选出对于调控胆固醇有用的新的靶标，以期基于此获得对于调控胆固醇真正有用的药物。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供miR
‑
378作为胆固醇稳态调控靶点的应用。
[0007]在本专利技术的第一方面，提供miR
‑
378或其调节剂在制备调节血清胆固醇水平或胆汁酸水平的组合物中的用途。
[0008]在一个优选例中，所述的调节剂是上调剂，所述的miR
‑
378或其上调剂用于制备降低血清胆固醇水平或提高胆汁酸水平的组合物；较佳地，用于制备预防、改善或治疗高胆固醇相关疾病的组合物；更佳地，所述的高胆固醇相关疾病包括：高胆固醇血症，动脉粥样硬化。
[0009]在另一优选例中，所述的miR
‑
378或其上调剂还用于制备具有如下功能的组合物：提高CYP7B1、CYP8B1、CYP27A1的表达；或通过调控MAFG，参与TH对胆汁酸合成途径的调控网络。
[0010]在另一优选例中，所述的miR
‑
378的上调剂包括：miR
‑
378模拟物，miR
‑
378激动剂，miR
‑
378前体，表达miR
‑
378的表达系统、miR
‑
378表达刺激剂；
[0011]在另一优选例中，所述的表达系统包括(但不限于)：表达质粒、宿主细胞或病毒；所述的病毒包括腺病毒、腺相关病毒、慢病毒。
[0012]在另一优选例中，所述的调节剂是下调剂，所述的miR
‑
378的下调剂用于制备提高血清胆固醇水平或降低胆汁酸水平的组合物；较佳地，用于制备预防、改善或治疗低胆固醇相关疾病的组合物。
[0013]在另一优选例中，所述的miR
‑
378的下调剂包括：抑制或阻止miR
‑
378与其靶向基因位点结合的物质；较佳地为miR
‑
378的Antagomir，miR
‑
378的抑组合物(inhibitor，含表达抑组合物)，miR
‑
378的反义核酸或siRNA；较佳地所述靶向基因为MAFG。
[0014]在本专利技术的另一方面，提供一种用于预防、改善或治疗高胆固醇相关疾病的组合物，所述的组合物包括miR
‑
378上调剂，其包含表达miR
‑
378的表达系统；较佳地，所述的表达miR
‑
378的表达系统是包含有5
’‑
AGGGCTCCTGACTCCAGGTCCTGTGTGTTACCTAGAAATAGCACTGGACTTGGAGTCAGAAGGCCT
‑3’
(SEQ ID NO:2)核苷酸序列的表达质粒、病毒或宿主细胞。
[0015]在本专利技术的另一方面，提供一种用于制备预防、改善或治疗低胆固醇相关疾病的组合物，所述的组合物包括miR
‑
378下调剂，其包含抑制或阻止miR
‑
378与其靶向基因位点结合的物质；较佳地，其是miR
‑
378的Antagomir。
[0016]在本专利技术的另一方面，提供一种筛选调节血清胆固醇水平或胆汁酸水平的物质(包括潜在物质)的方法，所述方法包括：(1)用候选物处理表达miR
‑
378的体系；和(2)检测所述体系中miR
‑
378的表达；其中，若所述候选物可提高(优选显著本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.miR
‑
378或其调节剂在制备调节血清胆固醇水平或胆汁酸水平的组合物中的用途。2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的调节剂是上调剂，所述的miR
‑
378或其上调剂用于制备降低血清胆固醇水平或提高胆汁酸水平的组合物；较佳地，用于制备预防、改善或治疗高胆固醇相关疾病的组合物；更佳地，所述的高胆固醇相关疾病包括：高胆固醇血症，动脉粥样硬化。3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的miR
‑
378或其上调剂还用于制备具有如下功能的组合物：提高CYP7B1、CYP8B1、CYP27A1的表达；通过调控MAFG，参与TH对胆汁酸合成途径的调控网络。4.如权利要求2或3所述的用途，其特征在于，所述的miR
‑
378的上调剂包括：miR
‑
378模拟物，miR
‑
378激动剂，miR
‑
378前体，表达miR
‑
378的表达系统、miR
‑
378表达刺激剂；较佳地，所述的表达系统包括：表达质粒、宿主细胞或病毒；所述的病毒包括腺病毒、腺相关病毒、慢病毒。5.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的调节剂是下调剂，所述的miR
‑
378的下调剂用于制备提高血清胆固醇水平或降低胆汁酸水平的组合物；较佳地，用于制备预防、改善或治疗低胆固醇相关疾病的组合物。6.如权利要求5所述的用途，其特征在于，所述的miR
‑
378的下调剂包括：抑制或阻止miR
‑
378与其靶向基因位点结合的物质；较佳地为miR
‑
378的Antagomir，miR
‑
378的抑组合物，miR
‑
378的反义核酸或siRNA；较佳地所述靶向基因为MAFG。7.一种用于预防、改善或治疗高胆固醇相关疾病的组合物，所述的组合物包括miR
‑
378上调剂，其包含表达miR
‑
378的表达系统；较佳地，所述的表达miR
‑
378的表达系统是包含有5
’‑
AGGGCTCCTGACTCCAGGTCCTGTGTGTTACCTAGAAATAGCACTGGACTTGGAGTCAGAAGGCCT
‑3’
核苷酸序列的表达质粒、病毒或宿主细胞。8.一种用于制备预防、改善或治疗低胆固醇相关疾病的组合物，所述的组合物包括miR
‑
378下调剂，其包含抑制或阻止miR
‑
378与其靶向基因位点结合的物质；较佳地，其是miR
‑
378的Antagomir。9.一种筛选调节血清胆固醇水平或胆汁酸水平的物质的方法，所述方法包括：(1)用候选物处理表达miR
‑
378的体系；...

【专利技术属性】
技术研发人员：应浩，刘威，孙超，吴玉婷，
申请(专利权)人：中国科学院上海营养与健康研究所，
类型：发明
国别省市：