多能干细胞源心肌细胞的纯化方法技术

本发明专利技术提供了一种多能干细胞源心肌细胞的纯化方法，包括调控多能干细胞源心肌细胞p53信号通路的活性，激活该通路。所述方法可以提高多能干细胞源心肌细胞纯度；可以高效去除残留的未分化的多能干细胞，提高移植后安全性和药物研发数据的准确性；同时，所述方法作用时间窗口选择宽泛，对于早期分化及中后期分化的心肌细胞均能起到高效的纯化效果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物技术和细胞生物学领域；更具体地，本专利技术涉及一种多能干细胞源心肌细胞的纯化方法。

技术介绍

1、人多能干细胞(hpscs)可以在体外长期扩增，具有分化为人各组织细胞的能力，在人类早期发育、疾病模拟、药物毒性和研发、细胞治疗、组织器官构建和精准医学研究等多个领域具有重要的应用价值。到目前为止，已经建立了诱导hpscs向心肌细胞分化体系，并进一步将获得的心肌细胞应用于心脏发育、药物筛选、心脏疾病治疗研究等领域。

2、然而，在hpscs向心肌细胞分化过程中，受到起始细胞状态、分化条件、细胞相互作用等影响，导致不同批次获得的心肌细胞纯度存在较大差异。分化系统中存在的杂细胞会对心肌细胞功能产生不良影响，进而对以hpscs源心肌细胞为基础的应用(如药物毒性筛选和研发、对人源心肌细胞的作用与作用机制研究、心脏疾病模拟、细胞移植治疗心脏疾病等)带来有效性和安全性风险。如杂细胞(比如成纤维细胞)过多，由于不同细胞对损伤的耐受性不一致，可导致药物筛选批次之间出现较大差异，影响数据准确性；同时杂细胞可导致心肌细胞间电信号传导不良，在细胞治疗中带来本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种多能干细胞源心肌细胞的纯化方法，包括：提供含有多能干细胞源心肌细胞的细胞培养物，上调细胞中p53信号通路活性，从而提高多能干细胞源心肌细胞的纯度。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，使用p53信号通路上调剂处理含有多能干细胞源心肌细胞的细胞培养物，以上调细胞中p53信号通路活性；较佳地，所述p53信号通路上调剂包括：p53信号通路激动剂，重组表达p53信号通路蛋白的表达构建物。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述p53信号通路激动剂包括：MDM2抑制剂和/或MDMX抑制剂；较佳地，所述MDM2抑制剂和/或MDMX抑制剂包括(但不限于)：Nu...

【技术特征摘要】

1.一种多能干细胞源心肌细胞的纯化方法，包括：提供含有多能干细胞源心肌细胞的细胞培养物，上调细胞中p53信号通路活性，从而提高多能干细胞源心肌细胞的纯度。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，使用p53信号通路上调剂处理含有多能干细胞源心肌细胞的细胞培养物，以上调细胞中p53信号通路活性；较佳地，所述p53信号通路上调剂包括：p53信号通路激动剂，重组表达p53信号通路蛋白的表达构建物。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述p53信号通路激动剂包括：mdm2抑制剂和/或mdmx抑制剂；较佳地，所述mdm2抑制剂和/或mdmx抑制剂包括(但不限于)：nutlin-3a，idasanutlin，siremadlin或ro-5963；

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述多能干细胞源心肌细胞为早期分化及中后期分化的心肌细胞。

5.一种p53信号通路上调剂的应用，用于：

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，所述p53信号通路...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨黄恬，张鹏，饶森乐，
申请(专利权)人：中国科学院上海营养与健康研究所，
类型：发明
国别省市：