一种ENPP2基因或蛋白在调控结直肠癌细胞中的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种ENPP2基因或蛋白在调控结直肠癌细胞中的应用，该ENPP2基因或蛋白的表达促进结直肠癌细胞HT 29和HCT 116的增殖、生长和细胞集落的形成能力；从而可以通过抑制ENPP2基因或蛋白在结直肠癌细胞HT 29和HCT 116内的表达进而抑制结直肠癌细胞HT 29和结直肠癌细胞HCT 116的增殖、生长和细胞集落的形成能力，进而达到实现抑制结直肠癌的目的，对结直肠癌小分子靶向药物的研发具有重要意义。义。义。

Application of an enpp2 gene or protein in regulating colorectal cancer cells

【技术实现步骤摘要】
一种ENPP2基因或蛋白在调控结直肠癌细胞中的应用


[0001]本专利技术属于生物医学
，具体公开了一种ENPP2基因或蛋白在调控结直肠癌细胞中的应用。

技术介绍

[0002]结直肠癌(carcinoma of colon and rectum)，属于胃肠道中常见的恶性肿瘤，早期症状不明显，随着癌肿的增大而表现排便习惯改变、便血、腹泻、腹泻与便秘交替、局部腹痛等症状，晚期则表现贫血、体重减轻等全身症状。其发病率和病死率在癌症中较高。
[0003]自肿瘤靶向治疗概念问世以来，已成为精准医疗的核心，也使得小分子抑制剂药物的开发成为临床肿瘤学的研究热点。随着临床肿瘤学新技术的不断发展，小分子抑制剂作为肿瘤靶向治疗的有力工具也越来越受人重视，新药开发已经转向肿瘤靶向小分子抑制剂的开发。小分子靶向药物是通过化学合成、以肿瘤细胞的特异性突变作为靶点的药物，主要集中在蛋白酪氨酸激酶剂、蛋白酶和其他种类。随着我国大健康产业的快速发展，以及精准医疗需求日新月异，小分子靶向药由于医保覆盖扩大、越来越多的创新型小分子靶向药获批，发展迅速。
[0004]我国小分子靶向抗肿瘤药物近些年迎来井喷式发展，但是大部分创新药物的研发基础来源于欧美国家所采用的作用机制和作用靶点。在靶向性药物的开发中，主要包括药物靶点的确认、人工设计、临床试验和药物筛选等工序，靶点作为整个技术链的原点一直都是关键核心技术，然而目前中国在药物靶向性上的研发缺乏有效的方法和技术，国内靶向药物研发仍然是以me
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too、me
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better为主。中国人口众多，结直肠癌患病率较高，是全球小分子靶向抗癌药物重要的消费市场。而目前在国内却缺乏能够有效针对结直肠癌患者的靶向治疗药物，而其难点主要在靶点的确认以及人工设计上。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供一种ENPP2基因或蛋白在调控结直肠癌细胞中的应用，其能够解决现目前针对结直肠癌靶向药物的研究中靶点不明确的技术问题。
[0006]本专利技术提供了一种ENPP2基因或蛋白在调控结直肠癌细胞中的应用，其特征在于，ENPP2基因或蛋白的表达促进结直肠癌细胞的增殖、生长和细胞集落的形成能力。
[0007]与现有技术相比，本专利技术至少具有如下的优点与积极效果：
[0008]本专利技术提供了一种ENPP2基因或蛋白在调控结直肠癌细胞中的应用，该ENPP2基因或蛋白的表达能够促进结直肠癌细胞HT 29和结直肠癌细胞HCT 116的增殖、生长和细胞集落的形成能力，因此可以通过抑制ENPP2基因或蛋白在结直肠癌细胞HT 29和HCT 116内的表达进而抑制结直肠癌细胞HT 29和结直肠癌细胞HCT 116的增殖、生长和细胞集落的形成能力，进而达到实现抑制结直肠癌的目的，对结直肠癌小分子靶向药物的研发具有重要意义。
附图说明
[0009]为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
[0010]图1为本专利技术实施例1提供的结直肠癌关键代谢蛋白ENPP2的发现过程图，其中A为结直肠癌患者与健康受试者血清样本中代谢物比较的正交偏最小二乘法分析图(OPLS
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DA)；其中B为结直肠癌患者与健康受试者血清样本中差异代谢物筛选、比对、鉴定、确认过程的维恩图；其中C为结直肠癌患者与健康受试者血清样本中61个差异代谢物热图；其中D为差异代谢物相关通路下游相关蛋白相关分析图及ENPP2筛选过程；
[0011]图2为本专利技术实施例2提供的ENPP2对于结直肠癌细胞增殖的影响结果图，其中A为通过qRT PCR对不同结直肠癌细胞系中ENPP2的表达水平检测；B为通过ENPP2 shRNA载体转染后，HCT 116细胞以及HT 29细胞中ENPP2的mRNA蛋白表达水平；C为ENPP2敲低后HCT 116细胞增殖情况；D为ENPP2敲低后HT 29细胞增殖情况；E为ENPP2敲低后对HCT 116细胞集落形成能力的影响；F为ENPP2敲低后对HT 29细胞集落形成能力的影响；G为使用ENPP2小分子抑制剂Ziritaxestat(GLPG1690)后HCT 116细胞和HCT 29细胞增殖变化；
[0012]图3为本专利技术实施例3提供的ENPP2对于结直肠癌细胞凋亡的影响结果图，其中A为加入不同浓度的ENPP2抑制剂Ziritaxestat(GLPG1690)后，HCT 116细胞凋亡情况；B为加入不同浓度的ENPP2抑制剂Ziritaxestat(GLPG1690)后，HT 29细胞凋亡情况；C为加入不同浓度的ENPP2抑制剂Ziritaxestat(GLPG1690)后，凋亡相关蛋白Bax、Bcl2、Caspase
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3以及cleaved caspase 3蛋白表达情况；
[0013]图4为本专利技术实施例4提供的敲低ENPP2在体内抑制异种移植模型中肿瘤的生长，从而减轻肿瘤的负荷的结果图，其中A为通过ENPP2 shRNA载体转染后，HCT 116细胞ENPP2 mRNA蛋白表达水平；B为敲减ENPP2后在体内抑制结直肠癌细胞皮下异种移植瘤的生长情况；C为敲低ENPP2后异种移植模型中肿瘤的生长情况；敲低ENPP2后异种移植模型中肿瘤的负荷情况；
[0014]图5为本专利技术实施例5提供的ENPP2抑制剂在AOM/DSS(炎
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癌)模型中抑制肿瘤生长结果图，其中A为ENPP2抑制剂Ziritaxestat(GLPG1690)对AOM/DSS结直肠(炎
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癌)模型中药效评估实验流程图；B为使用ENPP2抑制剂Ziritaxestat(GLPG1690)后各组DAI评分评估曲线；C为ENPP2抑制剂Ziritaxestat(GLPG1690)抑制AOM/DSS模型小鼠肠道结直肠肿瘤的发生情况；D为ENPP2抑制剂Ziritaxestat(GLPG1690)减少AOM/DSS小鼠肠道肿瘤的数量情况；E为ENPP2抑制剂Ziritaxestat(GLPG1690)减少AOM/DSS小鼠肠道肿瘤负荷的情况；F为使用ENPP2抑制剂Ziritaxestat(GLPG1690)后结直肠(炎
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癌)模型中小鼠结肠组织H&E染色分析情况。
具体实施方式
[0015]为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产
品。
[0016]需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。下面将参考具体实施例来详细说明本专利技术。
[本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种ENPP2基因或蛋白在调控结直肠癌细胞中的应用，其特征在于，所述ENPP2基因或蛋白的表达促进结直肠癌细胞的增殖、生长和细胞集落的形成能力。2.一种用于治疗或抑制结直肠癌的药物，其特征在于，包括能抑制如权利要求1所述的ENPP2基因或蛋白表达的抑制剂。3.根据权利要求2所述的用于治疗或抑制结直肠癌的药物，其特征在于，所述抑制剂包括用于抑制所述ENPP2基因或蛋白表达的ENPP2
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shRNA干扰载体，所述ENPP2
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shRNA干扰载体的oligo序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。4.根据权利要求3所述的用于治疗或抑...

【专利技术属性】
技术研发人员：李健康，闫俊玲，茅天笑，朱益民，来茂德，
申请(专利权)人：西北工业大学，
类型：发明
国别省市：