姜竹茹或其提取物的高效液相特征图谱及其构建方法和用途技术

本发明专利技术提供了一种构建姜竹茹或其提取物的高效液相特征图谱的方法，其包括：制得姜竹茹供试品溶液，并以对香豆酸作为对照品，制得对照品溶液；对所述姜竹茹供试品溶液和所述对照品溶液进行高效液相色谱检测；其中，所述高效液相色谱检测的条件包括：在308 nm和280 nm的波长下，以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱的填充剂，以乙腈为流动相A，以甲酸水溶液为流动相B，采用梯度洗脱的方式洗脱。本发明专利技术还提供了根据上述方法构建的特征图谱及其用途。本发明专利技术通过高效液相色谱有效构建了特征图谱，为更全面、更准确地鉴定姜竹茹或其提取物、实现其中各成分的分析与含量检测提供了高效的保障，其准确度好、精密度高、专属性强且稳定性好。专属性强且稳定性好。

HPLC characteristic map of jiangzhuru or its extract and its construction method and Application

【技术实现步骤摘要】
姜竹茹或其提取物的高效液相特征图谱及其构建方法和用途


[0001]本专利技术属于中药分析和检测
具体地，本专利技术涉及姜竹茹或其提取物的高效液相特征图谱及其构建方法和用途。

技术介绍

[0002]竹茹为禾本科植物青秆竹Bambusa tuldoides Munro、大头典竹Sinocalamus beecheyanus(Munro)Mc Clure var.Pubescens P.F.Li或淡竹Phyllostachys nigra(Lodd.)Munro var.henonis(Mitf.)Stapf ex Rendle的茎秆的干燥中间层。性微寒，味甘，归肺、胃经，具清热化痰、除烦止呕之功能，用于痰热咳嗽、胆火挟痰、烦热呕吐等疾病的治疗。《药品化义》曰：“竹茹轻可去实，凉能去热，苦能降下，专清痰，为宁神开郁佳品。”是临床不可缺少的常用中药。
[0003]文献报道竹茹具有抗氧化、抗硝化、抗衰老、抗菌、抗病毒及保护心脑血管、防治老年退行性疾病等生物学功效。主要含有生物碱、鞣质、皂苷、氨基酸、有机酸、还原糖和三萜等多种有机成分。
[0004]姜竹茹是竹茹经姜炙法制得的炮制加工品，其研究文献资料较少，现有的质量标准《中国药典》2020年版仅记载其来源、性状和检查的项目，未记载其含量测定项。因此，目前在竹茹功能活性成分或指标性化学组分与药材的功能主治尚不能一一对应的情况下，在建立特征图谱及含量测定方法时，尚没有合适的对照品或内标物作为参照物，也没有全面、准确地反映姜竹茹中相关物质含量的检测方法。/>[0005]因此，有必要开发姜竹茹高效液相特征图谱及其构建方法、以及基于该特征图谱的姜竹茹中相关物质含量的全面、准确的检测方法。

技术实现思路

[0006]本专利技术的第一目的在于提供一种姜竹茹高效液相特征图谱、其构建方法。该方法以对香豆酸为特征成分，通过高效液相色谱有效地构建了特征图谱，为更全面、更准确地实现姜竹茹中各成分的分析与含量检测提供了高效的保障。
[0007]本专利技术的上述第一目的是通过以下技术方案实现的：
[0008]一方面，本专利技术提供了一种构建姜竹茹高效液相特征图谱的方法，其包括：
[0009](a)制得姜竹茹供试品溶液，并以对香豆酸作为对照品，制得对照品溶液；
[0010](b)对所述姜竹茹供试品溶液和所述对照品溶液进行高效液相色谱检测；
[0011]其中，所述高效液相色谱检测的条件包括：
[0012]在280nm的波长下，以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱的填充剂，以乙腈为流动相A，以甲酸水溶液为流动相B，采用梯度洗脱的方式洗脱。
[0013]优选地，在步骤(a)中，制得姜竹茹供试品溶液的方法包括：使姜竹茹供试品溶解于甲醇水溶液中并定量，经超声提取、过滤后制得。
[0014]优选地，所述姜竹茹供试品溶液的浓度为5mg/mL～20mg/mL。在本专利技术中，所述姜
竹茹供试品溶液的浓度可以选择例如5mg/mL、6mg/mL、7mg/mL、8mg/mL、9mg/mL、10mg/mL、12mg/mL、15mg/mL、18mg/mL、19mg/mL、20mg/mL、以及以上点值中任意两个组成的范围内的任意点值。
[0015]所述姜竹茹供试品可以为姜竹茹或姜竹茹配方颗粒。
[0016]优选地，所述对香豆酸对照品溶液的浓度为10μg/mL～1mg/mL。
[0017]优选地，所述超声提取在390W～520W的功率和30kHz～50kHz的频率下进行20min～40min。在本专利技术中，所述超声提取例如可以在390W、400W、410W、420W、430W、440W、450W、470W、490W、500W、510W、或520W的功率下，并在30kHz、35kHz、40kHz、45kHz、或50kHz的频率下进行20min、25min、30min、35min、或40min。
[0018]优选地，所述甲醇水溶液的体积浓度为0％～100％。在本专利技术中，所述甲醇水溶液的体积浓度可以选择例如0％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％以及以上点值中任意两个组成的范围内的任意点值。在本专利技术中，当所述甲醇水溶液的体积浓度选择“0％”时，表示在这种情况下将姜竹茹供试品溶解于水中，以制得姜竹茹供试品溶液。
[0019]优选地，作为流动相B，所述甲酸水溶液的体积浓度为0.08％～0.15％，更优选为0.1％。
[0020]优选地，以所述流动相A和所述流动相B的体积分数计，所述梯度洗脱的程序包括：
[0021]0min～4min，以10％～12％流动相A
‑
90％～88％流动相B洗脱；
[0022]4min～10min，以12％流动相A
‑
88％流动相B洗脱；
[0023]10min～11min，以12％～12.5％流动相A
‑
88％～87.5％流动相B洗脱；
[0024]11min～15min，以12.5％流动相A
‑
87.5％流动相B洗脱；
[0025]15min～18min，以12.5％～14％流动相A
‑
87.5％～86％流动相B洗脱。
[0026]其中，在0min～4min的洗脱时段内，所述流动相A的体积分数可以选择10％、11％、12％、以及以上点值中任意两个组成的范围内的任意点值；所述流动相B的体积分数则可以根据流动相A的体积分数对应地选择。
[0027]在15min～18min的洗脱时段内，所述流动相A的体积分数可以选择12.5％、13％、13.5％、14％、以及以上点值中任意两个组成的范围内的任意点值；所述流动相B的体积分数则可以根据流动相A的体积分数对应地选择。
[0028]优选地，所述流动相的流速为0.1mL/min～0.5mL/min，更优选为0.3mL/min。
[0029]优选地，所述色谱柱的柱温为35℃～45℃，更优选地为40℃。
[0030]优选地，所述姜竹茹供试品溶液和所述对照品溶液的进样量为1.8μL～2.2μL，更优选地为2μL。
[0031]在本专利技术的构建姜竹茹或其提取物的高效液相特征图谱的方法中，高效液相色谱的系统适用性实验应当使得满足：按对香豆酸峰计算，理论板数不低于3000。
[0032]另一方面，本专利技术提供了根据上述构建姜竹茹或其提取物的高效液相特征图谱的方法获得的姜竹茹或其提取物的高效液相特征图谱。
[0033]优选地，所述高效液相特征图谱包含2个特征峰，其中相对于特征峰2(S)的保留时间10.75
±
10％min，特征峰1的保留时间在3.00
±
10％min范围内。
[0034]本专利技术的第二目的在于提供一种鉴定姜竹茹或其提取物的方法，其包括：获得待
鉴定的供试品的高效液相色谱谱图，并且将所述供试品的高效液本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种构建姜竹茹或其提取物的高效液相特征图谱的方法，其包括：（a）制得姜竹茹供试品溶液，并以对香豆酸作为对照品，制得对照品溶液；（b）对所述姜竹茹供试品溶液和所述对照品溶液进行高效液相色谱检测；其中，所述高效液相色谱检测的条件包括：在280 nm和308 nm的波长下，以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱的填充剂，以乙腈为流动相A，以甲酸水溶液为流动相B，采用梯度洗脱的方式洗脱。2.根据权利要求1所述的方法，其中，步骤（a）中，制得所述姜竹茹供试品溶液的方法包括：使姜竹茹供试品溶解于甲醇水溶液中并定量，经超声提取、过滤后获得；优选地，所述姜竹茹供试品溶液的浓度为5 mg/mL~20 mg/mL；更优选地为20 mg/mL；优选地，所述对香豆酸对照品溶液的浓度为10 μg/mL~1 mg/mL；更优选地为10 μg/mL。3.优选地，所述超声提取在390 W~520 W的功率和30 kHz~50 kHz的频率下进行20 min~40 min；更优选地为30 min。4.优选地，所述甲醇水溶液的体积浓度为0%~100%；更优选地为70%。5.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述甲酸水溶液的体积浓度为0.08%~0.15%，优选地为0.1%。6.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中，以所述流动相A和所述流动相B的体积分数计，所述梯度洗脱的程序包括：0 min~4 min，以10%~12%流动相A
‑
90%~88%流动相B洗脱；4 min~10 min，以12%流动相A
‑
88%流动相B洗脱；10 min~11 min，以12%~12.5%流动相A
‑
88%~87.5%流动相B洗脱；11 min~15 min，以1...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁利鹏，张碧茜，郑鑫杰，刘岱琳，张静泽，王苹，张志强，史国华，沈建梅，
申请(专利权)人：北京康仁堂药业有限公司，
类型：发明
国别省市：