一种北极甜虾虾壳多肽钼螯合物及其制备方法技术

本发明专利技术涉及一种北极甜虾虾壳多肽钼螯合物的制备方法，所述制备方法按下述步骤依次进行：(1)将虾壳类原料烘干、粉碎，制得虾壳粉；(2)配制复合酶液；(3)将复合酶液、虾壳粉以及去离子水混合，酶解，制得水解多肽液；(4)将三氧化钼用氢氧化钠溶液溶解制得钼酸钠溶液；(5)将钼酸钠溶液与水解多肽液混合，螯合反应，结束后用乙醇沉淀，过滤，洗涤，干燥即得；且所述复合酶液包括木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶和酶激活剂。及采用上述方法制备的北极甜虾虾壳多肽钼螯合物。本发明专利技术通过采用三种不同酶的复配配合酶激活剂的添加，显著提高了虾壳中多肽的提取率，及螯合率，实现了北极甜虾虾壳多肽钼螯合物的高效制备。壳多肽钼螯合物的高效制备。

【技术实现步骤摘要】
一种北极甜虾虾壳多肽钼螯合物及其制备方法


[0001]本专利技术涉及材料领域，特别涉及一种北极甜虾虾壳多肽钼螯合物及其制备方法。

技术介绍
：
[0002]目前，从虾壳中提取多肽的方法有碱液提取法、碱溶酸沉提取法、盐溶液提取法、超声波辅助酶提取法、微生物发酵法等。
[0003]碱液提取法是利用氢氧化钠溶液进行提取，或加以超声波辅助。方法操作简单，成本低廉，但对环境污染较大，提取时蛋白质水解程度难以控制，提取的蛋白质结构也会受到不同程度破坏。
[0004]碱溶酸沉提取法是蛋白质在碱性溶液中溶解，再用酸液调节pH至蛋白质等电点，使蛋白质沉淀析出。此为目前实验室内最常用的蛋白质提取方法，需要再进行水解才能成为多肽，工艺方法成熟，但会产生大量的酸碱溶液，具有一定危险性，对环境造成一定影响。
[0005]盐溶液提取法也叫盐析法，通过加入饱和盐溶液中和蛋白质分子表面电荷达到沉淀。此法简单，无危害试剂，但提纯率低，需要对提取的蛋白质进行脱盐纯化，并且需要对蛋白质进行水解才能得到多肽。
[0006]超声波辅助酶提取法：利用超声波的空话效应、热效应、化学效应、生物效应等对细胞壁和细胞膜进行物理破碎，增大物质分子的运动频率和速度，最终提高蛋白质提取率，加以酶解可以得到多肽。此方法也会增加一定的成本消耗。
[0007]微生物发酵法：利用微生物自身的代谢作用，改变蛋白质本身的品质，产生易消化的短肽、氨基酸等物质，使废弃物变成高附加值的发酵产品。该方法回收率最高，但是微生物发酵条件严苛，不易控制。
>[0008]因鉴于此，特提出此专利技术。

技术实现思路

[0009]本专利技术的目的旨在提供一种虾壳多肽提取率高、钼螯合率高的北极甜虾虾壳多肽钼螯合物的制备方法及由该制备方法制得的北极甜虾虾壳多肽钼螯合物。
[0010]为了实现上述目的，本专利技术提供了一种北极甜虾虾壳多肽钼螯合物的制备方法，所述制备方法按下述步骤依次进行：
[0011](1)将虾壳类原料烘干、粉碎，制得虾壳粉；
[0012](2)配制复合酶液；
[0013](3)将复合酶液、虾壳粉以及去离子水混合，酶解，制得水解多肽液；
[0014](4)将三氧化钼用氢氧化钠溶液溶解、反应，制得钼酸钠溶液；
[0015](5)将钼酸钠溶液与水解多肽液混合，螯合反应，结束后用乙醇沉淀，过滤，洗涤，干燥即得；
[0016]且所述复合酶液包括木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶和酶激活剂。
[0017]本专利技术通过3种三种酶的复配辅以酶激活剂，显著提高了虾壳多肽的提取率。
[0018]优选地或可选地所述酶激活剂为氯化钠；优选的，所述氯化钠以氯化钠溶液，优选0.1mol/L的氯化钠溶液的形式添加；优选的，所述氯化钠溶液的添加量为木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶总质量的0.1
‑
0.2％。
[0019]优选地或可选地，所述复合酶液中木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和中性蛋白酶的质量比为71.2
‑
80:20
‑
25:10.5
‑
12；
[0020]优选的，木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和中性蛋白酶的质量比为71.2:22.4:10.5。
[0021]优选地或可选地，步骤(1)中烘干的温度为60
‑
80℃。
[0022]优选地或可选地，步骤(2)中复合酶液中三种酶的总质量与虾壳粉的质量比为0.75
‑
1:10000；酶解温度为40
‑
50℃；酶解环境pH为5.5
‑
6；酶解时间为40
‑
120min；优选的，步骤(2)中复合酶液中三种酶的总质量与虾壳粉的质量比为1:10000，酶解温度为40℃，酶解环境pH为5.5，酶解时间为120min。
[0023]优选地或可选地，步骤(5)中以三氧化钼计的钼酸钠和水解多肽液中虾壳多肽的质量比为75
‑
83:17
‑
25，优选的，所述质量比为83:17。
[0024]优选地或可选地，步骤(5)中螯合反应的反应温度为45
‑
55℃；螯合反应的反应时间为90
‑
120min；螯合反应的环境pH为6
‑
7；优选的，螯合温度为45℃，螯合反应时间为120min；螯合反应的环境pH为6。
[0025]优选地或可选地，步骤(5)中所述螯合液进行沉淀时所用的乙醇的浓度不小于90％；优选的，沉淀时间为3h。
[0026]一种北极甜虾虾壳多肽钼螯合物，其特征在于，采用上述的北极甜虾虾壳多肽钼螯合物的制备方法制备而成。
[0027]本专利技术采用三种酶配合酶激活剂水解虾壳粉，实现了虾壳中多肽的高效提取，并配合经预处理的三氧化钼，实现了多肽和钼的高效螯合，极大的提高了北极甜虾虾壳多肽钼螯合物的生产效率，降低了生产成本。
具体实施方式
[0028]以下对本专利技术的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本专利技术，并不用于限制本专利技术。
[0029]下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
[0030]下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
[0031]实施例1
[0032]本专利技术实施例提供了一种北极甜虾虾壳多肽钼螯合物的制备方法。
[0033]所述北极甜虾虾壳为水产公司和餐饮店产生的虾头、虾壳类固体废物。
[0034]将收集到的虾壳类原料冷冻保存备用，在使用时置于60
‑
80℃的烘箱内烘干，烘干后经粉碎机粉碎，制得虾壳粉，备用。
[0035]将800u/mg的木瓜蛋白酶、250u/mg的胰蛋白酶和50u/mg的胰蛋白酶以质量比71.2:22.4:10.5复配得到复合酶。
[0036]按照质量比10000:1称取虾壳粉和复合酶，加入去离子水中，去离子水按照每克虾壳粉对应10mL去离子水量取，并进一步按照复合酶总质量的0.1％添加0.1mol/L的氯化钠作为酶激活剂。
[0037]调节pH至5.5，并在40℃下水浴酶解120min，得到水解多肽液。
[0038]称取三氧化钼，三氧化钼与水解多肽液中虾壳多肽的质量比为83:17，将称取的三氧化钼用氢氧化钠溶液溶解，制得钼酸钠溶液。
[0039]应当注意的是，本专利技术实施例对所用的氢氧化钠溶液的浓度和体积不做具体限定，使投入的三氧化钼全部溶解即可。
[0040]将钼酸钠溶液与水解多肽液混合，调节pH至6，并在45℃下水浴螯合反应120min。螯合完成后，加入反应体系体积2
‑
3倍的浓度大于90％的乙醇进行醇沉，醇沉时间为3h。醇沉完成后，常温固液分离取固体部分，洗涤，干燥即得虾壳蛋白钼螯合物产品。
[0041]实施例2
[0042]本专利技术实施例提本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种北极甜虾虾壳多肽钼螯合物的制备方法，其特征在于，所述制备方法按下述步骤依次进行：(1)将虾壳类原料烘干、粉碎，制得虾壳粉；(2)配制复合酶液；(3)将复合酶液、虾壳粉以及去离子水混合，酶解，制得水解多肽液；(4)将三氧化钼用氢氧化钠溶液溶解、反应，制得钼酸钠溶液；(5)将钼酸钠溶液与水解多肽液混合，进行螯合反应，结束后用乙醇沉淀，过滤，洗涤，干燥即得；其中，所述复合酶液包括木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶和酶激活剂。2.根据权利要求1所述的北极甜虾虾壳多肽钼螯合物的制备方法，其特征在于，所述酶激活剂为氯化钠；优选的，所述氯化钠以氯化钠溶液、优选0.1mol/L的氯化钠溶液的形式添加；优选的，所述氯化钠溶液的添加量为木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶总质量的0.1
‑
0.2％。3.根据权利要求2所述的北极甜虾虾壳多肽钼螯合物的制备方法，其特征在于，所述复合酶液中木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和中性蛋白酶的质量比为71.2
‑
80:20
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25:10.5
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12；优选的，木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和中性蛋白酶的质量比为71.2:22.4:10.5。4.根据权利要求1所述的北极甜虾虾壳多肽钼螯合物的制备方法，其特征在于，步骤(1)中烘干的温度为60
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80℃。5.根据权利要求1所述的北极甜虾虾壳多肽钼螯合物的制备方法，其特征在于，步骤(2)中复合酶液中三种酶的总...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘雪凌，陈旭华，刘湘，
申请(专利权)人：燕京理工学院，
类型：发明
国别省市：