【技术实现步骤摘要】
一种豌豆蛋白源DPP
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IV抑制肽及其筛选方法
[0001]本专利技术涉及一种豌豆蛋白源DPP
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IV抑制肽及其筛选方法,属于食源性活性肽开发
技术介绍
[0002]根据国际糖尿病联盟(IDF)的数据,2021年全球成年糖尿病患病率约为5.37亿,预计到2045年将达到7.84亿。其中,2型糖尿病(T2D)约占已确诊糖尿病的90%。T2D以高血糖为特征,可导致心血管疾病(中风、心肌梗死、高血压、心力衰竭等)、神经退行性疾病、肾病等一系列并发症。针对以上问题,许多抗糖尿病药物已被开发并用于T2D的治疗,其中DPP
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IV抑制剂是最有前景的降糖药物之一。DPP
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IV抑制剂通过抑制胰高血糖素样肽
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1(GLP
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1)和葡萄糖依赖性胰岛素多肽(GIP)等激素的失活而产生降糖作用。GLP
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1和GIP可有效刺激胰岛素的分泌,然而其易被DPP
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IV降解而迅速失活,从而失去其调节血糖 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种从豌豆蛋白中筛选DPP
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IV抑制肽的方法,其特征在于,主要包括以下步骤:(1)利用蛋白酶水解豌豆蛋白产生豌豆肽;(2)将步骤(1)所得豌豆肽用色谱进行分离,选择具有相对高的抑制DPP
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IV能力的部分进行下一步的测序;(3)通过多肽组学对步骤(2)分离得到的部分豌豆肽进行测序;(4)利用分子对接技术从步骤(3)测序得到的豌豆肽中筛选高活性的DPP
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IV抑制肽。2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,主要包括以下步骤:(1)利用蛋白酶水解豌豆蛋白产生豌豆肽将豌豆蛋白粉与水混合,加热使豌豆蛋白受热变性,然后添加蛋白酶对豌豆蛋白进行水解,水解结束后,将豌豆蛋白水解液加热灭酶,然后冷却、离心,取上清冻干;(2)将步骤(1)所得冻干物经Sephadex G
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15进行分离,选择具有相对高的抑制DPP
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IV能力的部分进行下一步的测序;(3)通过多肽组学对步骤(2)分离得到的部分豌豆肽进行测序;(4)利用分子对接技术从步骤(3)测序得到的豌豆肽中筛选高活性的DPP
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IV抑制肽。3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述豌豆蛋白粉是指去除豌豆中的淀粉与脂肪后的干燥的蛋白粉末。4.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述蛋白酶是复合蛋白酶,能够切割豌豆蛋白的多个位点。5.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,步骤(1)采用如下实施条件:将豌豆蛋白粉与蒸馏水按1:20的比例混合,预热以确保豌豆蛋白完全受热变性;待豌豆蛋白溶液冷却至室温后,添加复合蛋白酶于pH 7.0、55℃条件下水解;在水解过程中,维持溶液的pH值恒定;水解后,将豌豆蛋白水解液煮沸灭酶;待冷却至4...
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