一种鲍鱼内脏蛋白肽的制备方法技术

本发明专利技术属于蛋白肽制备领域，涉及一种鲍鱼内脏蛋白肽的制备方法，包括：将鲍鱼内脏用饱和盐水进行预处理，将预处理鲍鱼内脏加入水后粉碎，加入由胰酶、胰凝乳蛋白酶、木瓜蛋白酶、羧肽酶与烷基硫醇按照质量比1:(0.1～0.2):(2～5):(0.5～1.5):(0.01～0.1)组成的复合酶Ⅰ进行第一次酶解，加入由木瓜蛋白酶、羧肽酶以及钠盐按照质量比1:(0.05～0.2):(0.01～0.1)组成的复合酶Ⅱ进行第二次酶解，往所得酶解液中加入絮凝剂进行含有海藻酸盐、明胶、卡拉胶和改性氢氧化铝的絮凝剂进行絮凝沉淀，固液分离即可。本发明专利技术提供的方法能够提高鲍鱼内脏蛋白肽的收率和纯度，极具工业应用前景。极具工业应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种鲍鱼内脏蛋白肽的制备方法


[0001]本专利技术属于蛋白肽制备领域，具体涉及一种鲍鱼内脏蛋白肽的制备方法。

技术介绍

[0002]蛋白质是复杂的生物大分子，可以为有机体的新陈代谢提供必须的氨基酸成分，保证有机体的成长并维持生命活性的能量。在蛋白质分子中，氨基酸按照一定的排列顺序通过相互连接氨基酸序列，经“分子伴侣”和折叠酶的协助使得蛋白折叠、盘曲构成稳定的空间多维结构。蛋白质除了拥有乳化功能、组织化作用、凝胶作用等自身的功能性质以外，还可以被人体摄入后进入胃肠道消化吸收。在20世纪80年代以前，人们一直认为蛋白质在胃肠道中是以游离氨基酸的形式被吸收。然而，随着生物代谢研究的深入，国内外研究发现蛋白质在胃肠道中大部分以蛋白肽的形式吸收，且吸收速度、生物效价以及营养效价比游离氨基酸更快、更高。
[0003]随着人们饮食结构的变化，市场上开始涌现大量鲍鱼加工制品，包括煮干鲍、冷冻鲍和罐头鲍等。在鲍鱼加工过程中，会产生大量的鲍鱼内脏，约占鲍鱼重量的25％。目前研究者主要从鲍鱼内脏中提取蛋白、多糖、脂肪酸等活性成分。鲍鱼内脏富含蛋白，但目前主要作为调味品的原料，宝贵的蛋白资源没有得到有效利用。此外，虽然目前的研究也有将鲍鱼内脏加工成蛋白肽的报道，但是现有的加工方式一般所得鲍鱼蛋白肽的收率和纯度均低。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是为了克服采用现有的方法制备鲍鱼蛋白肽时所得鲍鱼蛋白肽的收率和纯度较低的缺陷，而提供一种鲍鱼内脏蛋白肽的制备方法，该方法能够获得高收率和纯度的蛋白肽。
[0005]具体地，本专利技术提供的鲍鱼内脏蛋白肽的制备方法包括以下步骤：
[0006]S1、将鲍鱼内脏清洗干净后置于饱和盐水中回流处理1～2h，得到预处理鲍鱼内脏；
[0007]S2、将预处理鲍鱼内脏加入水后粉碎，加入复合酶Ⅰ，所述复合酶Ⅰ由胰酶、胰凝乳蛋白酶、木瓜蛋白酶、羧肽酶与烷基硫醇按照质量比1:(0.1～0.2):(2～5):(0.5～1.5):(0.01～0.1)组成，在温度为30～60℃、pH值为7.0～9.0的条件下酶解2～10h，之后将所得酶解产物的pH值调整至4～6.5，加入复合酶Ⅱ，所述复合酶Ⅱ由木瓜蛋白酶、羧肽酶以及钠盐按照质量比1:(0.05～0.2):(0.01～0.1)组成，在温度为30～60℃的条件下继续酶解10～20h，灭酶后过滤，得到酶解液；
[0008]S3、在搅拌条件下，往步骤S2所得酶解液中加入絮凝剂进行絮凝沉淀，所述絮凝剂中含有海藻酸盐、明胶、卡拉胶和改性氢氧化铝，所述改性氢氧化铝为经硅烷偶联剂改性后的氢氧化铝，固液分离，所得固体产物经干燥后即为鲍鱼内脏蛋白肽。
[0009]步骤S1中，所述鲍鱼内脏与饱和盐水的质量比优选为1:(2～10)，如1:2、1:3、1:4、
1:5、1:6、1:7、1:8、1:9、1:10等。需要说明的是，本专利技术中，术语“饱和盐水”是指在室温下为饱和状态。
[0010]步骤S2中，所述预处理鲍鱼内脏与水的质量比优选为1:(0.5～2)，如1:0.5、1:0.8、1:1、1:1.2、1:1.5、1:1.8、1:2等。
[0011]步骤S2中，所述酶解分两步进行。第一步：所采用的酶为复合酶Ⅰ，所述复合酶Ⅰ由胰酶、胰凝乳蛋白酶、木瓜蛋白酶、羧肽酶与烷基硫醇按照质量比1:(0.1～0.2):(2～5):(0.5～1.5):(0.01～0.1)组成。以胰酶的质量为1重量份计，所述胰凝乳蛋白酶的含量为0.1～0.2重量份，如0.1、0.11、0.12、0.13、0.14、0.15、0.16、0.17、0.18、0.19、0.2重量份；所述木瓜蛋白酶的含量为2～5重量份，如2、2.2、2.5、2.8、3、3.2、3.5、3.8、4、4.2、4.5、4.8、5重量份；所述羧肽酶的含量为0.5～1.5重量份，如0.5、0.8、1、1.2、1.5重量份；所述烷基硫醇的含量为0.01～0.1重量份，如0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1重量份。第一步酶解的条件包括温度为30～60℃，如30℃、35℃、40℃、45℃、50℃、55℃、60℃；pH值为7.0～9.0，如7.0、7.5、8、8.5、9.0；时间为2～10h，如2、3、4、5、6、7、8、9、10h。第二步：所采用的酶为复合酶Ⅱ，所述复合酶Ⅱ由木瓜蛋白酶、羧肽酶以及钠盐按照质量比1:(0.05～0.2):(0.01～0.1)组成。以木瓜蛋白酶的质量为1重量份计，所述羧肽酶的含量为0.05～0.2重量份，如0.05、0.08、0.1、0.12、0.15、0.18、0.2重量份；所述钠盐的含量为0.01～0.1重量份，如0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1重量份。第一步酶解的条件包括温度为30～60℃，如30℃、35℃、40℃、45℃、50℃、55℃、60℃；pH值为4～6.5，如4、4.5、5、5.5、6、6.5；时间为10～20h，如10、12、15、18、20h。所述复合酶Ⅰ中的烷基硫醇以及复合酶Ⅱ中的钠盐均起到酶促进剂的作用，这两种物质的使用能够显著提高蛋白肽的收率。其中，所述烷基硫醇中烷基的碳原子数优选为1～20，其具体实例包括但不限于：甲硫醇、乙硫醇、丙硫醇、丁硫醇、2
‑
戊基硫醇、2
‑
乙基己基硫醇、1
‑
己硫醇、1
‑
庚硫醇、正辛基硫醇、正十二硫醇、叔十二烷基硫醇、正十六硫醇和正十八硫醇中的至少一种。所述钠盐优选为氯化钠和/或硫酸钠。此外，所述复合酶Ⅰ和复合酶Ⅱ的用量优选各自独立地为鲍鱼内脏质量的1
‰
～1％。
[0012]步骤S2中，所述灭酶的方式可以按照现有的各种方式进行，例如，可以将酶解产物加热至90～110℃保持5～30min。
[0013]步骤S3中，所述絮凝剂中含有海藻酸盐、明胶、卡拉胶和改性氢氧化铝，其中，所述海藻酸盐、明胶、卡拉胶和改性氢氧化铝的质量比优选为1:(0.01～0.5):(1～3):(5～10)。具体地，以海藻酸盐的质量为1重量份计，所述明胶的含量为0.01～0.5重量份，如0.01、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5重量份；所述卡拉胶的含量为1～3重量份，如1、1.2、1.5、1.8、2、2.2、2.5、2.8、3重量份；所述改性氢氧化铝的含量为5～10重量份，如5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5、10重量份。在一种优选实施方式中，所述改性氢氧化铝按照以下方式制备得到：将100重量份的氢氧化铝置于浓度为10～20％的γ
‑
缩水甘油醚氧丙基三甲氧基硅烷的二甲苯溶液中，于温度为80～90℃下搅拌处理10～20min，过滤，所得固体于温度为100～150℃下焙烧处理0.5～2h。其中，所述氢氧化铝的粒径优选为5～10微米。所述絮凝沉淀的条件包括温度可以为室温，时间可以为1～5本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种鲍鱼内脏蛋白肽的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：S1、将鲍鱼内脏清洗干净后置于饱和盐水中回流处理1～2h，得到预处理鲍鱼内脏；S2、将预处理鲍鱼内脏加入水后粉碎，加入复合酶Ⅰ，所述复合酶Ⅰ由胰酶、胰凝乳蛋白酶、木瓜蛋白酶、羧肽酶与烷基硫醇按照质量比1:(0.1～0.2):(2～5):(0.5～1.5):(0.01～0.1)组成，在温度为30～60℃、pH值为7.0～9.0的条件下酶解2～10h，之后将所得酶解产物的pH值调整至4～6.5，加入复合酶Ⅱ，所述复合酶Ⅱ由木瓜蛋白酶、羧肽酶以及钠盐按照质量比1:(0.05～0.2):(0.01～0.1)组成，在温度为30～60℃的条件下继续酶解10～20h，灭酶后过滤，得到酶解液；S3、在搅拌条件下，往步骤S2所得酶解液中加入絮凝剂进行絮凝沉淀，所述絮凝剂中含有海藻酸盐、明胶、卡拉胶和改性氢氧化铝，所述改性氢氧化铝为经硅烷偶联剂改性后的氢氧化铝，固液分离，所得固体产物经干燥后即为鲍鱼内脏蛋白肽。2.根据权利要求1所述的鲍鱼内脏蛋白肽的制备方法，其特征在于，步骤S1中，所述鲍鱼内脏与饱和盐水的质量比为1:(2～10)。3.根据权利要求1所述的鲍鱼内脏蛋白肽的制备方法，其特征在于，步骤S2中，所述预处理鲍鱼内脏与水的质量比为1:(0.5～2)。4.根据权利要求1所述的鲍鱼内脏蛋白肽的制备方法，其特征在于，步骤S2中，所述复合酶Ⅰ和复合酶Ⅱ的用量各自独立地为鲍鱼内脏质量的1
‰
～1％。5.根据权利要求1所述的鲍...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩耀辉，
申请(专利权)人：韩耀辉，
类型：发明
国别省市：