本发明专利技术提供一种鼠抗MPT32蛋白杂交瘤细胞株13B12、基于其的单克隆抗体及其应用。该鼠抗MPT32蛋白杂交瘤细胞株13B12，于2022年1月9日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:C2021305。该细胞株分泌的鼠抗MPT32蛋白单克隆抗体与MPT32蛋白反应效价高，使得鼠抗MPT32蛋白单克隆抗体适合作为免疫诊断试剂以用于MPT32蛋白抗原的体外诊断。利用该鼠抗MPT32蛋白单克隆抗体制备得到用于检测MPT32蛋白的试剂盒或微流体芯片，能够有效识别临床样本中的MPT32蛋白，并且具有较高的特异性，检测灵敏度高。本发明专利技术提供的鼠抗MPT32蛋白单克隆抗体为结核病的体外诊断试剂提供了关键的原材料，以该单克隆抗体为原料开发的检测试剂盒或微流体芯片具备良好的临床应用价值。值。值。
【技术实现步骤摘要】
一种鼠抗MPT32蛋白杂交瘤细胞株13B12、基于其的单克隆抗体及其应用
[0001]本专利技术涉及抗体制备
，具体涉及一种鼠抗MPT32蛋白杂交瘤细胞 株13B12、基于其的单克隆抗体及其应用。
技术介绍
[0002]结核病是由结核杆菌感染引起的慢性传染病，仍是当今全球范围内对人类最 具威胁性的感染性疾病之一。结核病的病原体是结核分枝杆菌，简称结合杆菌。 1882年，德国细菌学家郭霍首先发现并证明了结核分枝杆菌是结核病的病原菌。 该病原菌可侵入人体全身各种组织器官，但主要侵犯肺脏，因此结核病也称被为 肺结核病。结核病严重影响人类的健康和生命，人类与之已经进行了几个世纪的 斗争。在17～18世纪的欧洲，结核病被称为“白色瘟疫”，几乎100％的欧洲人 被感染，25％的欧洲人死于结核病。随着抗结核药物的不断发展和卫生生活状况 的改善，结核病的发病率和死亡率曾出现大幅度下降。20世纪90年代以来，由 于艾滋病和结核分枝杆菌耐药菌株的出现、免疫抑制剂的应用、吸毒、贫困及人 口流动等因素，全球范围内结核病的疫情骤然恶化。目前，结核病成为首要的再 现传染病，也成为了全球尤其是发展中国家最为严重的全球性卫生问题。全世界 约有1/3的人感染结核分枝杆菌，每年有900万的新病例出现，有200万人死于 该疾病。
[0003]早期发现和早期诊断结核病病人，及时给予有效的治疗，是降低结核病发病 率，减少传播机会、控制结核病疫情的关键环节。目前结核病的主要实验诊断手 段包括结核菌素试验、结核菌γ干扰素释放试验、直接涂片镜检、分离培养、动 物试验等。然而，这些检测方法均存在耗时长、检测灵敏性低、特异性不高、成 本高和操作复杂等问题。
[0004]感染结核杆菌后，在感染阶段如结核杆菌的生长阶段会释放或分泌MPT32 蛋白，并且MPT32蛋白的免疫原性强。由此可见，MPT32蛋白可作为结核杆菌 诊断的特异性诊断靶点，因此亟需一种以MPT32蛋白为靶点的抗体为体外诊断 试剂提供关键原材料。
技术实现思路
[0005]本专利技术的目的在于提供一种鼠抗MPT32蛋白杂交瘤细胞株13B12、基于其 的单克隆抗体及其应用，该鼠抗MPT32蛋白杂交瘤细胞株13B12分泌的鼠抗 MPT32蛋白单克隆抗体能够与MPT32蛋白特异性结合，能够特异性检测MPT32 蛋白，为结核病的体外诊断试剂提供了关键的原材料。
[0006]根据本专利技术的第一个方面，提供一种鼠抗MPT32蛋白杂交瘤细胞株13B12， 该杂交瘤细胞株于2022年1月9日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏地址 为湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学，保藏编号为CCTCCNO:C2021305。
[0007]根据本专利技术的第二个方面，提供一种鼠抗MPT32蛋白单克隆抗体，该单克 隆抗体由上述鼠抗MPT32蛋白杂交瘤细胞株13B12分泌产生。
[0008]优选地，上述鼠抗MPT32蛋白单克隆抗体包括轻链可变区和重链可变区， 轻链可
变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，重链可变区的氨基酸序列如SEQID NO:2所示。
[0009]SEQ ID NO:1
[0010]DIVMTQTPLTLSVTIGQPASISCKSSQSLLDSDGKTYLNWLLQRPGQSPKRLIYLVSKLGSGVPDRFTG SGSGTDFTLKINRVEAEDLGVYYCWQGTHLPRTFGGGTKLEIK
[0011]SEQ ID NO:2
[0012]QVQLQQSGAELVKPGASVKMSCKASGFTFTSYWINWVKQRPGQGLEWIGDLYPGRGITNYNEKFKPKAT LTLDTSSSTAYMQLSSLTSEDSAVYYCSTGPYWGQGTILTVSS
[0013]根据本专利技术的第三个方面，提供一种核酸分子，该核酸分子包含编码上述鼠 抗MPT32蛋白单克隆抗体的核苷酸序列。
[0014]优选地，上述核酸分子编码鼠抗MPT32蛋白单克隆抗体的轻链可变区的核 苷酸序列如SEQ ID NO:3所示，编码鼠抗MPT32蛋白单克隆抗体的重链可变区 的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示。
[0015]SEQ ID NO:3
[0016]GATATTGTGATGACCCAGACTCCACTCACTTTGTCGGTTACCATTGGACAACCAGCCTCCATCTCTTGC AAGTCAAGTCAGAGCCTCTTAGATAGTGATGGAAAGACATATTTGAATTGGTTGTTACAGAGGCCAGGC CAGTCCCCAAAGCGCCTAATATATCTGGTGTCTAAACTGGGCTCTGGAGTCCCTGACAGGTTCACTGGC AGTGGATCAGGGACAGATTTCACACTGAAAATCAACAGAGTGGAGGCTGAGGATTTGGGAGTTTATTAT TGCTGGCAAGGTACACATCTTCCTCGGACGTTCGGTGGAGGCACCAAGCTGGAAATAAAA
[0017]SEQ ID NO:4
[0018]CAGGTTCAGCTTCAGCAGTCTGGGGCTGAGCTTGTGAAGCCTGGGGCTTCAGTGAAAATGTCCTGCAAG GCTTCTGGCTTCACCTTCACCAGCTACTGGATAAACTGGGTGAAGCAGAGGCCTGGACAAGGCCTTGAG TGGATTGGAGATCTTTATCCTGGTAGAGGTATTACTAACTACAATGAGAAGTTCAAGCCCAAGGCCACA CTGACTCTAGACACATCTTCCAGCACAGCCTACATGCAGCTCAGCAGCCTGACATCTGAGGACTCTGCG GTCTATTATTGTTCAACCGGGCCCTACTGGGGCCAAGGCACCATTCTCACAGTCTCCTCG
[0019]根据本专利技术的第四个方面，提供上述鼠抗MPT32蛋白单克隆抗体在制备用 于检测MPT32蛋白的试剂盒中的应用。
[0020]根据本专利技术的第五个方面，提供一种用于检测MPT32蛋白的试剂盒，该试 剂盒含有上述鼠抗MPT32蛋白单克隆抗体。
[0021]优选地，试剂盒为免疫层析检测试剂盒、酶联免疫试剂盒、化学发光试剂盒、 荧光免疫试剂盒或免疫比浊试剂盒。
[0022]根据本专利技术的第六个方面，提供上述鼠抗MPT32蛋白单克隆抗体在制备用 于检测MPT32蛋白的微流体芯片中的应用。
[0023]根据本专利技术的第七个方面，提供一种用于检测MPT32蛋白的微流体芯片， 该微流体芯片含有上述鼠抗MPT32蛋白单克隆抗体。
[0024]本专利技术的有益效果为：本专利技术提供了一种鼠抗MPT32蛋白杂交瘤细胞株 13B12，该细胞株分泌的鼠抗MPT32蛋白单克隆抗体与MPT32蛋白反应效价高， 使得鼠抗MPT32蛋白单克隆抗体适合作为免疫诊断试剂以本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种鼠抗MPT32蛋白杂交瘤细胞株13B12，于2022年1月9日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:C2021305。2.一种鼠抗MPT32蛋白单克隆抗体，其特征在于：由权利要求1所述鼠抗MPT32蛋白杂交瘤细胞株13B12分泌产生。3.如权利要求2所述鼠抗MPT32蛋白单克隆抗体，其特征在于：包括轻链可变区和重链可变区，所述轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。4.一种核酸分子，其特征在于：包含编码如权利要求2或3所述鼠抗MPT32蛋白单克隆抗体的核苷酸序列。5.如权利要求4所述核酸分子，其特征在于：所述核酸分子编码鼠抗MPT32蛋白单克隆抗体的轻链可变区的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示，所述核酸...
【专利技术属性】
技术研发人员：胡雪姣，顾兵，李靖，孙万阳，何皓，孟玥，肖云菊，凌勇，周典蓉，刘伟江，廖建枫，李智椋，翟文康，
申请(专利权)人：广东省人民医院，
类型：发明
国别省市：
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