茄二十八星瓢虫致死基因HvSrp54k及其应用制造技术

本申请公开了茄二十八星瓢虫致死基因HvSrp54k及其应用。本申请茄二十八星瓢虫致死基因HvSrp54k为Seq ID No.1所示序列。本申请的茄二十八星瓢虫致死基因HvSrp54k，是新发现的影响其发育的基因，通过沉默该基因HvSrp54k，能够高效致死茄二十八星瓢虫，为茄二十八星瓢虫的绿色防控提供了一种新的方案和途径。和途径。和途径。

【技术实现步骤摘要】
茄二十八星瓢虫致死基因HvSrp54k及其应用


[0001]本申请涉及茄二十八星瓢虫防治
，特别是涉及一种茄二十八星瓢虫致死基因HvSrp54k及其应用。

技术介绍

[0002]茄二十八星瓢虫Henosepilachna vigintioctopunctata属于鞘翅目瓢虫科，是茄科和葫芦科蔬菜上的重要害虫，危害范围极广，且部分地区危害较为严重。当前，茄二十八星瓢虫的防治主要依赖于化学杀虫剂，但是过量使用化学农药会使害虫产生抗药性，同时也会杀伤天敌以及传粉昆虫等有益生物，迫切需要研制防治茄二十八星瓢虫的环境友好型方法。
[0003]RNA干扰(RNA interference,RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA(double
‑
stranded RNA，dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。以RNAi为基础的RNAi抗虫技术，通过干扰控制害虫发育或重要行为的关键基因，阻碍害虫正常的生长和繁殖，甚至直接导致害虫死亡，从而达到害虫防控的目的。dsRNA在生物体内普遍存在，在环境中易降解，因此无毒、无残留，是一种新型绿色环保的害虫防控方法，展现出了广阔的应用前景。而获得高效安全的致死靶标基因是利用RNAi技术进行害虫防治的关键。近2年，本申请人建立了茄二十八星瓢虫饲喂法RNAi的技术体系，在茄二十八星瓢虫中鉴定得到了几个致死能力较高的靶标基因，如HvvATPase B、HvRPS18和HvRPL13、HvSnf7、HvvATPase A和HvvATPase E、Hvlwr、HvαCOPI和HvγCOPI等。随着茄二十八星瓢虫基因组和转录组测序的深入研究，以及对RNAi抗性决定因素和抗性机制有了更多的了解，研究发现更多的其他RNAi致死靶标基因将有助于基于RNAi技术的茄二十八星瓢虫防控的发展。

技术实现思路

[0004]本申请的目的是提供一种新的茄二十八星瓢虫致死基因HvSrp54k及其应用。
[0005]本申请采用了以下技术方案：
[0006]本申请的第一方面公开了一种茄二十八星瓢虫致死基因HvSrp54k，该基因HvSrp54k为Seq ID No.1所示序列。
[0007]需要说明的是，本申请的基因HvSrp54k是在茄二十八星瓢虫基因组和转录组序列中新发现的影响其发育的基因，通过沉默该基因HvSrp54k，能够高效致死茄二十八星瓢虫，为茄二十八星瓢虫的绿色防控提供了一种新的方案和途径。
[0008]本申请的第二方面公开了一种防治茄二十八星瓢虫的dsRNA，该dsRNA靶向沉默本申请的茄二十八星瓢虫致死基因HvSrp54k。
[0009]本申请的一种实现方式中，本申请的dsRNA为Seq ID No.2所示序列。
[0010]优选的，dsRNA的5
’
端和/或3
’
端还具有启动子序列。
[0011]优选的，启动子序列为T7启动子序列。
[0012]优选的，T7启动子序列为Seq ID No.3所示序列或其反向互补序列。
[0013]需要说明的是，Seq ID No.2所示序列的dsRNA只是本申请的一种实现方式中，能够有效沉默基因HvSrp54k的dsRNA序列；在本申请的专利技术构思基础上，不排除还可以设计出其他的能够沉默本申请的基因HvSrp54k的dsRNA序列，在此不做具体限定。
[0014]本申请的第三方面还公开了一种重组质粒，该重组质粒中含有本申请的茄二十八星瓢虫致死基因HvSrp54k，或者含有本申请的dsRNA或其表达基因。
[0015]需要说明的是，本申请的重组质粒，由于含有本申请的茄二十八星瓢虫致死基因HvSrp54k，或者本申请的dsRNA或其表达基因；能够用于制备沉默基因HvSrp54k的dsRNA或其他抑制基因HvSrp54k表达的产品。
[0016]本申请的第四方面还公开了一种细胞，该细胞含有本申请的茄二十八星瓢虫致死基因HvSrp54k，或者含有本申请的dsRNA或其表达基因，或者含有本申请的重组质粒。
[0017]需要说明的是，本申请的细胞，例如在含有本申请的重组质粒的情况下，能够通过培养、表达获得沉默基因HvSrp54k的dsRNA，或其制备他抑制基因HvSrp54k表达的产品。
[0018]本申请的第五方面还公开了本申请的茄二十八星瓢虫致死基因HvSrp54k或其抑制表达剂，或者本申请的dsRNA，或者本申请的重组质粒，或者本申请的细胞，在制备防治茄二十八星瓢虫的产品中的应用。
[0019]本申请的第六方面还公开了本申请的茄二十八星瓢虫致死基因HvSrp54k或其抑制表达剂，或者本申请的dsRNA，或者本申请的重组质粒，或者本申请的细胞，在制备抑制茄二十八星瓢虫生长的产品中的应用。
[0020]本申请的第七方面还公开了本申请的茄二十八星瓢虫致死基因HvSrp54k或其抑制表达剂，或者本申请的dsRNA，或者本申请的重组质粒，或者本申请的细胞，在制备促进茄二十八星瓢虫死亡的产品中的应用。
[0021]需要说明的是，通过沉默本申请的基因HvSrp54k，能够高效致死茄二十八星瓢虫；因此，本申请的茄二十八星瓢虫致死基因HvSrp54k或其抑制表达剂，或者本申请的dsRNA，或者本申请的重组质粒，或者本申请的细胞，能够用于制备防治茄二十八星瓢虫、抑制茄二十八星瓢虫生长或促进茄二十八星瓢虫死亡的产品。其中，茄二十八星瓢虫致死基因HvSrp54k的抑制表达剂，例如可以是本申请的dsRNA，也可以是其他已经公开的同源基因的抑制表达剂。
[0022]本申请的第八方面还公开了一种防治茄二十八星瓢虫的试剂盒，该试剂盒中含有本申请的茄二十八星瓢虫致死基因HvSrp54k或其抑制表达剂，或者本申请的dsRNA，或者本申请的重组质粒，或者本申请的细胞。
[0023]需要说明的是，本申请的试剂盒含有本申请的茄二十八星瓢虫致死基因HvSrp54k，可以用于制备沉默基因HvSrp54k的dsRNA或其他抑制基因HvSrp54k表达的产品，起到防治茄二十八星瓢虫的作用；或者直接含有茄二十八星瓢虫致死基因HvSrp54k的抑制表达剂，可以直接用于防治茄二十八星瓢虫；或者，试剂盒中含有本申请的dsRNA，也可以直接用于防治茄二十八星瓢虫；或者，试剂盒中含有本申请重组质粒，可以用于制备沉默基因HvSrp54k的dsRNA或其他抑制基因HvSrp54k表达的产品；或者，试剂盒中含有本申请的细胞，通过培养细胞表达本申请的dsRNA，其培养液直接用于防治茄二十八星瓢虫，或提取纯化后用于防治茄二十八星瓢虫。
[0024]本申请的有益效果在于：
[0025]本申请的茄二十八星瓢虫致死基因HvSrp54k，是新发现的影响其发育的基因，通过沉默该基因HvSrp54k，能够高效致死茄二十八星瓢虫，为茄二十八星瓢虫的绿色防控提供了一种新的方案和途径。
附图说明
[0026]图1是本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种茄二十八星瓢虫致死基因HvSrp54k，其特征在于：所述基因HvSrp54k为Seq ID No.1所示序列。2.一种防治茄二十八星瓢虫的dsRNA，其特征在于：所述dsRNA靶向沉默权利要求1所述的茄二十八星瓢虫致死基因HvSrp54k。3.根据权利要求2所述的dsRNA，其特征在于：所述dsRNA为Seq ID No.2所示序列。4.根据权利要求2或3所述的dsRNA，其特征在于：所述dsRNA的5
’
端和/或3
’
端还具有启动子序列；优选的，所述启动子序列为T7启动子序列；优选的，所述T7启动子序列为Seq ID No.3所示序列或其反向互补序列。5.一种重组质粒，其特征在于：所述重组质粒中含有权利要求1所述的茄二十八星瓢虫致死基因HvSrp54k，或者含有权利要求2
‑
4任一项所述的dsRNA或其表达基因。6.一种细胞，其特征在于：所述细胞含有权利要求1所述的茄二十八星瓢虫致死基因HvSrp54k，或者含有权利要求2
‑
4任一项所述的dsRNA或其表达基因，或者含有权利要求5所述的重...

【专利技术属性】
技术研发人员：潘广，陈诗敏，潘慧鹏，杨春晓，胡玉伟，黄萍，黄绍华，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：