一种肿瘤干细胞向神经元方向分化方法技术

本发明专利技术提供了一种肿瘤干细胞向神经元方向分化方法，该方法包括肿瘤干细胞获取，肿瘤干细胞向神经元诱导分化，分化后神经元的培养等；本发明专利技术并对分化后的神经元进行了一定的验证工作，证实了肿瘤干来源的神经元具备神经元的特异性标志物，并通过膜片钳验证了肿瘤干来源的神经元具有钠离子内流信号。源的神经元具有钠离子内流信号。源的神经元具有钠离子内流信号。

【技术实现步骤摘要】
一种肿瘤干细胞向神经元方向分化方法


[0001]本专利技术属于细胞生物学领域，尤其是涉及一种肿瘤干细胞向神经元方向分化方法。

技术介绍

[0002]肿瘤干细胞（CSCs）是一种具有类似于体细胞干细胞能力的癌细胞亚群。CSCs在肿瘤的发生、转移、复发和耐药过程中起着关键作用。绝大部分的肿瘤被认为起源于CSCs，这可能是导致肿瘤临床治疗原发性和获得性耐药的重要原因之一，因此，近年来对于肿瘤干细胞的研究吸引了国内外肿瘤基础科研的广泛关注。目前已知有少数几种人类肿瘤，可自发性地从未分化的恶性肿瘤退变为完全良性肿瘤，而神经母细胞瘤细胞分化为神经元细胞就属于其中之一。
[0003]随着干细胞与再生医学技术的不断发展，干细胞这一具有无限自我更新复制以及分化再生能力的原始细胞群体，在组织的修复与再生方面展现出了巨大的潜力。因此，很多科研人员开始致力于利用干细胞对退行性神经系统进行修复。而经过科研人员数年的探索，截止到目前为止，干细胞干预神经退行性疾病领域，已相继取得突破，为神经退行性疾病患者带来了新的希望。目前修复神经元的干细胞主要起源于神经干细胞，由本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种肿瘤干细胞向神经元方向分化方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：S1、肿瘤干细胞获取；S2、肿瘤干细胞向神经元诱导分化；S21、将肿瘤干细胞接种在分化培养基中培养3
‑
7天，中间每2天换液1次，其中分化培养基为包含FBS、MEM
‑
100x、青链霉素100x、全反式维甲酸ATRA和姜黄素的DMEM/F12完全培养基；S22、将分化后的细胞导入神经元维持培养基中继续培养7
‑
14天，神经元维持培养基为包含BDNF、NGF、MEM
‑
100x、青链霉素100x和B27
‑
50x的Neurobasal Medium A完全培养基。2.根据权利要求1所述的肿瘤干细胞向神经元方向分化方法，其特征在于：分化培养基中FBS的体积分数为1%
‑
8%，MEM
‑
100x的体积分数为0.5%
‑
2%，青链霉素100x的体积分数为0.1
‑
0.4%，ATRA的用量为每升1μM
‑
10μM，姜黄素的用量为每升0.5μM
‑
5μM。3.根据权利要求2所述的肿瘤干细胞向神经元方向分化方法，其特征在于：每100mL分化培养基中FBS的用量为5mL，MEM
‑
100x的用量为1mL，青链霉素100x的用量为200
µ
L，ATRA的用量为1
µ
M，姜黄素的用量为0.5
µ
M。4.根据权利要求1所述的肿瘤干细胞向神经元方向分化方法，其特征在于：神经元维持培养基中BDNF的浓度为10ng/mL
‑
80ng/mL，NGF的浓度为5ng/mL
‑<...

【专利技术属性】
技术研发人员：肖海蓉，刘庆喜，魏卿，房帅，
申请(专利权)人：深圳博雅感知药业有限公司，
类型：发明
国别省市：