一种从野生条斑钳蝎中分离纯化透明质酸酶的方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种从野生条斑钳蝎中分离纯化透明质酸酶的方法及应用，该方法由条斑钳蝎毒素为研究对象，通过电刺激法收集蝎素；利用冷冻干燥机进行干燥至白色粉末，在

【技术实现步骤摘要】
一种从野生条斑钳蝎中分离纯化透明质酸酶的方法及应用


[0001]本专利技术涉及蝎毒素活性酶
，具体涉及一种条斑钳蝎毒素中透明质酸酶的分离纯 化方法及应用。

技术介绍

[0002]全蝎是平肝熄风的常用药材之一，多被用于中医临床治疗痉挛抽搐、疮疡中毒、瘰疬结 核、风湿顽痹和顽固性偏正头痛等疾病，同时具有抗凝血、抗肿瘤、抗癫痫和抗菌等药理作 用。全蝎的毒性成分主要来自尾部的蝎毒液，蝎毒液化学成分为蛋白质和多肽类等，其中约 有10万种不同的神经毒素，已报道的仅有500余种，其蕴藏着大量结构新颖、活性独特的多 肽，它是多肽新药开发的资源库，具有很大的探索空间。
[0003]透明质酸酶是广泛分布于自然界中的一类糖苷酶，通过作用于β
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1，3或β
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1，4糖苷 键来降解透明质酸。此外，还可在一定程度上催化作用于软骨素和硫酸软骨素。透明质酸酶 首次发现于1929年，Duran
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Reynals在哺乳动物睾丸及其他组织提取物中发现一种可促进疫 苗、染料、毒素等扩散的扩散因子，随后被鉴定为透明质酸本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种从野生条斑钳蝎中分离纯化透明质酸酶的方法，其特征在于按下列步骤进行：a、用高频弱电流刺激法刺激蝎子尾节，采用小型按摩仪采毒，将连续感应电刺激档调频到128赫兹，电压为3
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7伏，用两个镊子分别与两个电极相连接，一个镊子夹住蝎子的一个触肢，另一个镊子夹在蝎子尾节毒囊腺体处，使整个系统产生带电通路，对蝎子产生电刺激，以排出毒液，若无反应，在电极与镊子接触的部位滴上几滴生理盐水，使蝎子毒囊腺体肌肉收缩，促其排毒，得到粗毒液；b、将步骤a得到的粗毒液，放入含冰水50 mL的离心管收集尾刺所排出的粗毒液；c、将步骤b中提取的粗毒液，用真空冷冻干燥机冻干，温度为
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80℃，压力为10 Pa，时间为24 h，得到总的粗毒素干粉；d、将步骤c中的粗毒素干粉，溶于20 mM，pH 4.5
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7 醋酸铵、磷酸或三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲溶液，震荡10 min，在温度4℃静止1 h，离心，温度4℃，时间10 min，转速为8000 rpm/min，取上清液；e、将步骤d中的上清液，用20 mM醋酸铵、磷酸或三羟甲基氨基甲烷盐酸盐缓冲液平衡的阳离子交换柱，上样量为80mg，流速为0.4
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2mL/min，用洗脱液为含0%
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【专利技术属性】
技术研发人员：阿布力米提，
申请(专利权)人：中国科学院新疆理化技术研究所，
类型：发明
国别省市：