一种检测用透明质酸酶液体制剂及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种检测用透明质酸酶液体制剂，所述液体制剂包括含有透明质酸酶的发酵产品、无机盐和纯化水，其中所述无机盐为不引起220

【技术实现步骤摘要】
一种检测用透明质酸酶液体制剂及其应用


[0001]本专利技术属于生物医药领域，具体涉及一种检测用透明质酸酶液体制剂及其应用。

技术介绍

[0002]透明质酸酶(hyaluronidase，HAase)，也称玻璃酸酶，是一种能够特异性水解透明质酸的酶类的总称。
[0003]早在1928年Duran
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Reynals在研究哺乳动物睾丸及其他组织提取物时发现了一种“扩散因子”，可以促进皮下注射的疫苗、染料、毒素等更好地扩散。1940年Meyer将这种“扩散因子”命名为Hyaluronidase。此后，人们在许多组织及生物体内检测到了透明质酸酶，包括细菌病毒、细菌、真菌等，非脊椎动物如水蛭、甲壳类动物的毒液中也产生透明质酸酶。脊椎动物中，在蛇、蜥蜴的毒液中，睾丸及其他器官如肝脏、肾脏、淋巴系统及皮肤中均发现透明质酸酶的存在。
[0004]透明质酸酶同样是透明质酸相关研究不可或缺的工具酶，专利CN201811508968.X一种测定透明质酸含量的方法，提供了利用透明质酸酶酶解透明质酸盐及相关产品进而测定透明质酸含量的方法。专利CN201810999774.8一种测定交联透明质酸凝胶体外酶解性能的方法，利用透明质酸酶对交联透明质酸酶解速率的不同，提供了一种测定交联透明质酸凝胶体外酶解性能的方法。专利CN201911259050.0一种三偏磷酸钠交联透明质酸粉末的制备方法及所得产品和应用，利用透明质酸酶确认了三偏磷酸钠交联透明质酸粉末与透明质酸相比的抗酶解性能。专利CN202010243080.9交联或高分子量透明质酸类物质的微生物限度检测方法，利用透明质酸酶降低交联或高分子量透明质酸溶液黏度，进而对其进行微生物限度的检测方法。
[0005]透明质酸酶制剂，常使用复杂的酶活保护剂、稳定剂、缓冲剂来保持其酶活的稳定性。专利CN201610081945.X一种重组人透明质酸酶液体制剂及其制备方法和应用，提供了一种重组人透明质酸酶液体制剂，包含组分：1400000～500000000IU重组人透明质酸酶、5～10g缓冲剂、60～180g冷冻保护剂、180～300g赋形剂、5～12g酶活保护剂和0.3～5g表面活性剂。专利CN201380057659.4用于透明质酸酶的稳定剂和包括透明质酸酶的液体制剂，所述稳定剂含有：缓冲剂，以提供pH 4.0至6.0；0.001至0.5v/v％的非离子表面活性剂；和0.1至5mM的螯合剂或MgCl2。这些稳定剂、保护剂、表面活性剂均会对透明质酸酶的应用产生一定的影响和干扰，特别是在含有透明质酸的复杂体系中，如饮料、化妆品溶液中的含量检测等。同时，若使用冻干粉制剂进行检测，在使用之前应重新制备成液体形式，使用不方便，同时在低浓度称量时，易导致检测不准确。

技术实现思路

[0006]针对现有技术存在的上述问题，本专利技术提供一种检测用透明质酸酶液体制剂及其应用，具体来说，本专利技术涉及如下方面：
[0007]1、一种检测用透明质酸酶液体制剂，其特征在于，所述液体制剂包括含有透明质
酸酶的发酵产品、无机盐和纯化水，其中所述无机盐为不引起220
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235nm紫外区吸收的盐。
[0008]2、根据项1所述的液体制剂，其特征在于，以所述液体制剂的体积为基准，所述液体制剂中透明质酸酶的含量为106～108IU/L。
[0009]3、根据项1所述的液体制剂，其特征在于，以所述液体制剂的体积为基准，所述无机盐的含量为10～300g/L，优选的含量为30～100g/L。
[0010]4、根据项1所述的液体制剂，其特征在于，所述含有透明质酸酶的发酵产品中透明质酸酶比活为104IU/mg～106IU/mg。
[0011]5、根据项1所述的液体制剂，其特征在于，所述含有透明质酸酶的发酵产品由芽孢杆菌(Bacillus sp.)A50 CGMCC NO.5744生产并纯化得到。
[0012]6、根据项1所述的液体制剂，其特征在于，所述无机盐为含氯无机盐。
[0013]7、根据项6所述的液体制剂，其特征在于，所述无机盐选自氯化钠和氯化钾中的一种或两种。
[0014]8、根据项1所述的液体制剂，其特征在于，所述液体制剂由含有透明质酸酶的发酵产品、无机盐和纯化水构成。
[0015]9、根据项1所述的液体制剂，其特征在于，所述液体制剂分装于无菌容器中。
[0016]10、透明质酸酶液体制剂在检测中的应用，所述透明质酸酶液体制剂为项1
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9中任一项所述的液体制剂。
[0017]本专利技术与现有技术相比，本专利技术提供了一种芽孢杆菌透明质酸酶液体制剂的极简配方，能够长期维持透明质酸酶酶活的稳定性，具有以下优点：
[0018]该透明质酸酶制剂采用芽孢杆菌透明质酸酶为主料，以10～300g/L的无机盐为稳定剂及防腐剂，成分单一，且为常用惰性盐分，不会对透明质酸酶制剂的使用产生干扰。
[0019]尽管该透明质酸酶制剂配方简单，但是能够保持良好的酶活稳定性，其在
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20℃冷冻条件下，透明质酸酶酶活可以在24个月内维持80％以上，在25℃下条件下酶活可以在30天内维持80％以上，在40℃条件下酶活可以在7天内维持80％以上，从而保证了良好的储存、使用、运输条件下的稳定性。
具体实施方式
[0020]下面结合实施例进一步说明本专利技术，应当理解，实施例仅用于进一步说明和阐释本专利技术，并非用于限制本专利技术。
[0021]除非另外定义，本说明书中有关技术的和科学的术语与本领域内的技术人员所通常理解的意思相同。虽然在实验或实际应用中可以应用与此间所述相似或相同的方法和材料，本文还是在下文中对材料和方法做了描述。在相冲突的情况下，以本说明书包括其中定义为准，另外，材料、方法和例子仅供说明，而不具限制性。以下结合具体实施例对本专利技术作进一步的说明，但不用来限制本专利技术的范围。
[0022]如上所述，透明质酸酶是透明质酸相关研究不可或缺的工具酶，在检测领域具有广泛的应用，例如可以用于测定样品中透明质酸或其盐的含量，测定透明质酸凝胶的体外酶解性能，测定交联透明质酸酶的抗酶解性能等。当前使用透明质酸酶进行检测时，通常需要将透明质酸冻干制剂配制为酶液进行使用。这种方式使用不方便，同时由于每次称量的量比较少，以及每次操作的差异，容易造成检测误差。而将透明质酸酶配制成液体制剂进行
检测，往往需要加入复杂的稳定剂或保护剂。为了解决上述问题，本专利技术提供一种使用方便的透明质酸酶液体制剂，所述液体制剂包括含有透明质酸酶的发酵产品、无机盐和纯化水，其中所述无机盐为不引起220
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235nm紫外区吸收的盐。进一步地，所述无机盐可以为含氯无机盐，优选的选自氯化钠和氯化钾中的一种或两种。无机盐在所述透明质酸酶制剂中作为透明质酸酶的稳定剂或保护剂，同时不会对检测产生影响。
[0023]其中，在配制料液时，含有透明质酸酶的发酵产品的形式不受限定，例如可以为发酵液上清、盐析复本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种检测用透明质酸酶液体制剂，其特征在于，所述液体制剂包括含有透明质酸酶的发酵产品、无机盐和纯化水，其中所述无机盐为不引起220
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235nm紫外区吸收的盐。2.根据权利要求1所述的液体制剂，其特征在于，以所述液体制剂的体积为基准，所述液体制剂中透明质酸酶的含量为106～108IU/L。3.根据权利要求1所述的液体制剂，其特征在于，以所述液体制剂的体积为基准，所述无机盐的含量为10～300g/L，优选的含量为30～100g/L。4.根据权利要求1所述的液体制剂，其特征在于，所述含有透明质酸酶的发酵产品中透明质酸酶比活为104IU/mg～106IU/mg。5.根据权利要求1所述的液体...

【专利技术属性】
技术研发人员：乔莉苹，周宁，郭学平，
申请(专利权)人：华熙生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：